Cy3 (Cyanine 3) 是一種發(fā)橘黃色熒光的花青素?zé)晒馊玖?。Cy3染料的激發(fā)峰和發(fā)射峰分別在550 nm和570 nm左右，它的熒光肉眼觀察很明亮，并且對(duì)pH不敏感，在共聚焦顯微鏡中可以用532nm（肩峰）或者556nm（頂峰）的激光束激發(fā)，在普通熒光...

“主動(dòng)靶向”一詞指的是用特定生物標(biāo)志物標(biāo)記的超聲微泡，允許它們被驅(qū)動(dòng)到特定的目標(biāo)。由于抗體-抗原或配體-受體相互作用的特異性，這種策略可以提高M(jìn)NB遞送的效率?？梢允褂酶鞣N配體來(lái)提高載藥超聲微泡對(duì)***斑塊的靶向效率和特異性結(jié)合，如碳水化合物、蛋白質(zhì)、核酸和多...

微泡空化時(shí)細(xì)胞膜和血管通透性的變化。電子顯微鏡已經(jīng)證明，在細(xì)胞膜內(nèi)產(chǎn)生的小孔與微泡的崩潰和射流的產(chǎn)生有關(guān)。根據(jù)超聲參數(shù)，細(xì)胞膜內(nèi)產(chǎn)生的孔隙可能是短暫的，導(dǎo)致細(xì)胞死亡或成功地將外源物質(zhì)引入細(xì)胞質(zhì)。除了改變細(xì)胞膜通透性外，將超聲應(yīng)用于含有微泡的小血管還能改變血管壁...

在各種類(lèi)型的脂質(zhì)體中，免疫脂質(zhì)體因其靶向能力而受到***關(guān)注。 由于存在附著在其表面的抗體，這些脂質(zhì)體表現(xiàn)出免疫應(yīng)答。免疫脂質(zhì)體的制備， 即抗體與脂質(zhì)體的偶聯(lián)，并不是那么簡(jiǎn)單， 甚至在其配方過(guò)程中可能會(huì)帶來(lái)挑戰(zhàn)。 蛋白質(zhì)分子和單克隆抗體可以直接偶聯(lián)到脂質(zhì)體、聚...

microRNA脂質(zhì)體 microRNA是真核細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的短(約22mer)非編碼RNA，通過(guò)結(jié)合互補(bǔ)的mRNA序列發(fā)揮生物調(diào)節(jié)劑的作用。miRNA以初級(jí)miRNA的形式從其編碼的核基因轉(zhuǎn)錄，其長(zhǎng)度為數(shù)百個(gè)核苷酸。RNaseIII酶，Drosha，將...

超聲微泡作為納米醫(yī)學(xué)，在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的診斷和***方面具有多方面的優(yōu)勢(shì)，目前，超聲微泡已發(fā)展為多模態(tài)造影劑、光熱劑和***劑。市面上有各種商用mb造影劑，如Levovist、Definity、option、Sonazoid和Sonovue，具有不同的特性、成分和尺...

脂質(zhì)體用于**的***LNPs在藥物遞送中的比較大單一應(yīng)用是*****，因?yàn)長(zhǎng)NPs包被抗**藥物比游離藥物具有更好的生物利用度和選擇性。脂質(zhì)納米載體降低了***藥物對(duì)正常組織的毒性，增加了疏水藥物的水溶性，延長(zhǎng)了藥物停留時(shí)間，改善了對(duì)藥物釋放的控制。LNPs...

如何選擇的染料？ 考慮到熒光染料種類(lèi)繁多，您如何為您的特定應(yīng)用選擇使用哪種染料？以下是您需要考慮的一些因素。※與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的兼容性：雖然它們可能與其他熒光團(tuán)共享一些光譜相似性，但每種染料都是***的，并且具有不同的功能、激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)、波段形狀和寬度以...

轉(zhuǎn)染試劑的凍融被認(rèn)為是另一個(gè)可能影響轉(zhuǎn)染效率的潛在因素。Lipofectamine2000試劑與非冷凍對(duì)照相比，至少經(jīng)歷一次凍融循環(huán)后，HEK293、Neuro2α、C2C12成肌細(xì)胞和肌管、hTERTMSC、SMA和HepG2細(xì)胞系的轉(zhuǎn)染效率更高，且細(xì)胞活力...

質(zhì)子泵抑制劑可以通過(guò)基于從一個(gè)供體蛋白到受體蛋白的能量轉(zhuǎn)移的物理測(cè)量來(lái)評(píng)估，也可以通過(guò)化學(xué)測(cè)量來(lái)評(píng)估，在化學(xué)測(cè)量中，表達(dá)的蛋白質(zhì)與另一種蛋白質(zhì)之間的相互作用活性可以在刺激時(shí)通過(guò)適當(dāng)?shù)膱?bào)告系統(tǒng)來(lái)檢測(cè)。后一種基于熒光素酶的方法被稱為生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET)...

FITC熒光標(biāo)記蛋白的應(yīng)用及特點(diǎn):活性熒光染料，如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、羅丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料，可用于標(biāo)記抗體或蛋白質(zhì)功能基團(tuán)，生成分子探針，并通過(guò)熒光成像進(jìn)行檢測(cè)。當(dāng)用熒光染料化學(xué)標(biāo)記特異性抗體...

脂質(zhì)體疫苗通常在已知疫苗中使用純化抗原或減毒病原體作為免疫原。然而，長(zhǎng)期的免疫反應(yīng)可能不會(huì)由純化抗原誘導(dǎo)，甚至有時(shí)根本不會(huì)誘導(dǎo)反應(yīng)。另一方面，減毒疫苗可以在免疫的患者中產(chǎn)生應(yīng)答。然而，遞送包裹在脂質(zhì)體內(nèi)的抗原可誘導(dǎo)長(zhǎng)期應(yīng)答，這在某些抗原的直接免疫中沒(méi)有觀察到。...

載藥脂質(zhì)體如何純化如果需要純化載藥脂質(zhì)體，通常會(huì)根據(jù)載藥脂質(zhì)體的性質(zhì)和所需純度要求選擇合適的純化方法。以下是一些可能的純化方法：1.超濾法：超濾可以用于去除較大的雜質(zhì)和未包埋的藥物。通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)姆肿恿拷刂鼓?，將載藥脂質(zhì)體溶液經(jīng)過(guò)超濾膜，較大的雜質(zhì)和未包埋的藥...

脂質(zhì)體的靶向釋放載藥脂質(zhì)體在體內(nèi)的行為主要受囊泡的吸收、分布和消除等各種藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的影響。肝臟、脾臟和骨髓中的固定組織巨噬細(xì)胞是脂質(zhì)體在靜脈給藥后可能進(jìn)入的主要部位。大脂質(zhì)體(>0.5μm直徑)被固定組織巨噬細(xì)胞和血液?jiǎn)魏思?xì)胞吞噬。對(duì)于小脂質(zhì)體(<0.1μm)...

載藥脂質(zhì)體如何純化如果需要純化載藥脂質(zhì)體，通常會(huì)根據(jù)載藥脂質(zhì)體的性質(zhì)和所需純度要求選擇合適的純化方法。以下是一些可能的純化方法：1.超濾法：超濾可以用于去除較大的雜質(zhì)和未包埋的藥物。通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)姆肿恿拷刂鼓?，將載藥脂質(zhì)體溶液經(jīng)過(guò)超濾膜，較大的雜質(zhì)和未包埋的藥...

在大腸桿菌細(xì)胞中復(fù)制的質(zhì)粒通常含有二核苷酸頻率為1:16的CpG基序，這與細(xì)菌DNA中的頻率相似。CpG免疫刺激的兩個(gè)應(yīng)用領(lǐng)域是疫苗接種和腫瘤免疫***。許多出版物表明，免疫刺激CpG基序可以用于疫苗接種策略，包括給藥編碼抗原的pDNA載體或給藥抗原本身。通過(guò)...

脂質(zhì)體制備方法：薄膜?化法薄膜?化法是?種傳統(tǒng)的技術(shù)，有利于裝載親脂***物。薄膜是通過(guò)在真空條件下燒瓶旋轉(zhuǎn)過(guò)程中使脂質(zhì)溶劑溶液蒸發(fā)?形成的。MLVs懸浮液可以通過(guò)加??溶液?化脂膜得到。進(jìn)?步縮?粒徑可獲得SUV，在脂質(zhì)體形成過(guò)程中或形成脂質(zhì)體后，可分別被動(dòng)...

**初的微泡靶向?qū)嶒?yàn)是在靜態(tài)條件下進(jìn)行的:將氣泡與目標(biāo)表面接觸(通常是倒置)，在沒(méi)有流動(dòng)的情況下孵育幾分鐘，然后將剩余的自由氣泡洗掉，測(cè)量保留氣泡的數(shù)量和聲學(xué)響應(yīng)。然而，這種情況并不是脈管系統(tǒng)內(nèi)真正靶向的良好模型，在脈管系統(tǒng)內(nèi)，結(jié)合發(fā)生時(shí)沒(méi)有任何流動(dòng)停止。取決...

幾種類(lèi)型的配體已被偶聯(lián)到微泡上，包括抗抗體、多肽和維生素。單克隆抗體，特別是免疫球蛋白-v（IgG）家族的單克隆抗體，已***用于靶向細(xì)胞表面受體。單克隆抗體用途***，在納摩爾到皮摩爾范圍內(nèi)具有結(jié)合親和力。然而，當(dāng)來(lái)源于小鼠時(shí)，它們往往具有免疫原性。用于靶向...

將配體附著在微泡表面的基本方法有兩種：要么通過(guò)直接共價(jià)鍵，要么通過(guò)生物素-親和素連接。生物素-親和素連接是一種直接的技術(shù)，其中生物素化的配體通過(guò)親和素橋連接到生物素化的微泡上。盡管生物素-親和素連鎖在概念驗(yàn)證和臨床前靶向研究中很有用，但免疫原性使其無(wú)法轉(zhuǎn)化為人...

轉(zhuǎn)染是將外來(lái)核酸傳遞到真核細(xì)胞中以修飾宿主細(xì)胞的遺傳組成的過(guò)程。在過(guò)去的30年里，轉(zhuǎn)染因其廣泛應(yīng)用于研究疾病的細(xì)胞過(guò)程和分子機(jī)制而越來(lái)越受歡迎。了解疾病的分子途徑，可以發(fā)現(xiàn)可能用于疾病診斷和預(yù)后的特定生物標(biāo)志物。此外，轉(zhuǎn)染可以作為基因***中的策略之一，用于*...

由于CRISPR/Cas的發(fā)現(xiàn)，基因組編輯領(lǐng)域經(jīng)歷了一場(chǎng)**。細(xì)菌免疫系統(tǒng)的CRIPSR/Cas成分導(dǎo)致全基因組雙鏈DNA斷裂，并通過(guò)內(nèi)部DNA修復(fù)過(guò)程促進(jìn)基因編輯。有研究指出，陽(yáng)離子聚合物聚乙二胺-環(huán)糊精(PC)有助于編碼Cas9和sgRNA的質(zhì)粒的有效遞送...

三、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)D-熒光素鉀鹽體外生物發(fā)光試驗(yàn)：D-熒光素鉀鹽，無(wú)菌純水，完全培養(yǎng)基（自行配制）1、貼壁細(xì)胞：將細(xì)胞接種于培養(yǎng)板中孵育數(shù)小時(shí)或過(guò)夜，使細(xì)胞貼壁。懸浮細(xì)胞：可以將細(xì)胞接種于培養(yǎng)板后直接進(jìn)行后續(xù)操作，無(wú)需孵育。如果倍增時(shí)間相對(duì)較短，則應(yīng)考慮倍增時(shí)間進(jìn)行...

熒光標(biāo)記技術(shù)是指運(yùn)用熒光染料與待研究對(duì)象結(jié)合，利用它的熒光特性，提供待研究對(duì)象相關(guān)信息。熒光標(biāo)記具有操作簡(jiǎn)便、高穩(wěn)定性、高靈敏度等優(yōu)勢(shì)，使熒光染料在生命科學(xué)研究中應(yīng)用，包括：標(biāo)記活細(xì)胞或固定細(xì)胞中的蛋白質(zhì)、多肽；作為功能性指示劑表征細(xì)胞健康狀況；設(shè)計(jì)各種熒...

為什么要使用熒光染料？雖然不同的染色技術(shù)（即考馬斯染色、銀染色、熒光染色）可用于可視化凝膠電泳分離的蛋白質(zhì)，但使用熒光染料具有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。他們提供：高靈敏度：對(duì)于大多數(shù)分析物，熒光測(cè)量的靈敏度比吸光度測(cè)量高1000倍，即使在使用小樣本時(shí)也可以令人滿意地達(dá)到p...

羅丹明屬于呫噸族。與市場(chǎng)上的許多其他染料相比，羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性，使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。它們?cè)诰酆衔锛{米粒子表面的表征、聚合物-生物偶聯(lián)物的檢測(cè)、活細(xì)胞的成像以及寡核苷酸在膠乳上的吸附分析等方面特別有用。羅丹明熒光染...

酸性環(huán)境(pH值2.0-4.0)通常?于產(chǎn)??于活***物裝載的跨膜pH梯度。在37℃和pH2.0條件下，SM/Chol脂質(zhì)體(55/45,mol/mol)的?解速率?DSPC/Chol脂質(zhì)體慢約100倍。此外，含有SM/Chol的脂質(zhì)體表現(xiàn)出比較好的藥代動(dòng)?...

小RNA和質(zhì)粒DNA的共轉(zhuǎn)染可用于評(píng)估轉(zhuǎn)染效率。這可以通過(guò)引入含有熒光素酶報(bào)告基因的質(zhì)粒來(lái)實(shí)現(xiàn)，其中的3'UTR可以被特定的小RNA(如miRNA)識(shí)別，然后允許小RNA結(jié)合以抑制熒光素酶的表達(dá)。另一方面，在RNA干擾(RNAi)研究中，小RNA和質(zhì)粒DNA的...

PEI的分子量對(duì)細(xì)胞毒性和基因轉(zhuǎn)移活性有影響。由于PEI在細(xì)胞內(nèi)不可降解，所以分子量越高，細(xì)胞毒性越強(qiáng)。此外，具有較高分子量的PEI形成更穩(wěn)定的聚合物，使其更容易轉(zhuǎn)染，但更難在細(xì)胞內(nèi)釋放核酸。另一方面，PEI產(chǎn)生的復(fù)合物分子量降低，更難以轉(zhuǎn)染;但它更容易釋放核...

脂質(zhì)體核酸疫苗的穩(wěn)定性和儲(chǔ)存性脂質(zhì)納米顆粒-mrna制劑的儲(chǔ)存條件是其臨床轉(zhuǎn)化的重要考慮因素，因?yàn)閮?chǔ)存(水、冷凍和凍干儲(chǔ)存)和冷凍保護(hù)劑(蔗糖、海藻糖或甘露醇)的類(lèi)型會(huì)影響脂質(zhì)納米顆粒-mrna制劑的長(zhǎng)期穩(wěn)定性168。例如，將5%(w/v)的蔗糖或海藻糖添加到...