確定希望輸送的運(yùn)載物（如DNA、RNA或蛋白質(zhì)）根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)類型，我們可能需要將不同的運(yùn)載物輸送到細(xì)胞內(nèi)部，包括**常見的DNA，用于基因編輯的siRNA，能夠更快表達(dá)蛋白的mRNA，CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。正確的了解您希望輸送的運(yùn)載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。2希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型可簡單分為兩大類，連續(xù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞。連續(xù)細(xì)胞系具有無限增殖的潛能，通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類細(xì)胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力，它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。采用siRNA轉(zhuǎn)染試劑可以將siRNA輕松導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。上海常用轉(zhuǎn)染試劑配方在選擇轉(zhuǎn)染...

ZetaLife轉(zhuǎn)染試劑成功轉(zhuǎn)染THP-1(人單核白血病細(xì)胞)懸浮細(xì)胞ZETALIFEZETALIFE微信號gh_97714b427409功能介紹美國ZetaLife公司是國際無血清細(xì)胞培養(yǎng)基DMEM/F12主要完成人，有三十多年的胎牛血清、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)；ZetaLife與美國加利福尼亞大學(xué)聯(lián)合開發(fā)全球細(xì)胞體內(nèi)可代謝轉(zhuǎn)染試劑，此技術(shù)成為全球細(xì)胞轉(zhuǎn)染優(yōu)先技術(shù)之一。7月17日收錄于話題ZetaLifeAdvancedDNARNA，AD600150轉(zhuǎn)染試劑；成功轉(zhuǎn)染THP-1(人單核白血病細(xì)胞)懸浮細(xì)胞；來自廣州中山大學(xué)附屬**醫(yī)院客戶的喜訊;出色的細(xì)胞轉(zhuǎn)染結(jié)果與您分享;24小時(shí)熒光圖片...

圖7.對注射了Invivofectamine3.0試劑的小鼠樣品進(jìn)行血液化學(xué)分析。將Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的復(fù)合物分別以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未處理[U]的劑量注射入小鼠體內(nèi)。在注射后2、24及48小時(shí)收集血液樣品，并通過臨床化學(xué)檢測方法對數(shù)個(gè)生物標(biāo)志物(Antech)進(jìn)行評估。結(jié)果表明在使用Invivofectamine3.0試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染的每個(gè)個(gè)體間所檢測的生物標(biāo)志物的水平與未注射該試劑的個(gè)體相比并沒有***差異。除了以上兩種于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑，還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?2000，...

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細(xì)胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系），且隨著傳代的進(jìn)行，具有比較高的生長能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說，這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型可簡單分為兩大類，連續(xù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞。腺病毒轉(zhuǎn)染試劑原理轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少：轉(zhuǎn)染試劑選擇工具收錄于話題轉(zhuǎn)染是將核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程，是細(xì)胞生物學(xué)、...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢：1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時(shí)間，只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作.臨床級******毒載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑..動物轉(zhuǎn)染試劑推薦LNCap細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代嚴(yán)格由ATCC建議...

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細(xì)胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系），且隨著傳代的進(jìn)行，具有比較高的生長能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說，這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。臨床級******毒載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑..國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑供應(yīng)商用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞，左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA，右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP...

將膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（3105）接種至6孔板中，然后使用riboFECTCP轉(zhuǎn)染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（DP3321、DP7857）中，48h后，qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為46.32％、49.71％和43.64％，DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為53.21％、47.46％和46.31％。將1.25μlTREM-1siRNA（20μm）和3μlriboFECTTMCP...

簡介：X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。優(yōu)勢：1.簡單易用的多組分混合試劑，無動物源性成分，室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率，對于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑，結(jié)果相關(guān)性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染如果以上都沒有問題，那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞了，轉(zhuǎn)染效果直接影響著出毒效率，那么一款好的轉(zhuǎn)染試劑在此時(shí)就是至關(guān)重要了！在這里給大家推薦一款性價(jià)比超高的轉(zhuǎn)染試劑，美國Polysciences家的PEIMAX40K！PEIMAX40K（也稱為游離堿PEI22K）是一種功能強(qiáng)大，值得信賴且經(jīng)濟(jì)高效的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中，能在96孔板至100L生物反應(yīng)器范圍內(nèi)提供始終如一高效的基因表達(dá)。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉(zhuǎn)染試劑，以獲得他們所需要的優(yōu)勢。相較于其他類型轉(zhuǎn)染試劑，使用自行制備的PEI轉(zhuǎn)染試劑可以使總轉(zhuǎn)染成本...

圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應(yīng)的敲低現(xiàn)象。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進(jìn)行注射。隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平（Biophen顯色檢測）。持續(xù)敲低能力在單次注射后可觀察到更長的敲低時(shí)間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應(yīng)。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復(fù)合物后分別以1、0.5、及0.25mg/kg的劑量進(jìn)行注射。在第2、5、9、16、23及30...

簡介：X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。優(yōu)勢：1.簡單易用的多組分混合試劑，無動物源性成分，室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率，對于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑，結(jié)果相關(guān)性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高...

基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑，帶正電的聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用，并通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類，前者細(xì)胞毒性相對較大，后者細(xì)胞毒性較小，但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細(xì)胞毒性，可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑，不局限于單一成分，混合了不同配方的脂類（非脂質(zhì)體）、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的成分，兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細(xì)胞毒性小的優(yōu)勢，且操作更加簡單，易于高通量。一般會同時(shí)設(shè)置對照，對RNAi結(jié)果進(jìn)行比較。RNAi的成功取決于正確導(dǎo)入...

.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。高靈活應(yīng)用，同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過LightCycler?h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢：1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時(shí)間，只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率，超過其他RNAi試劑。蛋白轉(zhuǎn)染試劑配方LNCap細(xì)胞的培...

基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑，帶正電的聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用，并通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類，前者細(xì)胞毒性相對較大，后者細(xì)胞毒性較小，但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細(xì)胞毒性，可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑，不局限于單一成分，混合了不同配方的脂類（非脂質(zhì)體）、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的成分，兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細(xì)胞毒性小的優(yōu)勢，且操作更加簡單，易于高通量。國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑制作原理是什么?上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑哪種好確定希望輸送的...

.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。高靈活應(yīng)用，同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過LightCycler?h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這...

.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。2.高靈活應(yīng)用，同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。3.細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞。通過LightCycler?h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率...

.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。高靈活應(yīng)用，同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過LightCycler?h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這...

基于脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面，經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞。此方法操作簡單，重復(fù)性好，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率，但具有一定的細(xì)胞毒性，可能會干擾細(xì)胞的代謝。且活性受血清影響，需要去除血清。誰來拯救我的細(xì)胞之QIAGEN轉(zhuǎn)染試劑.Opti-MEM轉(zhuǎn)染試劑購買用LipoD293?體外DNA轉(zhuǎn)染試劑（Ver.II）（上圖）和受歡迎的...

將膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（3105）接種至6孔板中，然后使用riboFECTCP轉(zhuǎn)染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)膠質(zhì)瘤干細(xì)胞（DP3321、DP7857）中，48h后，qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為46.32％、49.71％和43.64％，DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達(dá)水平分別為53.21％、47.46％和46.31％。將1.25μlTREM-1siRNA（20μm）和3μlriboFECTTMCP...

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細(xì)胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系），且隨著傳代的進(jìn)行，具有比較高的生長能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說，這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。轉(zhuǎn)染試劑--總有一款你想要的.昆蟲細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑對照原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細(xì)胞系，它...

轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少：轉(zhuǎn)染試劑選擇工具收錄于話題轉(zhuǎn)染是將核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過程，是細(xì)胞生物學(xué)、基因表達(dá)和基因***實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵步驟。不同的實(shí)驗(yàn)方案和技術(shù)差別巨大，我們可以利用化學(xué)方法或脂質(zhì)體將核酸(DNA或RNA)高效輸送到細(xì)胞內(nèi)，也可以使用電穿孔方法利用電流在細(xì)胞膜上開孔，使核酸進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品，適用于各種細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)染。如何選擇**受信賴的可用于轉(zhuǎn)染的系統(tǒng)，是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要影響因素。轉(zhuǎn)染后6h觀察細(xì)胞狀態(tài)，并更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細(xì)胞，用PBS洗滌3次以上，以備RNA抽提。上海體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑選購LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn)、高效的...

基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑，帶正電的聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用，并通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類，前者細(xì)胞毒性相對較大，后者細(xì)胞毒性較小，但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細(xì)胞毒性，可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑，不局限于單一成分，混合了不同配方的脂類（非脂質(zhì)體）、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的成分，兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細(xì)胞毒性小的優(yōu)勢，且操作更加簡單，易于高通量。并更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細(xì)胞，用PBS洗滌3次以上，以備RN...

基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑，其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物，粘附到細(xì)胞膜表面，借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。pH值，鈣離子濃度，DNA濃度，沉淀時(shí)間，細(xì)胞孵育時(shí)間乃至各組分加入順序都可能對結(jié)果產(chǎn)生影響，因此實(shí)驗(yàn)條件摸索和優(yōu)化時(shí)間較長，且重復(fù)性不佳?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面，經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞...

轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進(jìn)行成像（左側(cè)四幅圖），A：LipoD293；B：293fectin；C：Xfect和D：Fugene6.帶有6xHis標(biāo)記的GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術(shù)實(shí)現(xiàn)分離。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進(jìn)行Coomassie亮藍(lán)染色（右上圖E），道1為LipoD293293、道2為標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進(jìn)一步定量（見右下圖F）。產(chǎn)生慢***的比較通過LipoD293?試劑（升級版）和LipofectamineLTX（LTX）試劑將三個(gè)cDNA...

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞，左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA，右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine?2000分別對小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白（GFP），轉(zhuǎn)染24小時(shí)后觀察轉(zhuǎn)染效果，LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率（左圖）比LipoFectamine?2000（右圖）高5倍。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?，LipoFectamine?2000及LipoFectamine?3000分別對A...

.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。高靈活應(yīng)用，同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過LightCycler?h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這...

胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要??！當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好，沒有細(xì)微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng)，當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時(shí)導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個(gè)部件缺失，或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時(shí)做陰性對照的習(xí)慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好，質(zhì)粒間比例得當(dāng)，并且對質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證。將EntransterTM-R40...

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細(xì)胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系），且隨著傳代的進(jìn)行，具有比較高的生長能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說，這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代...質(zhì)粒細(xì)胞轉(zhuǎn)染步驟是什么?體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑原理轉(zhuǎn)染是將外源核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程，是細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的重要工具，也是大部分的生物和分子生物領(lǐng)域的科研黨們繞不開的...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染如果以上都沒有問題，那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞了，轉(zhuǎn)染效果直接影響著出毒效率，那么一款好的轉(zhuǎn)染試劑在此時(shí)就是至關(guān)重要了！在這里給大家推薦一款性價(jià)比超高的轉(zhuǎn)染試劑，美國Polysciences家的PEIMAX40K！PEIMAX40K（也稱為游離堿PEI22K）是一種功能強(qiáng)大，值得信賴且經(jīng)濟(jì)高效的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中，能在96孔板至100L生物反應(yīng)器范圍內(nèi)提供始終如一高效的基因表達(dá)。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉(zhuǎn)染試劑，以獲得他們所需要的優(yōu)勢。相較于其他類型轉(zhuǎn)染試劑，使用自行制備的PEI轉(zhuǎn)染試劑可以使總轉(zhuǎn)染成本...