細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室之凈化工作臺(tái) 凈化工作臺(tái)：操作簡(jiǎn)單，安裝方便，占用空間小且凈化效果很好。一般細(xì)菌培養(yǎng)室使用的凈化工作臺(tái)主要有兩種：a)側(cè)流式或稱垂直式b)外流式或稱水平層流式。 凈化工作臺(tái)工作原理（大致相同）——通常是將室內(nèi)空氣經(jīng)粗過濾器初濾，由...

活死細(xì)胞的鑒別方法 活細(xì)胞的鑒定在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)上具有很重要的意義。細(xì)胞培養(yǎng)過程中要隨時(shí)記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，需要經(jīng)常測(cè)定細(xì)胞的存活率；在zhong瘤細(xì)胞的研究中，為了檢驗(yàn)各種藥物對(duì)zhong瘤細(xì)胞的殺傷力，也需要測(cè)定zhong瘤細(xì)胞的存活率。在臨床醫(yī)學(xué)...

細(xì)胞計(jì)數(shù)有多重要？這個(gè)答案想必不用回答，大家都心里有數(shù)。畢竟我們都曾經(jīng)歷過，花了一整天的時(shí)間制備細(xì)胞、染色、分選，進(jìn)行一個(gè)精密計(jì)劃的實(shí)驗(yàn)，結(jié)果卻因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)細(xì)胞量卻不夠而被迫結(jié)束。如今圈子里常用的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法是顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板，然而隔壁實(shí)驗(yàn)室的小明都在用自動(dòng)的細(xì)...

給大家分享一下細(xì)胞手工計(jì)數(shù)的基本原理和需要注意的幾點(diǎn)操作細(xì)節(jié)。 血球計(jì)數(shù)板結(jié)構(gòu)細(xì)胞手工計(jì)數(shù)板主要是血球計(jì)數(shù)板，市面上賣的一般都是有醫(yī)療器械號(hào)（國(guó)產(chǎn)進(jìn)口均可用，不用挑哈）。血球計(jì)數(shù)板是一塊比普通載玻片厚的長(zhǎng)方形玻片，在中部1/3面積區(qū)域有4條凹槽，將中...

染色法鑒定機(jī)理 染色法分化學(xué)染色法和熒光染色法，根據(jù)染色機(jī)理的不同，染料或使死細(xì)胞著色，或使活細(xì)胞著色。死活細(xì)胞在生理機(jī)能和性質(zhì)上的差異主要包括： 死活細(xì)胞細(xì)胞膜通透性的差異： 活細(xì)胞的細(xì)胞膜是一種選擇性膜，對(duì)細(xì)胞起保護(hù)和屏障作用，只允許...

原代培養(yǎng)及其操作步驟 從供體內(nèi)取出組織后，經(jīng)機(jī)械以及消化分離成單個(gè)細(xì)胞或單一型細(xì)胞群，使之在體外模擬人體生理環(huán)境，在無(wú)菌、適當(dāng)溫度和一定的營(yíng)養(yǎng)條件下，生存、生長(zhǎng)和繁殖。原代培養(yǎng)細(xì)胞常有不同的細(xì)胞成分，生長(zhǎng)緩慢，但是更能說(shuō)明所來(lái)源的組織細(xì)胞類型和表達(dá)組...

經(jīng)典的細(xì)胞計(jì)數(shù)原理：臺(tái)盼藍(lán) 臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。正常的活細(xì)胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺(tái)盼藍(lán)，細(xì)胞不被染色；而死細(xì)胞的胞膜不完整，通透性增加，可使臺(tái)盼藍(lán)滲入將細(xì)胞染成藍(lán)色。因此，借助臺(tái)盼藍(lán)染色...

傳統(tǒng)手動(dòng)計(jì)數(shù)法 回答這個(gè)問題前，我們拿一個(gè)可以比較的對(duì)象，即原始的細(xì)胞計(jì)數(shù)及活率分析方法——1臺(tái)光學(xué)顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板，待測(cè)的細(xì)胞懸液樣品被滴加在血球計(jì)數(shù)板上，通過肉眼人工計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)細(xì)胞數(shù)量和計(jì)算細(xì)胞活率。 顯微鏡下我們可以看到血球計(jì)數(shù)板上4個(gè)區(qū)...

培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點(diǎn)，是污染嗎? 首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁，如果變渾濁，基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁：在顯微鏡下觀察黑點(diǎn)大小和形狀是否規(guī)則，是否運(yùn)動(dòng)，是做布朗運(yùn)動(dòng)還是呈直線型快速移動(dòng)。如果黑點(diǎn)大小不規(guī)則，做布朗運(yùn)動(dòng)，黑點(diǎn)可能是...

細(xì)胞傳代培養(yǎng)常見問題匯總 貼壁細(xì)胞如何進(jìn)行傳代? 去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4mlPBS洗1-2次;棄PBS，再加1.5ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛...

如何獲取高質(zhì)量的細(xì)胞懸液，下面就帶您一步步***從組織到細(xì)胞懸液的旅程，讓細(xì)胞懸液制備不再成為困擾您的難題。 樣本準(zhǔn)備 新鮮組織樣本是制備細(xì)胞懸液的首要條件，新鮮組織從***取下后，去除周圍的脂肪、結(jié)締組織或者壞死組織，用預(yù)冷的PBS或者生理鹽...

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室之無(wú)菌操作區(qū) 無(wú)菌操作室：無(wú)菌操作區(qū)只限于細(xì)胞培養(yǎng)及其他無(wú)菌操作的區(qū)域，比較好能與外界隔離，不能穿行或受其他干擾。理想的無(wú)菌操作室應(yīng)劃為三部分： a)更衣室—供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。 b)緩沖間—位于更衣間與操作間...

單細(xì)胞測(cè)序?qū)嶒?yàn)的第一步是單細(xì)胞懸液的制備，而懸液制備中細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性直接影響單細(xì)胞測(cè)序的數(shù)據(jù)質(zhì)量，但是關(guān)于細(xì)胞計(jì)數(shù)您真的了解嗎？ 目前細(xì)胞計(jì)數(shù)主要使用臺(tái)盼藍(lán)染色法和雙熒光AO/PI染色法。 1）臺(tái)盼藍(lán)染色原理：臺(tái)盼藍(lán)不能透過活細(xì)胞正常完整的...

對(duì)比細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和血球計(jì)數(shù)板。 對(duì)比1:準(zhǔn)確度主觀差異性不論采用哪種細(xì)胞計(jì)數(shù)方法，依靠操作人員的判斷都會(huì)導(dǎo)致結(jié)果出錯(cuò)。TANK-CA0008全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器采用了先進(jìn)的算法來(lái)確定比較好焦距和光強(qiáng)度；可去除諸多主觀變量，同時(shí)還可節(jié)省時(shí)間。利用定量方法，...

在各種細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析方法中，臺(tái)盼藍(lán)染色細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)疑是細(xì)胞活率分析的金標(biāo)準(zhǔn)。目前，通過臺(tái)盼藍(lán)染色分析細(xì)胞活率的方法包括：傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡+血球計(jì)數(shù)板法，也有市場(chǎng)上很普遍的插片式半自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，以及無(wú)需手動(dòng)混勻和染色的全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀。 ...

眾所周知，活細(xì)胞密度(VCD)和活率(viability)是評(píng)估哺乳動(dòng)物細(xì)胞系生長(zhǎng)狀態(tài)的重要指標(biāo)。生物制藥研發(fā)人員進(jìn)行懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，每天所不能避免的工作，就是取樣計(jì)數(shù)。使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行人工計(jì)數(shù)無(wú)疑是金標(biāo)準(zhǔn)方法。 但這個(gè)傳統(tǒng)方法其勞動(dòng)強(qiáng)度十分驚人，樣...

如何獲取高質(zhì)量的細(xì)胞懸液，下面就帶您一步步***從組織到細(xì)胞懸液的旅程，讓細(xì)胞懸液制備不再成為困擾您的難題。 樣本準(zhǔn)備 新鮮組織樣本是制備細(xì)胞懸液的首要條件，新鮮組織從***取下后，去除周圍的脂肪、結(jié)締組織或者壞死組織，用預(yù)冷的PBS或者生理鹽...

全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析 我們國(guó)家近十幾年在生物制藥行業(yè)的蓬勃發(fā)展，對(duì)于以上這種計(jì)數(shù)和活率分析方法，已無(wú)法滿足生物制藥研發(fā)和生產(chǎn)發(fā)展的需要，因此正在逐漸被自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀所替代。 自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀首先解決的是對(duì)細(xì)胞做死活標(biāo)記...

對(duì)比細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和血球計(jì)數(shù)板。 對(duì)比1:準(zhǔn)確度主觀差異性不論采用哪種細(xì)胞計(jì)數(shù)方法，依靠操作人員的判斷都會(huì)導(dǎo)致結(jié)果出錯(cuò)。TANK-CA0008全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器采用了先進(jìn)的算法來(lái)確定比較好焦距和光強(qiáng)度；可去除諸多主觀變量，同時(shí)還可節(jié)省時(shí)間。利用定量方法，...

培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點(diǎn)，是污染嗎? 首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁，如果變渾濁，基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁：在顯微鏡下觀察黑點(diǎn)大小和形狀是否規(guī)則，是否運(yùn)動(dòng)，是做布朗運(yùn)動(dòng)還是呈直線型快速移動(dòng)。如果黑點(diǎn)大小不規(guī)則，做布朗運(yùn)動(dòng)，黑點(diǎn)可能是...

全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析 我們國(guó)家近十幾年在生物制藥行業(yè)的蓬勃發(fā)展，對(duì)于以上這種計(jì)數(shù)和活率分析方法，已無(wú)法滿足生物制藥研發(fā)和生產(chǎn)發(fā)展的需要，因此正在逐漸被自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀所替代。 自動(dòng)化細(xì)胞計(jì)數(shù)和活率分析儀首先解決的是對(duì)細(xì)胞做死活標(biāo)記...

黑點(diǎn)已經(jīng)產(chǎn)生了，如何進(jìn)行處理? 如果判定黑點(diǎn)是污染，請(qǐng)及時(shí)將細(xì)胞處理后丟棄。其他情況，可參照以下進(jìn)行：如果是懸浮細(xì)胞：收集細(xì)胞上清慢速離心(500-600 rpm/min，5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶;如果是貼壁細(xì)胞：將細(xì)胞用PBS洗2-3遍，洗...