上海核酸轉染試劑盒

來源: 發(fā)布時間:2022-03-06

基于陽離子聚合物的轉染試劑,帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過內吞作用進入細胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,前者細胞毒性相對較大,后者細胞毒性較小,但其轉染效率都高于脂質體轉染,適用也較為廣范。以上單一成分的轉染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性,可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉染試劑,不局限于單一成分,混合了不同配方的脂類(非脂質體)、加上蛋白質組分、以及各種的成分,兼具了轉染效率高和細胞毒性小的優(yōu)勢,且操作更加簡單,易于高通量。臨床級******毒載體生產必備轉染試劑..上海核酸轉染試劑盒

細胞轉染過程:X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化原代細胞轉染試劑推薦連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理。

細胞轉染過程X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。

對 HepG2 細胞轉染效率的比較

右圖:使用以上轉染試劑將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產商的提供的轉染步驟轉染到 HepG2 細胞(在膠原預處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng))。在轉染 48 小時之后,用流式細胞儀檢測 GFP 陽性細胞(%)和熒光強度。

左圖:血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑(升級版)對在 HepG2 細胞的轉染效率。通過三種不同的條件下轉染 HepG2 細胞(生長在膠原處理的培養(yǎng)皿上)---無血清和***,10% 血清和***的存在,轉染 5 小時后換液和不換液。

試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。

原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此,它們的形態(tài)學和生理特征和體內狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉染。在經過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉染的克隆傳代。一般會同時設置對照,對RNAi結果進行比較。RNAi的成功取決于正確導入合適量的siRNA,達到比較大預期反應。原代細胞轉染試劑推薦

轉染是將核酸導入真核細胞中的過程,是細胞生物學、基因表達和基因***實驗中的關鍵步驟。上海核酸轉染試劑盒

將膠質瘤干細胞(3×105)接種至6孔板中,然后使用riboFECTCP轉染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉染進膠質瘤干細胞(DP3321、DP7857)中,48h后,qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率。結果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為46.32%、49.71%和43.64%,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為53.21%、47.46%和46.31%。將1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以產生轉染混合物。然后將混合物加入DMEM(siRNA濃度:50nM)中,與原代小膠質細胞培養(yǎng)48h。RT-PCR和westernblot分析檢測轉染效率。結果發(fā)現(xiàn)轉染TREM-1siRNA后******了OGD誘導的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上調。上海核酸轉染試劑盒