上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑配制

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-03-07

Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn)、高效的siRNA輸送解決方案。目前尚無其他siRNA轉(zhuǎn)染試劑能夠在***的細(xì)胞系中(包括常見細(xì)胞類型、干細(xì)胞、原代細(xì)胞以及歷來難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型)提供如此簡便、高效的siRNA輸送效果。

高效

可在低siRNA濃度下獲得優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效果

相對(duì)于其他的siRNA轉(zhuǎn)染試劑,Lipofectamine RNAiMAX 轉(zhuǎn)染試劑可以獲得更佳的基因***效果。同在10 nM和1 nM p53 siRNA下,Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率,超過其他RNAi試劑。 世界上低價(jià)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑PEI,這里有**詳細(xì)的操作步驟!上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑配制

圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí),實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。試驗(yàn)采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間,在維持優(yōu)良的細(xì)胞活力的同時(shí),實(shí)現(xiàn)了p53基因表達(dá)水平的有效敲低.功能多樣簡便的實(shí)驗(yàn)方案,易于針對(duì)***的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑,可大幅改善實(shí)驗(yàn)性能,使用微克級(jí)的siRNA即可達(dá)到高達(dá)85%的敲低效果。上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑配制細(xì)胞培養(yǎng)系列 | 專為 293T 優(yōu)化的轉(zhuǎn)染試劑 Nano293T.

在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較

圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供

制備大鼠的動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光,以此來評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。

對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞 LNCap 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較

圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institute)的 Lyn Gao 博士友情提供



美國Polysciences公司是一家成立于1961年,致力于特殊技精細(xì)化學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品,單/多聚體等產(chǎn)品的研發(fā)供應(yīng),所提供的產(chǎn)品服務(wù)于組織學(xué)(顯微技術(shù))、生物技術(shù)、電子技術(shù)、護(hù)理及制藥工程等多個(gè)領(lǐng)域。起初為電子顯微鏡提供納米級(jí)樣本制備方案,幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域。隨后,開拓了在病理(組織研究)應(yīng)用產(chǎn)品,使組織除了石蠟包埋外,還能夠包埋在塑料塊中;開發(fā)染料和染色劑,以實(shí)現(xiàn)更好的樣品觀測方式。與****合作,開發(fā)了用于診斷試劑盒應(yīng)的聚合物微球。與美國國家**中心合作,開發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品,并用于紫杉醇的初步臨床試驗(yàn)。繼而開發(fā)出超順磁珠,用于DNA、蛋白質(zhì)和肽的研究。一般會(huì)同時(shí)設(shè)置對(duì)照,對(duì)RNAi結(jié)果進(jìn)行比較。RNAi的成功取決于正確導(dǎo)入合適量的siRNA,達(dá)到比較大預(yù)期反應(yīng)。

圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應(yīng)的敲低現(xiàn)象。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進(jìn)行注射。隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen顯色檢測)。持續(xù)敲低能力在單次注射后可觀察到更長的敲低時(shí)間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應(yīng)。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復(fù)合物后分別以1、0.5、及0.25mg/kg的劑量進(jìn)行注射。在第2、5、9、16、23及30日收集血清,并使用顯色法對(duì)血清進(jìn)行分析以確定FVII蛋白的敲低效果。低毒性原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖.非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑公司

.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進(jìn)行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑配制

產(chǎn)生慢***的比較

通過 LipoD293? 試劑(升級(jí)版)和 Lipofectamine LTX(LTX)試劑將三個(gè) cDNAs 共轉(zhuǎn)染進(jìn) 293T 細(xì)胞。一個(gè) GFP 載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細(xì)胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1 微升(上圖)和 10 微升(下圖)。

5 天后,細(xì)胞通過流式細(xì)胞儀檢測。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞的百分比來測定慢***的滴度。由 LipoD293? and LTX 產(chǎn)生的慢***的滴度被量化,分為是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。 上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑配制