細胞離心下來的離心速率應(yīng)為多少? 細胞傳代或凍存時欲回收細胞,其離心速度一般為800-1000 rpm/min,室溫離心5-8分鐘,轉(zhuǎn)速過高,將造成細胞破裂死亡。 如何用臺盼蘭計數(shù)活細胞? 用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200~2000 ...
如何控制胰酶消化時間? 胰酶消化的程度是細胞培養(yǎng)中的一個關(guān)鍵步驟:消化過度細胞碎片增多,黑渣子增多,細胞會成片脫落,嚴重影響細胞活性,并有部分細胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細胞難于從瓶壁上吹下,反復(fù)吹打同樣也會損傷細胞活性。不同細胞對消化液的...
細胞抱團怎么處理? 一些懸浮細胞抱團生長是正常現(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩...
培養(yǎng)的細胞在一般條件下要求有一定的密度才能生長良好,所以要精細細胞計數(shù),在細胞群體中總有一些因各種原因而死亡的細胞,總細胞中活細胞所占的百分比叫做細胞活力,用臺盼蘭染細胞,死細胞著色,活細胞不著色,從而可以區(qū)分死細胞與活細胞。所以在細胞生物學(xué)研究過程中,細...
實驗中操作和分析軟件的合規(guī)性 合規(guī)性還是針對于質(zhì)控(QC)部門、GMP實驗室和生產(chǎn)車間。因為生產(chǎn)的藥物,各個國家對藥物生產(chǎn)都有嚴格的法規(guī)要求,包括GMP和FDA等,要求所測試的數(shù)據(jù)是可追蹤的,使用儀器的分析軟件有多級用戶權(quán)限管理和審計追蹤、電子簽名功...
黑點已經(jīng)產(chǎn)生了,如何進行處理? 如果判定黑點是污染,請及時將細胞處理后丟棄。其他情況,可參照以下進行:如果是懸浮細胞:收集細胞上清慢速離心(500-600 rpm/min,5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶;如果是貼壁細胞:將細胞用PBS洗2-3遍,洗...
原代細胞培養(yǎng)后細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞使得培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成...
TANK CA008自動細胞計數(shù)儀是臺式的自動化實驗室設(shè)備,軟件采用直觀,友好的界面設(shè)計,無需復(fù)雜的操作培訓(xùn),實驗室人員就能很輕松的享受便捷的細胞計數(shù)分析試驗. 自動化 TANKCA008自動細胞計數(shù)儀是臺式的自動化實驗室設(shè)備,軟件采用直觀,友...
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳 研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)...
細胞活力鑒定——臺盼藍染色法 臺盼藍(Trypan Blue),也稱二胺藍(Diamine Blue)和加拉藍(Niagra Blue),是一種用于選擇性著色死細胞和即將死亡的細胞的重要染料。這種染料不能進入細胞膜完整的細胞,而能在細胞膜受損的死細胞...
TANK-CA0008適用于直徑在5-40μm的細胞或微粒的計數(shù),如絕大部分細胞系、干細胞、原代細胞等。 通過參數(shù)設(shè)置中的圈門選項,可以對細胞的圓度、亮度、直徑進行圈選劃分,從而排除非目標細胞干擾。 算法可有效識別聚團細胞,提高計數(shù)準確度。 ...
實驗中操作和分析軟件的合規(guī)性 合規(guī)性還是針對于質(zhì)控(QC)部門、GMP實驗室和生產(chǎn)車間。因為生產(chǎn)的藥物,各個國家對藥物生產(chǎn)都有嚴格的法規(guī)要求,包括GMP和FDA等,要求所測試的數(shù)據(jù)是可追蹤的,使用儀器的分析軟件有多級用戶權(quán)限管理和審計追蹤、電子簽名功...
懸浮性細胞應(yīng)如何傳代處理? 一般*需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000 rpm/min 室溫離心5 min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8)...
原代培養(yǎng)及其操作步驟 從供體內(nèi)取出組織后,經(jīng)機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群,使之在體外模擬人體生理環(huán)境,在無菌、適當溫度和一定的營養(yǎng)條件下,生存、生長和繁殖。原代培養(yǎng)細胞常有不同的細胞成分,生長緩慢,但是更能說明所來源的組織細胞類型和表達組...
培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點,是污染嗎? 首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁,如果變渾濁,基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁:在顯微鏡下觀察黑點大小和形狀是否規(guī)則,是否運動,是做布朗運動還是呈直線型快速移動。如果黑點大小不規(guī)則,做布朗運動,黑點可能是...
細胞接種密度多少合適? 依照細胞株基本數(shù)據(jù)上的接種密度或稀釋分盤的比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長的一個重要原因。按照我們的經(jīng)驗:一般倍增時間24 h內(nèi)的細胞,傳代比率1:6-1:12為宜,倍增時間24-48 h的細胞,傳代比...
細胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總 一般拿到細胞后,應(yīng)該注意什么? 收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察...
二價離子抑制胰蛋白酶活性嗎? 二價離子的確抑制胰蛋白酶活性。 使用胰蛋白酶加入EDTA是為什么? EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細胞前,用EDTA清洗細胞,以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價離...
全自動細胞計數(shù)和活率分析 我們國家近十幾年在生物制藥行業(yè)的蓬勃發(fā)展,對于以上這種計數(shù)和活率分析方法,已無法滿足生物制藥研發(fā)和生產(chǎn)發(fā)展的需要,因此正在逐漸被自動化細胞計數(shù)和活率分析儀所替代。 自動化細胞計數(shù)和活率分析儀首先解決的是對細胞做死活標記...
原代細胞培養(yǎng)后細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞使得培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成...
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳 研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)...
細胞培養(yǎng)實驗室之凈化工作臺 凈化工作臺:操作簡單,安裝方便,占用空間小且凈化效果很好。一般細菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺主要有兩種:a)側(cè)流式或稱垂直式b)外流式或稱水平層流式。 凈化工作臺工作原理(大致相同)——通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾,由...
單細胞測序?qū)嶒灥牡谝徊绞菃渭毎麘乙旱闹苽?,而懸液制備中細胞計?shù)的準確性直接影響單細胞測序的數(shù)據(jù)質(zhì)量,但是關(guān)于細胞計數(shù)您真的了解嗎? 目前細胞計數(shù)主要使用臺盼藍染色法和雙熒光AO/PI染色法。 1)臺盼藍染色原理:臺盼藍不能透過活細胞正常完整的...
臺盼藍染液是細胞活性染料,常用于檢測細胞膜的完整性。細胞損傷或死亡時,臺盼藍可穿透變性的細胞膜,與解體的DNA結(jié)合,使其著色。而活細胞能阻止染料進入細胞內(nèi)。故可以檢測細胞是否存活。 臺盼藍染色法的原理正常的活細胞,胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠排斥臺盼藍,使之不...
細胞培養(yǎng)實驗室之無菌操作區(qū) 無菌操作室:無菌操作區(qū)只限于細胞培養(yǎng)及其他無菌操作的區(qū)域,比較好能與外界隔離,不能穿行或受其他干擾。理想的無菌操作室應(yīng)劃為三部分: a)更衣室—供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。 b)緩沖間—位于更衣間與操作間...
貼壁細胞傳代如何使用胰酶? 一般使用trypsin-EDTA濃度為0.25% trypsin-0.53 mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02 mM EDTA.2Na。消化液濃度過高時,易造成培養(yǎng)基中細胞碎片增多,黑渣子增多,常規(guī)...
實驗中操作和分析軟件的合規(guī)性 合規(guī)性還是針對于質(zhì)控(QC)部門、GMP實驗室和生產(chǎn)車間。因為生產(chǎn)的藥物,各個國家對藥物生產(chǎn)都有嚴格的法規(guī)要求,包括GMP和FDA等,要求所測試的數(shù)據(jù)是可追蹤的,使用儀器的分析軟件有多級用戶權(quán)限管理和審計追蹤、電子簽名功...
細胞計數(shù)有多重要?這個答案想必不用回答,大家都心里有數(shù)。畢竟我們都曾經(jīng)歷過,花了一整天的時間制備細胞、染色、分選,進行一個精密計劃的實驗,結(jié)果卻因為發(fā)現(xiàn)細胞量卻不夠而被迫結(jié)束。如今圈子里常用的細胞計數(shù)方法是顯微鏡+血球計數(shù)板,然而隔壁實驗室的小明都在用自動的細...
單細胞測序?qū)嶒灥牡谝徊绞菃渭毎麘乙旱闹苽?,而懸液制備中細胞計?shù)的準確性直接影響單細胞測序的數(shù)據(jù)質(zhì)量,但是關(guān)于細胞計數(shù)您真的了解嗎? 目前細胞計數(shù)主要使用臺盼藍染色法和雙熒光AO/PI染色法。 1)臺盼藍染色原理:臺盼藍不能透過活細胞正常完整的...
自動化細胞計數(shù)和活率分析儀就可以替代傳統(tǒng)的手動計數(shù)法,滿足藥物研發(fā)和生產(chǎn)質(zhì)控的需求。但對于這些自動化的細胞計數(shù)和活率分析儀,目前門類也很繁多,如何從中找到適合自己所需的那款呢, 準確性無疑是重要的,我們購買的任何分析儀器,如果不能保證準確性,那就無法...