Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖?。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對(duì)pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光...
一種發(fā)光雜環(huán)化合物,存在于生物發(fā)光的生物體中,如螢火蟲。在含有三磷酸腺苷的情況下,通過熒光素酶氧化脫羧產(chǎn)生光??捎糜跓晒馑孛干锇l(fā)光成像和細(xì)胞高通量篩選應(yīng)用。D-熒光素(D-Luciferin)是螢火熒光素酶底物,其量子效率為0.88,是Luminol的20倍...
脂質(zhì)體中輔助脂質(zhì)中性脂也經(jīng)常被用作陽離子脂質(zhì)體的助手。例如,已知中性脂質(zhì)1,2-二油基-asn-甘油-3-磷酸乙醇胺(DOPE)在胞吞作用后參與內(nèi)體逃逸,膽固醇(一種內(nèi)源性脂質(zhì))可以插入脂質(zhì)雙層之間以增加納米顆粒的剛性。為了增加體內(nèi)穩(wěn)定性,一種非常普遍的方法包...
管可用于實(shí)驗(yàn)室的熒光團(tuán)數(shù)量眾多,但這些染料通常屬于以下三組之一:熒光染料:這些是用于在體外標(biāo)記生物相關(guān)分子的小型有機(jī)天然或合成熒光分子。該組中的一些熒光染料包括熒光素、溴化乙錠和花青。熒光蛋白:這些是較大的、生物制造的蛋白質(zhì),由于它們的大分子結(jié)構(gòu)而發(fā)出熒光。G...
超聲微泡的粒徑大小直接影響微泡的動(dòng)物的體內(nèi)滲透和代謝。首先,與傳統(tǒng)藥物相比,超聲造影劑微泡相對(duì)較大。微泡的直徑一般為1-10um。**血管特別具有滲透性,通常有較大的內(nèi)皮間隙;然而,造影劑微泡通常太大而無法脫離脈管系統(tǒng)。在Wheatley等人**近的一篇文章中...
脂質(zhì)體的靶向釋放載藥脂質(zhì)體在體內(nèi)的行為主要受囊泡的吸收、分布和消除等各種藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的影響。肝臟、脾臟和骨髓中的固定組織巨噬細(xì)胞是脂質(zhì)體在靜脈給藥后可能進(jìn)入的主要部位。大脂質(zhì)體(>0.5μm直徑)被固定組織巨噬細(xì)胞和血液?jiǎn)魏思?xì)胞吞噬。對(duì)于小脂質(zhì)體(<0.1μm)...
脂質(zhì)體成功降低了綠色熒光蛋白(GFP)的表達(dá),并在H4II-E和HepG2細(xì)胞中顯示出較低的細(xì)胞毒性。在其他研究中,精氨酸衍生物N,N-distearyl-N-methyl-N-2-(N’-arginyl)aminoethylammoniumchloride被...
4PEG2000在脂質(zhì)體中的作用 PEG2000是一種聚乙二醇(PEG)衍生物,常用于脂質(zhì)體的表面修飾。它在脂質(zhì)體中具有多種作用:1.穩(wěn)定性增強(qiáng):PEG2000可以在脂質(zhì)體表面形成一層穩(wěn)定的水合層,防止脂質(zhì)體的聚集和沉淀,從而提高其在溶液中的穩(wěn)定性。...
在一項(xiàng)將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染到HUVEC中的研究中,使用包括Effectene和FuGENE 6在內(nèi)的非脂質(zhì)體試劑比脂質(zhì)體試劑DOTAP(18%)產(chǎn)生了更好的轉(zhuǎn)染效率(34%和33%)。在另一項(xiàng)用質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染HUVEC的研究中,與Effectene和FuGENE ...
注:建議對(duì)每只動(dòng)物模型都需要建立熒光素酶動(dòng)力學(xué)曲線,從而確定比較高信號(hào)檢測(cè)時(shí)間和信號(hào)平臺(tái)期。保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲(chǔ)存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復(fù)凍融。如果有條件,對(duì)儲(chǔ)存液充氮?dú)饣驓鍤猓ǚ乐寡趸?,穩(wěn)定性和保存時(shí)間更長(zhǎng)...
CY7是一種CY染料。CY為花菁(Cyanine)的縮寫,是由奇數(shù)個(gè)甲基單元連接的兩個(gè)氮原子組成的化合物。菁類化合物具有波長(zhǎng)長(zhǎng)、吸收和發(fā)射可調(diào)、消光系數(shù)高的特點(diǎn)CY系染料常被用于蛋白、抗體以及小分子化合物的標(biāo)記,對(duì)于蛋白抗體的標(biāo)記,可以通過簡(jiǎn)單的混合反應(yīng)來完成...
納米顆粒在疫苗遞送中往往表現(xiàn)出***的佐劑作用。陽離子聚合物,包括PEI、聚賴氨酸、陽離子葡聚糖和陽離子明膠,已經(jīng)有報(bào)道顯示出對(duì)Th1反應(yīng)的強(qiáng)烈刺激,其特征是誘導(dǎo)CD4(+)T細(xì)胞增殖和th1相關(guān)細(xì)胞因子的分泌。此外,陽離子聚合物強(qiáng)烈抑制LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞分...
質(zhì)子泵抑制劑可以通過基于從一個(gè)供體蛋白到受體蛋白的能量轉(zhuǎn)移的物理測(cè)量來評(píng)估,也可以通過化學(xué)測(cè)量來評(píng)估,在化學(xué)測(cè)量中,表達(dá)的蛋白質(zhì)與另一種蛋白質(zhì)之間的相互作用活性可以在刺激時(shí)通過適當(dāng)?shù)膱?bào)告系統(tǒng)來檢測(cè)。后一種基于熒光素酶的方法被稱為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)...
Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖?。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右,它的熒光肉眼觀察很明亮,并且對(duì)pH不敏感,在共聚焦顯微鏡中可以用532nm(肩峰)或者556nm(頂峰)的激光束激發(fā),在普通熒光...
此外,病毒濃度被認(rèn)為是影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個(gè)因素。在Haas等人的評(píng)估中測(cè)試的其他幾個(gè)參數(shù)中,即含有不同輔助蛋白的HIV慢病毒載體構(gòu)建,纖維連接蛋白片段的存在/不存在以及在人臍帶血和胚胎腎細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)培養(yǎng)基中添加多陽離子硫酸魚精蛋白,只有病毒滴度似乎與病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率...
Severinoetal.進(jìn)行的研究也指出了陽離子脂質(zhì)作為基因遞送納米載體的潛在毒性。他們成功實(shí)現(xiàn)了人動(dòng)力蛋白的表達(dá),但也證明了較高濃度的SLN仍然具有細(xì)胞毒性,并導(dǎo)致活細(xì)胞數(shù)量減少。另一組比較了DNA/DOTAP復(fù)合物和由魚精蛋白、DNA和脂質(zhì)層組成的納米顆...
此外,病毒濃度被認(rèn)為是影響轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的另一個(gè)因素。在Haas等人的評(píng)估中測(cè)試的其他幾個(gè)參數(shù)中,即含有不同輔助蛋白的HIV慢病毒載體構(gòu)建,纖維連接蛋白片段的存在/不存在以及在人臍帶血和胚胎腎細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)培養(yǎng)基中添加多陽離子硫酸魚精蛋白,只有病毒滴度似乎與病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率...
在一項(xiàng)將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染到HUVEC中的研究中,使用包括Effectene和FuGENE 6在內(nèi)的非脂質(zhì)體試劑比脂質(zhì)體試劑DOTAP(18%)產(chǎn)生了更好的轉(zhuǎn)染效率(34%和33%)。在另一項(xiàng)用質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染HUVEC的研究中,與Effectene和FuGENE ...
RNA和信使RNA與DNA轉(zhuǎn)染類似,RNA可以通過基于RNA的病毒或非病毒載體導(dǎo)入真核細(xì)胞。與涉及DNA的轉(zhuǎn)染相比,RNA轉(zhuǎn)染可能產(chǎn)生更高的轉(zhuǎn)染效率,因?yàn)楹笳卟恍枰┰胶四?。在不需要基因組整合、轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后處理的情況下,RNA轉(zhuǎn)染也可能加速所需蛋白質(zhì)的產(chǎn)生。使...
Severinoetal.進(jìn)行的研究也指出了陽離子脂質(zhì)作為基因遞送納米載體的潛在毒性。他們成功實(shí)現(xiàn)了人動(dòng)力蛋白的表達(dá),但也證明了較高濃度的SLN仍然具有細(xì)胞毒性,并導(dǎo)致活細(xì)胞數(shù)量減少。另一組比較了DNA/DOTAP復(fù)合物和由魚精蛋白、DNA和脂質(zhì)層組成的納米顆...
SUPERGreenI(10,000×DMSO溶液,電泳級(jí))儲(chǔ)存條件及注意事項(xiàng)4℃避光可保存12個(gè)月。本品用DMSO溶解,因DMSO的熔點(diǎn)是18.5℃,使用前請(qǐng)放置到室溫充分溶解。SUPERGreenI核酸染料特點(diǎn)●無毒性:屬花菁類染料,容易生物降解,無致*毒...
小RNA和質(zhì)粒DNA的共轉(zhuǎn)染可用于評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。這可以通過引入含有熒光素酶報(bào)告基因的質(zhì)粒來實(shí)現(xiàn),其中的3'UTR可以被特定的小RNA(如miRNA)識(shí)別,然后允許小RNA結(jié)合以抑制熒光素酶的表達(dá)。另一方面,在RNA干擾(RNAi)研究中,小RNA和質(zhì)粒DNA的...
細(xì)胞培養(yǎng)后,需要對(duì)其生長(zhǎng)情況、形態(tài)甚至生物學(xué)性狀進(jìn)行觀察。由于細(xì)胞小而復(fù)雜,若不借助適當(dāng)?shù)氖侄?,難以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu),更難發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前,已有多種研究細(xì)胞的技術(shù),從光學(xué)顯微鏡到電子顯微鏡,從一般細(xì)胞化學(xué)法到免疫化學(xué)法。細(xì)胞染色是研...
與花青和羅丹明染料一樣,熒光素也是一種有機(jī)染料。熒光素的比較大吸收波長(zhǎng)為494nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)為521nm(通常吸收藍(lán)色范圍內(nèi)的光并發(fā)射綠色范圍內(nèi)的光),熒光素是一種高熒光物質(zhì)。即使在非常少量的情況下也可以檢測(cè)到它,并且在與抗體結(jié)合時(shí)用于顯微鏡檢查。熒光素...
納米顆粒的尺寸很小,但它們比其他顆粒具有更大的粘附表面,同時(shí)具有高穩(wěn)定性。正因?yàn)槿绱耍鼈兡軌虺晒Φ卮┻^細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞,并與自然發(fā)生的細(xì)胞內(nèi)途徑結(jié)合,具有將特定顆粒帶到預(yù)定目標(biāo)位置的***準(zhǔn)確性。由于納米顆粒在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸和保護(hù)化合物方面具有巨大的潛力,可以避...
質(zhì)子泵抑制劑可以通過基于從一個(gè)供體蛋白到受體蛋白的能量轉(zhuǎn)移的物理測(cè)量來評(píng)估,也可以通過化學(xué)測(cè)量來評(píng)估,在化學(xué)測(cè)量中,表達(dá)的蛋白質(zhì)與另一種蛋白質(zhì)之間的相互作用活性可以在刺激時(shí)通過適當(dāng)?shù)膱?bào)告系統(tǒng)來檢測(cè)。后一種基于熒光素酶的方法被稱為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)...
評(píng)估轉(zhuǎn)染效率至關(guān)重要,特別是在需要高轉(zhuǎn)染效率以保證特定下游靶標(biāo)轉(zhuǎn)錄后調(diào)控的功能研究中??梢赃x擇多種策略來評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(qPCR)是一種通過直接測(cè)量特定外源蛋白表達(dá)水平來評(píng)估轉(zhuǎn)染效率的定量方法。細(xì)胞內(nèi)核酸或其他可能受到外源核酸(如miRNAs)...
如何選擇的染料? 考慮到熒光染料種類繁多,您如何為您的特定應(yīng)用選擇使用哪種染料?以下是您需要考慮的一些因素?!c實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的兼容性:雖然它們可能與其他熒光團(tuán)共享一些光譜相似性,但每種染料都是***的,并且具有不同的功能、激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)、波段形狀和寬度以...
流式細(xì)胞術(shù)可以更精確地定量表達(dá)特定熒光基因的細(xì)胞,以評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。另一種評(píng)估轉(zhuǎn)染效率的方法是通過監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)染后的特定蛋白表達(dá)。將轉(zhuǎn)基因引入細(xì)胞可能會(huì)改變由轉(zhuǎn)基因或細(xì)胞中其他基因編碼的蛋白質(zhì)的表達(dá)。同樣,轉(zhuǎn)染小RNA也可以調(diào)節(jié)宿主細(xì)胞中特定下游遺傳靶點(diǎn)的表達(dá)。免疫印...
**近一項(xiàng)與抗血管生成基因傳遞高度相關(guān)的發(fā)現(xiàn)是,陽離子脂質(zhì)體(CLs)選擇性地靶向**的血管系統(tǒng)。陰離子或電中性脂質(zhì)體沒有發(fā)現(xiàn)這種作用。Campbell和他的同事[95]發(fā)現(xiàn),與電中性脂質(zhì)體相比,使用CLs在**血管內(nèi)皮細(xì)胞(VECs)中積累更多,CLs通過添...