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在現(xiàn)代替物技術(shù)的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程的關(guān)鍵工具之一,而 AscI 便是其中一位“稀有切割手”。它以其獨(dú)特的識(shí)別序列和精細(xì)的切割能力,在基因工程、分子生物學(xué)研究以及遺傳學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。AscI 的識(shí)別序列是“GG^CGCGCC”,這一序列在基因組中極為罕見,使得 AscI 的切割位點(diǎn)相對(duì)稀少。這種稀有性使得 AscI 在處理復(fù)雜基因組時(shí)具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì),能夠避免過度切割導(dǎo)致的片段過小或信息丟失。AscI 會(huì)在“^”標(biāo)記的位置將 DNA 鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端,這種黏性末端的特性使得 AscI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。在基因工程中,AscI 的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這種精細(xì)的切割能力使得 AscI 成為處理大型基因組或復(fù)雜基因片段時(shí)的理想選擇。AscI 的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 AscI 對(duì)不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。Recombinant Human TREM1 Protein,His Tag使用 Tn5 轉(zhuǎn)座酶可以保證 DNA的 片段化的質(zhì)量,同時(shí)獲得的蛋白純度高、核酸殘留低,能夠?yàn)楹罄m(xù)的實(shí)驗(yàn)。
重組人整合素αVβ5(ITGAV&ITGB5)異源二聚體蛋白(His-Avi標(biāo)簽)是一種重要的細(xì)胞粘附分子,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、藥物篩選和疾病機(jī)制研究。整合素αVβ5由αV(ITGAV)和β5(ITGB5)兩個(gè)亞基組成,是細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)與細(xì)胞之間信號(hào)傳遞的關(guān)鍵介質(zhì),尤其在轉(zhuǎn)移、血管生成和病毒沾染等過程中發(fā)揮重要作用。該重組蛋白通過基因工程技術(shù)在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá),確保了其天然的構(gòu)象和生物活性。His標(biāo)簽便于通過金屬螯合親和層析進(jìn)行純化,而Avi標(biāo)簽則允許通過生物素連接酶進(jìn)行特異性生物素化,便于后續(xù)的檢測(cè)、固定或與其他分子的偶聯(lián)。這種雙重標(biāo)簽設(shè)計(jì)更大提高了蛋白在實(shí)驗(yàn)中的可操作性和應(yīng)用靈活性。在功能研究中,αVβ5異源二聚體蛋白可用于研究其與配體(如玻連蛋白)的結(jié)合特性,或作為體外細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵試劑。此外,它也是開發(fā)靶向整合素藥物的重要工具,尤其在抗和抗纖維化藥物篩選中具有重要價(jià)值。其高純度和高穩(wěn)定性使其成為科研和藥物開發(fā)中不可或缺的關(guān)鍵材料。
在基因工程的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是科學(xué)家們不可或缺的工具,而AvaII便是其中一位“關(guān)鍵刻刀”。它以其獨(dú)特的識(shí)別序列和精細(xì)的切割能力,在基因克隆、基因分析以及分子生物學(xué)研究中發(fā)揮著重要作用。AvaII的識(shí)別序列是“G^GWCC”,其中“W”突出腺嘌呤(A)或胸腺嘧啶(T)。這種序列的識(shí)別特性使得AvaII能夠在特定位置進(jìn)行切割,產(chǎn)生黏性末端。這種黏性末端的特性使得AvaII在基因克隆和重組DNA構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。在基因工程中,AvaII的應(yīng)用極為廣??茖W(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過DNA連接酶將切割后的基因片段與載體DNA連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這種精細(xì)的切割能力使得AvaII成為處理復(fù)雜基因組時(shí)的理想選擇。AvaII的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察AvaII對(duì)不同DNA樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。例如,在某些遺傳病的研究中,AvaII可以用來檢測(cè)基因突變,幫助科學(xué)家更好地理解疾病的遺傳機(jī)制。AvaII的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用是分子生物學(xué)領(lǐng)域的一大進(jìn)步。Pfu DNA Polymerase的熱穩(wěn)定性和保真性使其在優(yōu)化PCR條件時(shí)更為靈活,比如在GC含量較高的模板中。
重組人L1CAM蛋白(Recombinant Human L1CAM Protein, His Tag)是一種重要的神經(jīng)細(xì)胞粘附分子,屬于免疫球蛋白超家族成員,廣表達(dá)于神經(jīng)系統(tǒng),尤其在神經(jīng)元軸突生長、遷移和突觸形成過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。L1CAM(L1 Cell Adhesion Molecule)通過介導(dǎo)細(xì)胞間或細(xì)胞與基質(zhì)間的相互作用,參與神經(jīng)發(fā)育、損傷修復(fù)及突觸可塑性調(diào)控。該重組蛋白采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如HEK293細(xì)胞)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。其N端融合了His標(biāo)簽,便于通過Ni-NTA親和層析進(jìn)行高效純化,獲得高純度、高穩(wěn)定性的蛋白產(chǎn)物。這種設(shè)計(jì)不僅提高了蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,也方便了后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,如ELISA、Western blot、免疫沉淀及細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)等。研究表明,L1CAM在多種病中表達(dá)上調(diào),與腫瘤細(xì)胞的遷移、侵襲及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。此外,L1CAM基因突變還與X連鎖神經(jīng)發(fā)育障礙(如CRASH綜合征)相關(guān)。因此,重組人L1CAM蛋白不僅是研究神經(jīng)發(fā)育和病轉(zhuǎn)移機(jī)制的重要工具,也為開發(fā)相關(guān)疾病的治策略提供了有力支持,具有重要的科研和臨床應(yīng)用價(jià)值。利用His標(biāo)簽通過親和層析從細(xì)胞裂解物中純化目標(biāo)蛋白,然后可能通過離子交換層析、等方法進(jìn)一步提純。Recombinant Human B7-H4 Protein,His-Avi Tag
去泛素化酶(Deubiquitinating enzymes, DUBs)可以去除泛素化蛋白上的泛素鏈,使泛素分子得以回收和再利用。Recombinant Human IL-28A Protein
重組人激肽釋放酶5(Recombinant Human Kallikrein 5,簡(jiǎn)稱KLK5)是一種絲氨酸蛋白酶,屬于人組織激肽釋放酶家族成員,廣表達(dá)于皮膚、乳腺、唾液腺和食管等組織中。KLK5在皮膚中尤其豐富,主要參與角質(zhì)層蛋白的降解過程,對(duì)維持皮膚屏障功能和正常脫屑具有重要作用。該重組蛋白通常采用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)制備,N端帶有His標(biāo)簽,便于通過金屬螯合親和層析(IMAC)進(jìn)行高效純化,純度可達(dá)95%以上。蛋白以液體形式提供,溶解于含尿素的緩沖液中,適合用于體外酶活性分析、抗體開發(fā)及蛋白質(zhì)相互作用研究。研究表明,KLK5具有胰蛋白酶樣活性,能夠特異性切割含有精氨酸或賴氨酸殘基的底物,但不具有胰凝乳蛋白酶樣活性。此外,KLK5在體液中可與蛋白酶抑制劑如α1-抗胰蛋白酶和α2-巨球蛋白形成復(fù)合物,這種相互作用可能調(diào)節(jié)其酶活性,并在炎癥和病微環(huán)境中發(fā)揮重要作用。在病研究中,KLK5被發(fā)現(xiàn)與卵巢病和乳腺病的發(fā)長發(fā)展密切相關(guān),其表達(dá)水平在患者血清和腹水中明顯升高,提示其可能作為潛在的病標(biāo)志物用于臨床診斷和預(yù)后評(píng)估。因此,重組人KLK5蛋白不僅是研究皮膚生理和病理機(jī)制的重要工具,也為病標(biāo)志物開發(fā)和藥物篩選提供了有力支持。Recombinant Human IL-28A Protein