CCK法的操作步驟(更多內(nèi)容請(qǐng)見說明書):實(shí)驗(yàn)一:細(xì)胞活性檢測(cè)1、在96孔板中接種細(xì)胞懸液(100μL/孔)。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)(37℃,5%CO2)。2、向每孔加入10μLCCK溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會(huì)影響OD值的讀數(shù))。3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)。4、用酶標(biāo)儀測(cè)定在450nm處的吸光度。5、若暫時(shí)不測(cè)定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時(shí)內(nèi)測(cè)定,吸光度不會(huì)發(fā)生變化。cck8結(jié)果處理**終結(jié)果.上海mts cck8
CCK-8(CellCountingKit-8)細(xì)胞活性和增殖檢測(cè)是醫(yī)學(xué)研究中常用的實(shí)驗(yàn)技術(shù),其原理是該試劑中含有WST-8,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物(Formazandye)。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。以下是CCK-8檢測(cè)的具體步驟:細(xì)胞活性檢測(cè)1.在96孔板中接種細(xì)胞懸液(100ml/孔)。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)(在37℃,5%CO2的條件下)。天津celltiter glo 與cck8加入CCK8那會(huì)空白對(duì)照組的細(xì)胞剛好長(zhǎng)滿嗎?
二、優(yōu)點(diǎn):·使用方便,省去了洗滌細(xì)胞,不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑;·CCK-8法能快速檢測(cè);·CCK-8法的檢測(cè)靈敏度很高,甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度;·CCK-8法的重復(fù)性優(yōu)于MTT法,MTT實(shí)驗(yàn)生成的formazan不是水溶性的,需要使用DMSO等有機(jī)溶劑溶解;而本方法產(chǎn)生的formazan是水溶性的,不但省去了溶解步驟,更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差;·CCK-8法對(duì)細(xì)胞毒性小,可以多次測(cè)定選取比較好測(cè)定時(shí)間,與MTT方法相比線性范圍更寬,靈敏度更高;·CCK-8細(xì)胞活性檢測(cè)試劑中為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用。
CCK-8的用途1.細(xì)胞增殖測(cè)定:細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)在很多領(lǐng)域都會(huì)用到,比如**相關(guān)、損傷后修復(fù)等。
2.***篩選:在測(cè)定一個(gè)***的毒性和安全有效濃度時(shí),經(jīng)常會(huì)用到CCK-8。
3.細(xì)胞毒性測(cè)定:這個(gè)可以和各個(gè)處理因素對(duì)細(xì)胞活性和增殖的影響,比如在UV、低氧或者什么化學(xué)物品對(duì)細(xì)胞的影響上。
4.**藥敏試驗(yàn):這個(gè)是用的比較廣的,我見過做**的團(tuán)隊(duì),買CCK-8都是一整箱,一整箱的買,比如果子老師所在的團(tuán)隊(duì),哈哈哈。
5.微生物對(duì)細(xì)胞的毒性或增殖的實(shí)驗(yàn)。 與MTT相比,CCK-8和XTT的價(jià)格比較貴。
在做一些***毒性試驗(yàn)時(shí),比如做鐵死亡途徑時(shí),我們加入一個(gè)***叫C1,這個(gè)時(shí)候就需要提前換液,其實(shí)我們?cè)囘^,還是會(huì)有一些影響。所以這時(shí)我們用中性紅檢測(cè)。我們實(shí)驗(yàn)室,通常會(huì)用20%的硫酸銅溶液放到細(xì)胞孵箱下層,預(yù)防******。理應(yīng)說,硫酸銅分子在水溶液中是硫酸根離子和銅離子,是不會(huì)揮發(fā)的。但是每次只要是新?lián)Q的硫酸銅溶液再做CCK-8,結(jié)果總是不好,我也不知道是什么原因。之前在我們實(shí)驗(yàn)室有發(fā)生過這樣的事情,這種有深有淺的才是該有的結(jié)果。我想說的是在有能力選擇范圍內(nèi),盡量選擇好一點(diǎn)的試劑,免得浪費(fèi)時(shí)間。**藥敏試驗(yàn):這個(gè)是用的比較廣的,我見過做**的團(tuán)隊(duì),買CCK-8都是一整箱,一整箱的買。上海cck8的價(jià)格
在CCK-8試劑盒中,**主要的化學(xué)藥品是WST-8.上海mts cck8
CellCountingKit-8(簡(jiǎn)稱CCK-8)試劑可用于簡(jiǎn)便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】。它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物(Formazandye)。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。上海mts cck8
上海儒安生物科技有限公司一直專注于從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),軟件開發(fā),電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),化工產(chǎn)品及原料(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、民用物品、易制毒化學(xué)品)、實(shí)驗(yàn)窒設(shè)備的銷售。,是一家醫(yī)藥健康的企業(yè),擁有自己**的技術(shù)體系。公司目前擁有較多的高技術(shù)人才,以不斷增強(qiáng)企業(yè)重點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)力,加快企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新,實(shí)現(xiàn)穩(wěn)健生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)。公司以誠(chéng)信為本,業(yè)務(wù)領(lǐng)域涵蓋細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體,我們本著對(duì)客戶負(fù)責(zé),對(duì)員工負(fù)責(zé),更是對(duì)公司發(fā)展負(fù)責(zé)的態(tài)度,爭(zhēng)取做到讓每位客戶滿意。公司深耕細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體,正積蓄著更大的能量,向更廣闊的空間、更寬泛的領(lǐng)域拓展。