HEK293宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法學驗證

來源： 發(fā)布時間：2025-08-23

HCP是由宿主細胞（通常是哺乳動物細胞或微生物）產生的蛋白質。這些蛋白質具有潛在的風險，可能會影響藥物的安全性和有效性。因此，HCP殘留量是生物藥物中一個關鍵質量屬性，要求在藥物的開發(fā)和生產階段對HCP的存在進行嚴格的監(jiān)控、管理和記錄。隨著生產流程，生物制品的純度在逐漸提高，HCPs總量和種類卻在持續(xù)降低，這使得對HCP的分析和監(jiān)測工作變得更加具有挑戰(zhàn)性。在這種情況下，開發(fā)高效的HCP富集材料和技術變得尤為關鍵。低豐度宿主殘留蛋白富集試劑盒，專為生物制品（如單抗、融合蛋白等）中HCP的富集和去除高豐度蛋白而設計，利用磁珠法構建了一個多樣化且復雜的親和配體庫，旨在高效地識別并結合目標蛋白。其設計不僅針對傳統(tǒng)的單一蛋白，還能適用于融合蛋白、單克隆抗體等多種生物樣本類型，展現了較強的適用性和靈活性。
定制化宿主細胞蛋白殘留檢測試劑盒產生的HCP抗體特異性更好，能檢出高風險HCP。HEK293宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法學驗證

HEK293宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法學驗證,宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測

對宿主細胞蛋白殘留的監(jiān)測是生物藥物生產中一個至關重要的質量屬性（Critical Quality Attribute, CQA），它要求在藥物的開發(fā)和生產階段對HCP的存在進行嚴格的監(jiān)控、管理和記錄。隨著生產流程，生物制品的目標蛋白純度逐漸提高，相應地，HCP的含量在持續(xù)降低。這使得在富含目標蛋白，如單抗、融合蛋白等下游工藝樣品在對HCP進行分析和監(jiān)測就變得更加具有挑戰(zhàn)性。在這種情況下，高效的HCP富集材料和技術變得尤為關鍵。SHENTEK®AbunProteoX是一種基于磁珠構建的親和配體，可高效識別并結合目標蛋白。利用磁性納米顆粒的獨特性質，能夠快速且有效地捕獲HCP，顯著提高檢測靈敏度。此外，親和配體的普遍適用性使得AbunProteoX在處理多種生物樣本時都能表現出色，確保了在樣品中存在高濃度目標蛋白時對低濃度HCP進行質譜、電泳等檢測分析的準確性和可靠性。 漢遜酵母宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測常見問題分析宿主細胞蛋白殘留檢測試劑盒的開發(fā)不是一個簡單的過程，是一個對平臺、技術均有很高要求的整體流程。

HEK293宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法學驗證,宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測

宿主細胞蛋白通常是與重要細胞功能相關的蛋白，如細胞增殖、基因轉錄、蛋白合成修飾、細胞存活、細胞凋亡等，在工藝過程中分泌或因細胞死亡或裂解而釋放。生產過程中，以下幾個因素會主要影響HCP的組成和豐度：①宿主細胞基因組調控及培養(yǎng)工藝：特定工藝下，潛在的HCP數量可能非常大，且非所有基因都表達，某些基因在不同的時間和條件下表達；如大腸桿菌約4300個基因，不同的工藝產物會經歷獨特的翻譯后修飾，增加了HCP的總數和生化復雜性。有研究表明，如大腸桿菌表達的蛋白，其不同蛋白之間存在數量差異，這些差異可能是對環(huán)境條件的適應性反應，但大多數 (85-90%) 有潛在免疫原性的宿主細胞蛋白在不同的發(fā)酵過程中都會出現。②產物表達方式：宿主細胞與外源基因、載體和輔助成分組成的體系可以穩(wěn)定、瞬時和誘導表達；如大腸桿菌常見的表達形式有胞內表達、分泌表達、可溶性表達、不溶性的包涵體形式，以及融合和非融合表達。③純化步驟及產品本身的特性的影響：純化過程中大部分的HCP被去除(>99％)，殘留的HCP仍保留在產品中，可能與產品共結合，一起被純化。

湖州申科生物憑借其先進的整合技術平臺在HCP檢測領域建立起優(yōu)勢。公司通過自主研發(fā)突破性技術—包括基于IMBS的抗體覆蓋率檢測方法和基于核酸文庫的低豐度HCP富集技術，提升了HCP檢測的靈敏度和HCP抗體覆蓋能力，相關成果已發(fā)表于《中國新藥雜志》《藥物分析雜志》等期刊并納入國家科技重大專項。同時，依托前沿的精密分析平臺，湖州申科構建了覆蓋完整HCP分析鏈條的LC-MS解決方案，涵蓋抗原一致性評價、IMBS前處理、低豐度蛋白富集、生信分析及專屬數據庫構建等關鍵環(huán)節(jié)，形成從樣品管理到風險分析的閉環(huán)體系。該平臺嚴格依照法規(guī)要求，所有檢測技術均通過符合ICH及藥典要求的方法學驗證，確保數據可靠并滿足生物制品申報（如IND/BLA）的法規(guī)標準。憑借這一技術整合能力，公司已為全球200余家生物醫(yī)藥企業(yè)提供從工藝開發(fā)到質控放行的一站式HCP檢測服務，賦能單抗、疫苗等產品的安全性與合規(guī)性提升。
湖州申科構建 HCP ELISA 檢測全流程平臺，確保試劑盒性能可靠。

HEK293宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法學驗證,宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測

大腸桿菌具有遺傳性狀清晰，易于培養(yǎng)和控制，表達水平高，成本低，周期短等特點，是優(yōu)先的經濟實惠的蛋白表達系統(tǒng)，K-12系列和B系列菌株是工業(yè)規(guī)模上常用于生物工程的E.coli細菌株。K-12菌種、所衍生出的DH5α、Top10、JM109等菌株，可用于大量生產質粒DNA并進一步制備細胞基因治療產品和病毒載體類疫苗。源于B系的菌株，如BL21，更適用于高效轉染表達載體和常規(guī)蛋白的表達，如：病毒蛋白、重組蛋白疫苗、細胞因子、酶類等產品。湖州申科生物針對這兩種菌株的特點，分別開發(fā)了E.coli表達菌HCP殘留檢測試劑盒和E.coli克隆菌堿裂HCP殘留檢測試劑盒。
HCP 檢測試劑盒開發(fā)要兼顧法規(guī)合規(guī)、物料充足穩(wěn)定、團隊專業(yè)響應與案例積累，形成系統(tǒng)性保障能力。單抗藥物用宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法對比

湖州申科HCP試劑盒開發(fā)經抗原表征、抗體制備到體系驗證，全流程符合法規(guī)要求。HEK293宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法學驗證

宿主細胞蛋白（HCP）作為生物制品中來源于細胞基質的殘留雜質，具有明顯的異質性特征。其復雜性體現在三個方面：①理化特性差異：HCP涵蓋胞內及分泌蛋白，涉及關鍵生理功能，具有涵蓋區(qū)間大的等電點（pI 3-11）、分子量范圍（5-250kDa）及疏水性；②上游工藝影響：不同發(fā)酵工藝（如細胞株、培養(yǎng)條件）誘導獨特的翻譯后修飾（PTM），導致HCP總量與生化復雜性增加；③下游工藝與產物特性干擾：抗體、細胞因子等重組蛋白或病毒類藥物的純化工藝會選擇性殘留特定HCP，且產物形式（如大腸桿菌的包涵體/可溶性表達）直接影響HCP殘留譜。針對特定生產工藝開發(fā)定制化檢測方案是準確監(jiān)控宿主細胞蛋白殘留的關鍵。
HEK293宿主細胞蛋白（HCP）殘留檢測方法學驗證