5)對于檢測靈敏度要求特別高的實驗,建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品。6)在進(jìn)行D-熒光素鉀鹽的溶解時,應(yīng)使用無鈣鎂離子的DPBS,因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性,此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,從而影響檢測。7)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。8)本產(chǎn)品只作科研用途!熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱,其中更有代表性的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gaussluciferase)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應(yīng)用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究。螢火蟲螢光素酶更通用和更常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,該蛋白質(zhì)不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度(體內(nèi))甚至沒有毒性,可用于原核和真核細(xì)胞。運輸和保存運輸條件:4℃冰袋運輸。D-熒光素鉀鹽運輸條件是4℃冰袋運輸。體外研究D-熒光素鉀鹽生物公司
每孔加入100μl養(yǎng)24h后,Luciferin使其終濃度為150μg/ml,PBS,再加入D-立即用活題成像系統(tǒng)檢測,分析發(fā)光強(qiáng)度與細(xì)胞數(shù)之間的相關(guān)性。4)細(xì)胞生長曲線繪制MCF7-luc細(xì)胞和作為對照取表達(dá)熒光素酶的MCF-7細(xì)胞,接種于24孔板,接種密度為2×104/孔。細(xì)胞接種后1~7d,每天胰蛋白酶消化其中3孔細(xì)胞,用細(xì)胞計數(shù)儀測定細(xì)胞數(shù)。以細(xì)胞生長天數(shù)為橫坐標(biāo),細(xì)胞數(shù)目為縱坐標(biāo),分別繪制兩種細(xì)胞生長曲線。二.動物模型BLAB/c裸鼠皮下移植瘤模型的建立BLAB/cnu/nu裸鼠,4~5周齡,體重(15±2)g,雌雄各3只。取對數(shù)生長期的MCF-7用PBS重懸為2.5×10/ml懸液,每只裸鼠左右背側(cè)近腋部皮下接種100μl,共接種6只。接種后第5d采用德國BERTHOLD公司的活題成像系統(tǒng)檢測信號強(qiáng)度。以后每5d觀測一連續(xù)觀測30d。觀測前每只裸鼠戊巴比妥鈉麻醉(計量為:35mg/kg體重),按150mg/kg體重的量腹腔注射luciferin(invivograde),10min后,進(jìn)行活題成像觀察皮下腫大的瘤的生長情況,定量分析各時間點的熒光值。繪制腫大的瘤皮下生長曲線.MCF-7-luc細(xì)胞裸鼠皮下移植瘤的病理形態(tài)學(xué)觀察MCF-7-luc細(xì)胞裸鼠皮下接種后25d,脫頸處死小鼠,取腫大的瘤組織,制成石蠟切片,切片厚度為3μm。淮安ATPD-熒光素鉀鹽熒光素酶作用下的D-熒光素鉀鹽。
附錄ⅧB),與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液制成的對照液比較,不得更濃()。干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,減失重量不得過%(附錄ⅧL)。鋅鹽取本品,加氯化鈉的飽和水溶液10ml溶解后,加稀鹽酸2ml,搖勻,濾過,濾液中加亞鐵**鉀試液1ml,不得發(fā)生渾濁。5鑒別方法編輯(1)取本品的水溶液(1→2000)1滴,點于濾紙上,即生成黃色斑點,趁濕置溴蒸氣中,1分鐘后再使與氨蒸氣接觸,斑點即變?yōu)樯罘奂t色。(2)本品的水溶液顯強(qiáng)烈的熒光,用大量的水稀釋后仍極明顯;但加酸使成酸性后,熒光即消失;再加堿使成堿性,熒光又顯出。(3)本品熾灼灰化后顯鈉鹽的鑒別反應(yīng)(附錄Ⅲ)。6含量測定編輯取本品約,精密稱定,加水20ml溶解后,加稀鹽酸5ml使熒光素析出,用丁醇-氯仿(1:1)提取4次,每次20ml,合并提取液,用水10ml洗滌,洗液再用異丁醇-氯仿(1:1)5ml振搖提取,合并提取液,置105℃恒重的容器中,在水浴上通風(fēng)蒸發(fā)至干,殘渣用乙醇10ml溶解后,再置水浴上蒸干,并在105℃干燥至恒重,精密稱定,殘渣重量與相乘,即得供試量中含有C20H10Na2O5的重量。熒光素鈉是一種有機(jī)化合物,分子式為C20H10Na2O5,橙紅色粉末,無氣味,有吸濕性;易溶于水,溶液呈黃紅色,并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光。
luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。分析熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng)。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusoleariu')或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物,而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲)則有更多,因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyrali')。應(yīng)用熒光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實驗。D-熒光素鉀鹽測試適用范圍包括哪些?
熒光素鈉[1],橙紅色粉末,無氣味,有吸濕性;易溶于水,溶液呈黃紅色,并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光,酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(水)?;拘畔⑺幤访Q熒光素鈉拼音名Yingguangsuna英文名FLUORESCEINSODIUM來源(分子式)與標(biāo)準(zhǔn)本品為9-(鄰羧基苯基)-6-羥基-3H-噸-3-酮二鈉鹽。按干燥品計算,含C20H10Na2O5不得少于。類別診斷用藥。劑量滴眼2%溶液貯藏密封保存。制劑熒光素鈉注射液2化學(xué)性質(zhì)編輯中文名稱:熒光素鈉中文別名:熒光黃鈉;熒光橙紅鈉;熒光素二鈉英文名稱:FluoresceindisodiumsaltCAS號:518-47-8[2]熒光素鈉分子式:C20H10Na2O5分子量:等級:BSMDL號:MFCD00167039Beilstein號:3833041EC號:208-253-0熒光素鈉[1]3性狀描述編輯本品為橙紅色粉末;無臭,幾乎無味;有引濕性。本品在水中易溶,在乙醇中略溶。橙紅色粉末,無氣味,有吸濕性;易溶于水,溶液呈黃紅色,并帶極強(qiáng)的黃綠色熒光,酸化后消失,中和或堿化后又出現(xiàn),微溶于乙醇;比較大吸收波長(水)。4檢查資料編輯氯化物取本品,分取溶液10ml,依法檢查(附錄ⅧA),與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液制成的對照液比較,不得更濃()。硫酸鹽取上述氯化物項下剩余的溶液25ml,依法檢查。做D-熒光素鉀鹽的哪家便宜。熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽生物公司
D-熒光素鉀鹽短期保存條件是4℃干燥避光。體外研究D-熒光素鉀鹽生物公司
包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽)。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液??扇苡诩状己虳MSO;后者能夠易溶于水或緩沖液中,使用方便,溶劑無毒性,特別適合體內(nèi)實驗。配成溶液后的這三種產(chǎn)品,在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實質(zhì)性的差別。產(chǎn)品性質(zhì)運輸和保存運輸條件:4℃冰袋運輸;短期保存:4℃干燥避光長期保存:-20℃干燥避光母液保存:-20℃避光有效期長期保存:有效期一年工作液:先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。2)用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細(xì)胞培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進(jìn)行圖像分析。2.活題成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻。2)用μm濾膜過濾除菌。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。3)腹腔注射(.)。體外研究D-熒光素鉀鹽生物公司
南京翌科生物科技有限公司總部位于仙林街道緯地路9號江蘇生命科技園F7棟301-3室,是一家翌科生物基于團(tuán)隊十余年的研發(fā)基礎(chǔ),建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,包括外泌體提取與檢測試劑、非編碼 RNA 提取與檢測試劑、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達(dá)文庫、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子、細(xì)胞、動物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),服務(wù)全國各級高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測機(jī)構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶。的公司。翌科生物作為翌科生物基于團(tuán)隊十余年的研發(fā)基礎(chǔ),建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉(zhuǎn)化平臺。公司目前擁有豐富的產(chǎn)品線,包括外泌體提取與檢測試劑、非編碼 RNA 提取與檢測試劑、轉(zhuǎn)染試劑、microRNA 表達(dá)文庫、臨床大數(shù)據(jù)庫及涵蓋分子、細(xì)胞、動物的綜合科技服務(wù)等 100 多種試劑和科研外包服務(wù)。公司堅持國產(chǎn)試劑自主研發(fā),服務(wù)全國各級高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測機(jī)構(gòu)、生物醫(yī)藥公司等數(shù)千家客戶。的企業(yè)之一,為客戶提供良好的外泌體提取,非編碼RNA試劑,檢測試劑,轉(zhuǎn)染試劑。翌科生物始終以本分踏實的精神和必勝的信念,影響并帶動團(tuán)隊取得成功。翌科生物始終關(guān)注自身,在風(fēng)云變化的時代,對自身的建設(shè)毫不懈怠,高度的專注與執(zhí)著使翌科生物在行業(yè)的從容而自信。