影響成像的清晰度提高圖像對比度:穩(wěn)定的熒光染料可以在較長時間內保持較高的熒光強度,使得目標組織與周圍組織之間的對比度更高。例如,在ATP熒光納米探針基于ZIF-90和近紅外染料用于**小鼠成像的研究中,CP@ZIF-90納米探針具有***的光穩(wěn)定性和化學穩(wěn)定性...
基于堿性氨基酸的陽離子脂質體已被研究其增強血清中陽離子脂質體穩(wěn)定性的潛力。對賴氨酸化膽固醇、組氨酸化膽固醇和精氨酸化膽固醇進行了檢測, 賴氨酸化膽固醇和精氨酸化膽固醇脂基陽離子脂質體在含血清培養(yǎng)基中表現(xiàn)出 更有效的轉染質粒DNA。精胺與膽固醇或長鏈碳氫化合物...
異硫氰酸熒光素(FITC)是一種有機熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細胞術中。在495/517nm處,該染料會產(chǎn)生激發(fā)/發(fā)射峰值,并可借助異硫氰酸鹽反應基團與不同抗體結合,該基團可以和蛋白質上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團相結合。而它的...
生物醫(yī)學領域在細胞熒光成像中,近紅外氧雜蒽熒光染料可用于細胞熒光染色成像,如熒光染料NXD-3具有良好的細胞線粒體靶向熒光標記效果5。通過特定的熒光染料可以對細胞內的特定結構進行標記,有助于研究人員觀察細胞的內部結構和功能。高分辨率熔解分析(HRM)中,不同的...
異硫氰酸熒光素(FITC)是一種有機熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細胞術中。在495/517nm處,該染料會產(chǎn)生激發(fā)/發(fā)射峰值,并可借助異硫氰酸鹽反應基團與不同抗體結合,該基團可以和蛋白質上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團相結合。而它的...
對篩選的陽離子脂質進行了研究,以6.25mg/kg的劑量給食蟹猴全身給藥載脂蛋白B特異性siRNA,據(jù)報道,在2周內,肝組織中載脂蛋白B的表達減少了50%以上。近年來,研究人員合成了多種陽離子脂質體,并試圖找到一種可有效遞送質粒DNA的陽離子脂質體組合物。在新...
微流體法制備脂質體是一種先進的技術,具有很多優(yōu)勢,如能夠精確控制脂質體的尺寸、提高脂質體的均勻性等。以下是微流體法制備脂質體的關鍵技術參數(shù):一、流量比(FRR)流量比是微流體法制備脂質體的一個關鍵參數(shù)。在多個研究中都表明了FRR對脂質體的性能有著重要影響。例如...
超聲溶栓是一種用于溶解***引起的血管血栓(血栓)的***方法。***過程是利用MNB造影劑與超聲聯(lián)合產(chǎn)生空化效應,以破壞纖維蛋白網(wǎng)。Ling等人利用EDC/NHS偶聯(lián)cRGD肽,利用溶劑乳液蒸發(fā)法制備了環(huán)arg - gys - asp (cRGD)靶向PLG...
氣泡將改變血管壁,允許藥物劑外滲,通過將微泡與顆粒和染料共同注射,可評估血管外藥物遞送的可行性。微泡與釓共注射后MRI顯示釓外反酸?;蛘?,藥物可以被納入微泡中,并通過在病變的給藥血管中選擇性地破裂微泡來增加局部給藥。然而,這些方法并不能消除流動血液中釋放的藥物...
超聲微泡的大小差異影響超聲微泡的藥代動力學、病變部位靶向、內吞過程和細胞攝取。人體生物系統(tǒng)對不同顆粒的反應不同,小于8μm的氣泡具有模擬紅細胞循環(huán)的優(yōu)點,從而促進其擴散到血管和***間的循環(huán)中。除此之外,氣泡的大小不應超過8μm,因為它可能導致并發(fā)癥,如血流中...
轉染時通常推薦使用血清減少或無血清培養(yǎng)基,包括陽離子轉染試劑,如Lipofectamine、HiperFect 和EndofectinMax。這種轉染活動需要形成陽離子脂質體-DNA復合物,這需要帶正電的脂質體分子和帶負電的核酸之間的相互作用。因此,血清中負電...
氣泡在靶區(qū)域的聚集和藥物的釋放主要依賴于各種外源性和內源性刺激,并不是由特異性的主動靶向引起的。EPR和血管生成相關表面受體的(過)表達是**血管的關鍵特征。因此,epr介導的被動靶向和基于配體的主動靶向引起了相當大的關注。Kunjachan等人使用RGD和n...
此外,病毒濃度被認為是影響轉導效率的另一個因素。在Haas等人的評估中測試的其他幾個參數(shù)中,即含有不同輔助蛋白的HIV慢病毒載體構建,纖維連接蛋白片段的存在/不存在以及在人臍帶血和胚胎腎細胞的轉導培養(yǎng)基中添加多陽離子硫酸魚精蛋白,只有病毒滴度似乎與病毒轉導效率...
不同種類的納米顆粒轉染細胞系后,產(chǎn)生不同的效率、毒性和組織特異性。這些大量的測試表明,納米顆粒作為載體的效率與普通的非病毒轉染方法相當。Tabatt等人所做的研究比較了使用脂質體、陽離子固體li-pid納米顆粒和兩種商用轉染劑對COS-1細胞系(非洲綠猴腎成纖...
PLL(聚L -賴氨酸)是生理條件下帶正電的多氨基酸,當鏈長超過20個殘基時,它可以與質粒DNA結合并凝聚成致密顆粒。研究人員發(fā)現(xiàn),配體在PLL上的共價附著可通過受體介導的途徑***增強內吞作用。例如,涎腺樣體(ASOR)是涎腺糖蛋白受體的配體,在肝細胞上表達...
在一項將質粒DNA轉染到HUVEC中的研究中,使用包括Effectene和FuGENE 6在內的非脂質體試劑比脂質體試劑DOTAP(18%)產(chǎn)生了更好的轉染效率(34%和33%)。在另一項用質粒DNA轉染HUVEC的研究中,與Effectene和FuGENE ...
化學轉染可分為基于脂質體或非基于脂質體?;谥|體的轉染試劑是一種化學物質,它能夠形成帶正電的脂質聚集體,這些聚集體可以與宿主細胞的磷脂雙分子層順利融合,從而允許外來遺傳物質以**小的阻力進入。另一方面,非脂質體轉染試劑可進一步分為幾類,包括磷酸鈣、樹狀大分子...
在7種轉染試劑(DAC-30、DC-30、Lipofectin、LipofectAMINEPLUS、Effectene、FuGene 6和superect)中,F(xiàn)uGene 6轉染HASMCs和α-10 SMCs的效率比較高。在這兩種細胞系中,superect...
評估轉染效率至關重要,特別是在需要高轉染效率以保證特定下游靶標轉錄后調控的功能研究中??梢赃x擇多種策略來評估轉染效率。實時聚合酶鏈反應(qPCR)是一種通過直接測量特定外源蛋白表達水平來評估轉染效率的定量方法。細胞內核酸或其他可能受到外源核酸(如miRNAs)...
熒光標記的靶向微泡在非心臟病血管的應用。使用熒光微泡可以通過***顯微鏡實現(xiàn)超聲造影劑靶向的驗證。特異性配體包括抗p選擇素的抗體,該抗體可通過局部給藥腫瘤壞死因子(TNF)-進行化學誘導。通過顯微鏡和超聲觀察到***后小靜脈內抗p選擇靶向氣泡和白細胞的聚集。缺...
轉染試劑的凍融被認為是另一個可能影響轉染效率的潛在因素。Lipofectamine2000試劑與非冷凍對照相比,至少經(jīng)歷一次凍融循環(huán)后,HEK293、Neuro2α、C2C12成肌細胞和肌管、hTERTMSC、SMA和HepG2細胞系的轉染效率更高,且細胞活力...
在選擇合適的小RNA分子進行轉染相關功能分析之前,應先確定其實驗需要。例如,siRNA*對一個靶標具有高度特異性,而miRNA具有調節(jié)多個下游靶標的潛力。如今,可以人工合成各種類型的短長度寡核苷酸來模仿小RNA分子,以研究這些小RNA分子的敲入/敲入/敲出效應...
研究人員開發(fā)了靶向超聲微泡在***中的應用,以制造一種可行且直接的載體,用于輸送氣體、藥物和核酸,這些載體與超聲波、光熱、pH和光(刺激觸發(fā))超聲微泡相結合。使用超聲微泡輸送***氣體有兩種方法:擴散(自發(fā)過程)和靜脈注射,靜脈注射通過超聲波破壞氣泡繼續(xù)進行。...
肌內注射脂質體不能引起強烈的毒性反應,這與肺內或靜脈注射途徑的情況不同。幾項體內研究表明,pDNA載體的肺內遞送是促炎th1樣細胞因子的產(chǎn)生和隨后浸潤細胞涌入肺區(qū)域的原因。在任何情況下,陽離子脂質本身不會引起免疫反應,而且這種效果不是由于pDNA制備中存在內*...
**近一項與抗血管生成基因傳遞高度相關的發(fā)現(xiàn)是,陽離子脂質體(CLs)選擇性地靶向**的血管系統(tǒng)。陰離子或電中性脂質體沒有發(fā)現(xiàn)這種作用。Campbell和他的同事[95]發(fā)現(xiàn),與電中性脂質體相比,使用CLs在**血管內皮細胞(VECs)中積累更多,CLs通過添...
RNA和信使RNA與DNA轉染類似,RNA可以通過基于RNA的病毒或非病毒載體導入真核細胞。與涉及DNA的轉染相比,RNA轉染可能產(chǎn)生更高的轉染效率,因為后者不需要穿越核膜。在不需要基因組整合、轉錄和轉錄后處理的情況下,RNA轉染也可能加速所需蛋白質的產(chǎn)生。使...
納米顆粒,由于其在DNA轉運到細胞中的保護能力,在不久的將來可以用作轉基因的非病毒載體。通過將納米粒子與許多不同的配體和化合物連接來修飾納米粒子,有助于改善它們在細胞內的運輸。將納米顆粒靶向到細胞內的特定位置,配子和胚胎,可以通過磁轉染來實現(xiàn)。盡管與市售的用于...
在轉染中,DNA通常通過病毒或非病毒載體(如質粒)轉運到宿主細胞中。質粒的基本結構包括啟動子、復制起點、多個克隆位點、目標基因和選擇標記。質粒復制需要復制的起源,而多個克隆位點包含獨特的內切酶切割位點,用于插入外源基因。適當?shù)恼婧藛幼?如CMV或EF-1a)...
質子泵抑制劑可以通過基于從一個供體蛋白到受體蛋白的能量轉移的物理測量來評估,也可以通過化學測量來評估,在化學測量中,表達的蛋白質與另一種蛋白質之間的相互作用活性可以在刺激時通過適當?shù)膱蟾嫦到y(tǒng)來檢測。后一種基于熒光素酶的方法被稱為生物發(fā)光共振能量轉移(BRET)...