工藝特異型宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測高風險蛋白

宿主細胞蛋白（HCP）作為生物制品中來源于細胞基質(zhì)的殘留雜質(zhì)，具有明顯的異質(zhì)性特征。其復雜性體現(xiàn)在三個方面：①理化特性差異：HCP涵蓋胞內(nèi)及分泌蛋白，涉及關鍵生理功能，具有涵蓋區(qū)間大的等電點（pI 3-11）、分子量范圍（5-250kDa）及疏水性；②上游工藝影響：不同發(fā)酵工藝（如細胞株、培養(yǎng)條件）誘導獨特的翻譯后修飾（PTM），導致HCP總量與生化復雜性增加；③下游工藝與產(chǎn)物特性干擾：抗體、細胞因子等重組蛋白或病毒類藥物的純化工藝會選擇性殘留特定HCP，且產(chǎn)物形式（如大腸桿菌的包涵體/可溶性表達）直接影響HCP殘留譜。針對特定生產(chǎn)工藝開發(fā)定制化檢測方案是準確監(jiān)控宿主細胞蛋白殘留的關鍵。

磷脂酶B樣蛋白2（Phospholipase B-Like 2，PLBL2/PLBD2），因其強共純化能力、強免疫原性和潛在的酶活性，被認為是CHO HCP的關鍵高風險因子之一。目前行業(yè)建議，需要開發(fā)特定的檢測方法對這些已知蛋白或特定蛋白進行監(jiān)控以更好地把控其潛在風險。SHENTEK^® CHO PLBL-2殘留檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附法）是湖州申科生物自主研發(fā)的、具有完全自主知識產(chǎn)權(quán)的CHO PLBL-2蛋白通用檢測試劑盒。本試劑盒適用于基于CHO表達系統(tǒng)的生物制品中CHO HCP高風險蛋白PLBL-2的定量檢測。本試劑盒操作步驟少，快速，檢測專一性強，性能穩(wěn)定可靠。

各國法規(guī)要求必須對生物藥品進行分析和純化，以將宿主細胞蛋白HCP降低到可接受的水平；即使終產(chǎn)品中痕量的宿主細胞蛋白HCP到達患者體內(nèi)，尚不清楚特定的殘留蛋白質(zhì)雜質(zhì)是否會影響藥物的穩(wěn)定性或免疫原性。關于HCP的限量標準，美國藥典推薦值為終產(chǎn)品的HCP水平1-100 ng/mg；中國藥典各論中E.coli菌體HCP應不高于蛋白質(zhì)總量的0.10% (1000 ng/mg)，CHO細胞HCP應不高于蛋白質(zhì)總量的0.05% (500 ng/mg)，假單胞菌HCP應不高于蛋白質(zhì)總量的0.02% (200 ng/mg)。

湖州申科生物依托高分辨質(zhì)譜技術(shù)推出宿主細胞蛋白定制化檢測服務組合，覆蓋生物制品殘留蛋白分析需求。該平臺提供四類服務：HCP蛋白檢測定制化服務；通過ELISA、雙向電泳（2D）及LC-MS/MS技術(shù)，支持常規(guī)生物制品檢測、高危及工藝相關蛋白數(shù)據(jù)庫構(gòu)建以及特殊生物制品分析；抗體覆蓋率服務采用自主研發(fā)的IMBS技術(shù)結(jié)合質(zhì)譜，準確評估ELISA試劑盒對工程細胞HCP的捕獲能力，并完成校準品表征；靶向HCP檢測專注于高風險殘留蛋白的方法開發(fā)；同時提供蛋白種屬鑒定服務，利用LC-MS技術(shù)溯源樣品中的物種特異性肽段。該服務體系通過多技術(shù)聯(lián)用與深度定制化策略，滿足從基礎篩查到工藝關鍵雜質(zhì)監(jiān)控的全維度需求。

為什么定制化試劑盒是宿主細胞蛋白殘留檢測的優(yōu)先選擇？原因之一是建立定制化檢測體系，更滿足商業(yè)化生產(chǎn)HCP工藝雜質(zhì)控制要求。在HCP校準品和HCP抗體兩大關鍵試劑組分滿足要求的前提下，定制化方法的建立和優(yōu)化是基于真實純化中間品和原液樣品進行，通過優(yōu)化檢測條件，提高對低濃度HCPs的檢測靈敏度，滿足工藝驗證和過程控制要求。在臨床三期，生產(chǎn)工藝需要進行系統(tǒng)驗證，以確保其穩(wěn)定性和可重復性。定制化HCP ELISA檢測方法能夠更準確地監(jiān)測生產(chǎn)工藝中HCP的去除效果，為工藝驗證提供有力支持。在過程控制中，通過工藝特異型的HCP ELISA檢測方法，可以實時監(jiān)測生產(chǎn)過程中的HCP水平，具備更強的生產(chǎn)異常預警能力，及時發(fā)現(xiàn)生產(chǎn)風險，確保產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。

湖州申科生物致力于提供符合嚴格法規(guī)要求的宿主細胞蛋白（HCP）ELISA檢測試劑盒。為確保產(chǎn)品滿足生物制品（如抗體藥、疫苗）申報（如IND/BLA）的監(jiān)管標準，申科構(gòu)建了全流程依規(guī)開發(fā)的質(zhì)量體系：整個開發(fā)過程嚴格遵循ISO 13485質(zhì)量標準，并滿足用戶審計要求。其開發(fā)流程明確包含三個關鍵階段：①HCP殘留定量檢測參考品開發(fā)：關鍵在于建立可靠的HCP抗原參考品，涵蓋抗原的表征、量值溯源與賦值、均一性和穩(wěn)定性考察等，確保檢測的準確性與代表性。②高質(zhì)量大批量抗體制備：通過優(yōu)化的HCP抗原動物免疫策略，結(jié)合嚴謹?shù)目贵w質(zhì)量標準（如建立標準、覆蓋率驗證）和穩(wěn)定的制備工藝，生產(chǎn)具有高特異性和廣覆蓋度的檢測抗體，保證檢測的特異性和靈敏度。③檢測體系開發(fā)及驗證：進行嚴謹?shù)臋z測體系開發(fā)與驗證工作，其驗證方案符合ICH指導原則及藥典關于分析方法驗證的標準要求。同時，嚴格執(zhí)行物料質(zhì)控，并在潔凈車間環(huán)境中進行生產(chǎn)，確保試劑盒方法的穩(wěn)健性、重現(xiàn)性與法規(guī)符合性。這一從抗原源頭到成品體系的標準化、合規(guī)化開發(fā)流程，是湖州申科HCP檢測產(chǎn)品品質(zhì)與可靠性的根本保障。