在生物技術(shù)的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程的關(guān)鍵工具之一,而 AluI 則是其中一位“微雕大師”。它以其獨(dú)特的識別序列和切割方式,在基因工程、分子生物學(xué)研究以及遺傳學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。AluI 的識別序列是“AG^CT”,這一序列在基因組中相對常見,使得 AluI 能夠在多個位點(diǎn)進(jìn)行切割。它會在識別到該序列后,在“^”標(biāo)記的位置將 DNA 鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端。這種切割方式使得 AluI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢。在基因工程中,AluI 的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這一過程不僅需要精細(xì)的切割,還需要切割后的片段能夠完美匹配,而 AluI 的黏性末端特性正好滿足了這一需求。AluI 的另一個重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 AluI 對不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。例如,在某些遺傳病的研究中,AluI 可以用來檢測基因突變,幫助科學(xué)家更好地理解疾病的遺傳機(jī)制。在這個過程中,E1使用ATP的能量,在自身的活性位點(diǎn)的半胱氨酸殘基與泛素C末端的甘氨酸殘基形成硫酯鍵。Recombinant Human MEC/CCL28
重組人TNFRSF11B蛋白(His Tag)是一種在哺乳動物細(xì)胞中表達(dá)的重組蛋白,融合了His標(biāo)簽,便于純化和檢測。TNFRSF11B(Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily Member 11B),也稱為OPG(Osteoprotegerin),是一種可溶性受體蛋白,廣參與骨代謝和免疫調(diào)節(jié)。OPG通過競爭性結(jié)合RANKL,抑制RANKL與RANK的相互作用,從而調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞的分化和活性,在維持骨穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。TNFRSF11B的功能與機(jī)制TNFRSF11B(OPG)是一種可溶性受體蛋白,通過其胞外區(qū)的TNF受體結(jié)構(gòu)域與RANKL結(jié)合,阻止RANKL啟動RANK信號通路。這一過程對調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞的分化和活性至關(guān)重要,進(jìn)而影響骨吸收和骨形成。OPG在骨代謝中發(fā)揮重要作用,通過抑制RANKL-RANK信號通路,減少破骨細(xì)胞的生成和活性,從而維持骨密度和骨強(qiáng)度。此外,OPG還參與調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的分化和功能,影響免疫反應(yīng)的平衡。OPG的功能異常與多種疾病相關(guān),如骨質(zhì)疏松癥、骨硬化癥和某些自身免疫性疾病。重組人TNFRSF11B蛋白(His Tag)的特點(diǎn)重組人TNFRSF11B蛋白(His Tag)具有以下明顯特點(diǎn):高純度:純度≥95%(經(jīng)SDS-PAGE和SEC-HPLC驗(yàn)證),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
重組人TNFSF15蛋白(HisTag)是一種在哺乳動物細(xì)胞中表達(dá)的重組蛋白,融合了His標(biāo)簽,便于純化和檢測。TNFSF15(TumorNecrosisFactorSuperfamilyMember15),也稱為VEGI(VascularEndothelialGrowthInhibitor),是TNF超家族的重要成員,廣參與免疫調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)和血管生成的調(diào)控。它在多種生物學(xué)過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,尤其是在免疫細(xì)胞的啟動和組織修復(fù)過程中。TNFSF15的功能與機(jī)制TNFSF15通過其胞外區(qū)與受體(如TNFRSF25)結(jié)合,啟動下游的信號通路。TNFSF15的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)依賴于其受體的胞內(nèi)段結(jié)構(gòu)域,能夠啟動NF-κB、MAPK和JNK等信號通路,進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的存活、增殖和炎癥反應(yīng)。在免疫系統(tǒng)中,TNFSF15通過啟動免疫細(xì)胞(如T細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞),促進(jìn)免疫反應(yīng)。此外,TNFSF15在血管生成中也發(fā)揮重要作用,通過抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移,調(diào)節(jié)血管的形成。TNFSF15的功能異常與多種疾病相關(guān),如自身免疫性疾病、炎癥性疾病和瘤。重組人TNFSF15蛋白(HisTag)的特點(diǎn)重組人TNFSF15蛋白(HisTag)具有以下明顯特點(diǎn):高純度:純度≥95%(經(jīng)SDS-PAGE和SEC-HPLC驗(yàn)證),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。低內(nèi)素:內(nèi)素水平<0.1EU/μg,適合用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)研究。
重組人整合素αVβ8(ITGAV&ITGB8)異源二聚體蛋白(His-Avi標(biāo)簽)是一種重要的細(xì)胞表面受體,廣參與細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間的相互作用,在組織發(fā)育、免疫調(diào)節(jié)及發(fā)生等生理和病理過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。整合素αVβ8由αV(ITGAV)和β8(ITGB8)兩個亞基組成,主要在神經(jīng)組織、上皮細(xì)胞及某些免疫細(xì)胞中表達(dá),具有獨(dú)特的配體結(jié)合特性,尤其與潛伏性TGF-β啟動密切相關(guān)。該重組蛋白通過哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。其N端融合了His標(biāo)簽,便于通過金屬螯合親和層析進(jìn)行高效純化;同時帶有Avi標(biāo)簽,可在體內(nèi)或體外通過生物素連接酶實(shí)現(xiàn)特異性生物素化,極大提高了其在ELISA、表面等離子共振(SPR)及細(xì)胞功能檢測等實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用靈活性。αVβ8異源二聚體蛋白在神經(jīng)發(fā)育、免疫調(diào)節(jié)及微環(huán)境研究中具有重要價值,尤其適用于研究其與TGF-β的相互作用機(jī)制。其高純度、高穩(wěn)定性和良好的批間一致性,使其成為藥物篩選、抗體開發(fā)及基礎(chǔ)研究的理想工具,為深入探索整合素介導(dǎo)的生物學(xué)過程提供了可靠平臺。T4 DNA 聚合酶相對不耐熱,在 70℃加熱 10 分鐘可使 T4 DNA 聚合酶失活,因此在實(shí)驗(yàn)操作過程中需要注意溫度。
Recombinant Human RGMa Protein(His-Avi Tag)是一種高純度、生物活性優(yōu)異的重組蛋白,專為神經(jīng)系統(tǒng)疾病機(jī)制與再生醫(yī)學(xué)研究設(shè)計(jì)。RGMa(Repulsive Guidance Molecule a)作為軸突導(dǎo)向的關(guān)鍵抑制因子,通過結(jié)合Neogenin受體調(diào)控神經(jīng)元生長錐塌陷,在脊髓損傷、多發(fā)性硬化等病理過程中扮演重要角色。該蛋白采用哺乳動物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng),保留天然構(gòu)象與糖基化修飾,C端融合的His標(biāo)簽與Avi標(biāo)簽實(shí)現(xiàn)雙重功能:His標(biāo)簽便于通過Ni-NTA層析高效純化(純度≥95%);Avi標(biāo)簽則允許生物素定點(diǎn)標(biāo)記,適配基于鏈霉親和素的檢測平臺(如BLI、SPR),明顯提升相互作用研究的靈敏度與可重復(fù)性。實(shí)驗(yàn)表明,該蛋白在體外可劑量依賴性地抑制雞胚背根神經(jīng)節(jié)軸突延伸(IC50≈50 ng/mL),并可特異性阻斷Neogenin介導(dǎo)的RhoA啟動通路。此外,其內(nèi)素水平<0.1 EU/μg,滿足體內(nèi)應(yīng)用需求。作為神經(jīng)科學(xué)與藥物篩選的榜樣試劑,Recombinant Human RGMa Protein(His-Avi Tag)為解析抑制性信號網(wǎng)絡(luò)、開發(fā)促神經(jīng)再生療法提供了不可或缺的分子工具。Phusion Master Mix (2×) 是一種即用型預(yù)混液包含dNTPs、Mg2?和優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液加入模板和引物可進(jìn)行反應(yīng)。Recombinant Cynomolgus BAFFR/TNFRSF13C Protein,His Tag
多泛素化的靶蛋白被26S蛋白酶體識別。26S蛋白酶體由一個20S顆粒和兩個19S調(diào)節(jié)顆粒組成。Recombinant Human MEC/CCL28
在基因工程的微觀世界中,AciI酶猶如一位精細(xì)的“導(dǎo)航員”,為科學(xué)家們在復(fù)雜而浩瀚的基因海洋中指引著方向。它是一種限制性核酸內(nèi)切酶,憑借其獨(dú)特的識別序列和切割能力,成為現(xiàn)代替物技術(shù)中不可或缺的工具之一。AciI酶的識別序列是“CC^CAGAGG”,這一序列在DNA分子中相對罕見,使得AciI在切割過程中展現(xiàn)出極高的特異性。它會在識別到該序列后,精確地在“^”標(biāo)記的位置將DNA鏈切斷,這種切割方式能夠產(chǎn)生黏性末端,為后續(xù)的基因重組提供了便利條件。在基因工程中,AciI酶的精細(xì)切割能力被廣泛應(yīng)用于基因克隆和重組DNA的構(gòu)建??茖W(xué)家們可以利用AciI酶將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,就像從一座巨大的寶藏中找到那顆比較好珍貴的寶石。隨后,通過DNA連接酶,將切割后的基因片段與載體DNA連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。AciI酶的另一個重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察AciI酶對不同DNA樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。Recombinant Human MEC/CCL28