化妝品急性毒性細(xì)胞試驗(yàn)

斑馬魚(yú)原產(chǎn)于亞洲南部，經(jīng)常分布于印度、孟加拉國(guó)、尼泊爾等國(guó)家，是一種小型熱帶淡水魚(yú)，具有易飼養(yǎng)、繁殖能力強(qiáng)、發(fā)育快、受精卵透明、易于觀察等特點(diǎn)。斑馬魚(yú)作為模式生物的一部分，與人類基因組有高達(dá)87%的同源性4。自20世紀(jì)30年代以來(lái)，斑馬魚(yú)被確立為發(fā)育和繁殖研究的模型四。隨著斑馬魚(yú)技術(shù)的發(fā)展，斑馬魚(yú)模型逐漸被應(yīng)用于毒理學(xué)、藥物篩選、環(huán)境污染等研究。近年來(lái)，斑馬魚(yú)作為一種新興的模型被常常應(yīng)用于化妝品及其原材料的功效評(píng)價(jià)中。歐盟委員會(huì)指57%0/63/EU允許在斑馬魚(yú)胚胎和早期幼魚(yú)階段(受精后5天之前)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，而不受動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的監(jiān)管[。這是因?yàn)樵缙诎l(fā)育階段的斑馬魚(yú)胚胎幾乎沒(méi)有疼痛感，斑馬魚(yú)模型符合3R原則。2021年4月9日，國(guó)家藥監(jiān)局頒布了《化妝晶功效宣稱評(píng)價(jià)規(guī)范》，此外，國(guó)內(nèi)多項(xiàng)使用斑馬魚(yú)模型進(jìn)行化妝品功效評(píng)價(jià)的團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)也被發(fā)布，這些舉措使得斑馬魚(yú)逐漸成為了化妝品領(lǐng)域高度認(rèn)可的評(píng)價(jià)模型之一間。去痘功效檢測(cè)中，連續(xù)使用該凝膠14天后，受試者痘痘數(shù)量減少65%?；瘖y品急性毒性細(xì)胞試驗(yàn)

斑馬魚(yú)肥大細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能與人類相似，為抗過(guò)敏功效評(píng)價(jià)提供了體內(nèi)模型。實(shí)驗(yàn)通過(guò)N-苯甲酰-DL-精氨酸對(duì)硝基苯酰胺鹽酸鹽（BAPNA）底物法檢測(cè)類胰蛋白酶活性，定量評(píng)估過(guò)敏反應(yīng)強(qiáng)度。例如，某含燕麥生物堿的乳液可使斑馬魚(yú)胚胎類胰蛋白酶表達(dá)量降低58%，且過(guò)敏癥狀（如心率異常、運(yùn)動(dòng)遲緩）發(fā)生率減少72%。該方法基于肥大細(xì)胞脫顆粒釋放組胺的免疫機(jī)制，通過(guò)熒光定量PCR檢測(cè)過(guò)敏相關(guān)基因（如IL-4、IL-13）表達(dá)變化實(shí)現(xiàn)機(jī)制驗(yàn)證。相較于豚鼠皮膚致敏實(shí)驗(yàn)，斑馬魚(yú)模型可避免個(gè)體差異導(dǎo)致的假陰性結(jié)果，且實(shí)驗(yàn)周期從42天縮短至7天。目前，完美、養(yǎng)生堂等企業(yè)已將斑馬魚(yú)抗過(guò)敏評(píng)價(jià)納入產(chǎn)品備案體系。美白舒緩功效測(cè)試志愿者數(shù)據(jù)庫(kù)涵蓋不同膚質(zhì)與年齡層，確保測(cè)試結(jié)果的人群代表性。

斑馬魚(yú)尾部脫水皺縮模型是評(píng)估化妝品保濕性能的關(guān)鍵工具。其皮膚真皮層含水通道蛋白AQP3，與人類透明質(zhì)酸合成酶HAS3協(xié)同調(diào)控水分平衡。實(shí)驗(yàn)中，將斑馬魚(yú)胚胎置于高滲氯化鈉溶液中，尾部因脫水發(fā)生皺縮，通過(guò)顯微鏡測(cè)量尾部面積變化并檢測(cè)aqp3、has3基因表達(dá)量。例如，某糙米發(fā)酵濾液可使斑馬魚(yú)尾部面積縮小抑制率達(dá)65%，同時(shí)aqp3基因表達(dá)量提升2.3倍，證實(shí)其強(qiáng)的效保濕能力。該模型已被江蘇省特殊化妝品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心等機(jī)構(gòu)納入標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)流程，成為保濕功效宣稱的重要依據(jù)。

在化妝品行業(yè)蓬勃發(fā)展的當(dāng)下，環(huán)特人體功效實(shí)驗(yàn)室平臺(tái)以第三方技術(shù)服務(wù)機(jī)構(gòu)的專業(yè)姿態(tài)脫穎而出，致力于成為化妝品人體功效評(píng)價(jià)和研究領(lǐng)域的榜樣。該平臺(tái)專注于化妝品人體測(cè)試及方法研究，始終秉持嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)的態(tài)度，從實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)到結(jié)果分析，嚴(yán)格把控每一個(gè)環(huán)節(jié)。實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格遵循化妝品功效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)，1500平方米的空間布局充分考量功效與安全性評(píng)價(jià)的專業(yè)需求和多功能場(chǎng)景。兩大恒溫恒濕實(shí)驗(yàn)區(qū)域、專業(yè)的感官評(píng)估室、皮膚科醫(yī)生評(píng)估室等功能分區(qū)，不僅為化妝品人體測(cè)試提供了標(biāo)準(zhǔn)化的環(huán)境，更以可同時(shí)容納200名志愿者的規(guī)模，確保測(cè)試樣本的多樣性與代表性，為化妝品企業(yè)提供影響力、可靠的測(cè)試數(shù)據(jù)，助力產(chǎn)品在市場(chǎng)中脫穎而出。單獨(dú)資料室采用加密存儲(chǔ)系統(tǒng)，保障化妝品測(cè)試數(shù)據(jù)的隱私性與可追溯性。

皮膚外用產(chǎn)品的制造、運(yùn)輸和銷售需要事先進(jìn)行安全性評(píng)估，并評(píng)估可能因預(yù)期用途、誤用、或意外皮膚暴露而導(dǎo)致的皮膚反應(yīng)。離體皮膚的另一重要應(yīng)用是評(píng)估皮膚外用產(chǎn)品的安全性和功效性，這包括日用品、化妝品、藥品、醫(yī)療器械等。BURGHER等人使用腹部整形手術(shù)獲取的人體皮膚外植體研究了氫氟酸的腐蝕性，他們發(fā)現(xiàn)70%的氯氟酸在作用的5分鐘內(nèi)即可完全穿透皮膚，這與之前研究的意外氫氟酸暴露的臨床結(jié)果是一致的均。研究人員在OECDTG439標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)之上，開(kāi)發(fā)了使用離體皮膚模型評(píng)估化合物是否具有潛在刺激性的方法。通過(guò)對(duì)120種化妝品刺激離體皮膚的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與人體斑貼實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)離體皮膚模型檢測(cè)的特異性為89.9%，準(zhǔn)確率為89.1%[46]。此外，科研人員還使用彗星實(shí)驗(yàn)對(duì)手術(shù)獲得的離體皮膚進(jìn)行了化合物遺傳毒性的評(píng)估，通過(guò)將離體皮膚局部暴露于20中化學(xué)物質(zhì)中，他們發(fā)現(xiàn)其遺傳毒性檢測(cè)的靈敏度、特異性和準(zhǔn)確性分別為89%、90%和89%切。這些結(jié)果均表明離體皮膚是外用產(chǎn)品刺激性、腐蝕性、遺傳毒性等評(píng)價(jià)的可靠模型，具有廣泛的應(yīng)用前景。皮膚刺激測(cè)試是評(píng)估美白化妝品對(duì)皮膚刺激性的一種常用方法。美白舒緩功效測(cè)試

持久留香證明：利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，分析產(chǎn)品香精留存時(shí)間曲線?；瘖y品急性毒性細(xì)胞試驗(yàn)

隨著消費(fèi)者對(duì)健康和環(huán)保意識(shí)的提升，天然成分在化妝品研發(fā)中的應(yīng)用越來(lái)越寬泛。研發(fā)人員致力于從大自然中發(fā)掘具有護(hù)膚、美容功效的珍貴成分，如植物提取物、海洋精華和天然油脂等。這些成分不僅能夠有效改善肌膚狀態(tài)，如保濕、抗氧化和舒緩肌膚，還能減少化學(xué)合成成分對(duì)肌膚可能造成的負(fù)擔(dān)。在提取和加工這些天然成分時(shí)，研發(fā)人員需要采用先進(jìn)的科技手段，以確保其活性成分得以完整保留，同時(shí)避免對(duì)自然環(huán)境造成破壞。天然成分的應(yīng)用，不僅提升了化妝品的品質(zhì)，也滿足了現(xiàn)代消費(fèi)者對(duì)綠色、健康生活的追求?；瘖y品急性毒性細(xì)胞試驗(yàn)