細胞轉(zhuǎn)染過程X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作.我們希望把mRNA轉(zhuǎn)染進入原代細胞,那**適合的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品就是Lipofectamine MessengerMAX?或是Neon電轉(zhuǎn)儀。湖北轉(zhuǎn)染試劑pei
細胞轉(zhuǎn)染如果以上都沒有問題,那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細胞了,轉(zhuǎn)染效果直接影響著出毒效率,那么一款好的轉(zhuǎn)染試劑在此時就是至關重要了!在這里給大家推薦一款性價比超高的轉(zhuǎn)染試劑,美國Polysciences家的PEIMAX40K!PEIMAX40K(也稱為游離堿PEI22K)是一種功能強大,值得信賴且經(jīng)濟高效的瞬時轉(zhuǎn)染試劑。在HEK293和CHO表達系統(tǒng)中,能在96孔板至100L生物反應器范圍內(nèi)提供始終如一高效的基因表達。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉(zhuǎn)染試劑,以獲得他們所需要的優(yōu)勢。相較于其他類型轉(zhuǎn)染試劑,使用自行制備的PEI轉(zhuǎn)染試劑可以使總轉(zhuǎn)染成本降低高達40%左右。ThomasM,etal(2005)研究數(shù)據(jù)表明,去乙?;腜EI40000(PolyethylenimineMAX40000)體外質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率提高21倍,小鼠體內(nèi)靶向效率達到10000倍,隨之肺部特異療效顯示增強1500倍。湖北轉(zhuǎn)染試劑pei隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen 顯色檢測)。
用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。
靶向敲低
在實驗靶標中可觀察到高達85%的敲低效果
使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復合物,以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進行注射,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達85%的敲低(使用TaqMan分析對敲低進行評估)。
羅氏X-TremeGENE 便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,升級版的多組分混合試劑,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細胞毒性,在超過350株真核細胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗證,尤其針對難轉(zhuǎn)染細胞株亦有出色表現(xiàn)。
兩種試劑對CHO-K1 細胞轉(zhuǎn)染帶GFP標記的質(zhì)粒,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,B和D是明場顯微圖. 與競爭產(chǎn)品比較,X-tremeGENE HP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細胞毒性
不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細胞株進行轉(zhuǎn)染,X-tremeGENE HP 試劑遠優(yōu)于其他試劑
超過350種細胞株的高效轉(zhuǎn)染驗證
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默克自2015年成為羅氏生化試劑的全球***代理,可以提供從細胞培養(yǎng)和功能分析、基因機理研究到蛋白機理研究的完整方案: 轉(zhuǎn)染的細胞類型可簡單分為兩大類,連續(xù)細胞系和原代細胞。
超級好用的siRNA和miRNA轉(zhuǎn)染試劑——HiPerFect高效沉默低脫靶:HiPerFect是小RNA轉(zhuǎn)染試劑,這種非脂質(zhì)體的脂質(zhì)分子可以在siRNA低至100pM濃度的條件下轉(zhuǎn)染(推薦濃度是1nM-5nM)。保持高效基因沉默的同時降低脫靶效應,正是這一產(chǎn)品的精髓所在。除了siRNA,HiPerFect還能夠用于miRNA模擬物和***劑的轉(zhuǎn)染,滿足miRNA功能分析的需要。操作簡單,方便快速:HiperFect轉(zhuǎn)染試劑的方便程度也是***的,甚至***之內(nèi)可以完成再次接種、轉(zhuǎn)染到檢測結(jié)果!這對于高通量反應簡直是求之不得的福音:轉(zhuǎn)染前將細胞按比例接種到24孔培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)基可以是含有***和血清的,在37度培養(yǎng)箱中保溫。一般會同時設置對照,對RNAi結(jié)果進行比較。RNAi的成功取決于正確導入合適量的siRNA,達到比較大預期反應。湖北英格恩轉(zhuǎn)染試劑說明書
轉(zhuǎn)染是將核酸導入真核細胞中的過程,是細胞生物學、基因表達和基因***實驗中的關鍵步驟。湖北轉(zhuǎn)染試劑pei
原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖。因此,它們的形態(tài)學和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。 湖北轉(zhuǎn)染試劑pei
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