上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑哪種好

來源: 發(fā)布時間:2023-02-23

LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉(zhuǎn)染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。用于基因編輯的RNP轉(zhuǎn)染試劑.上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑哪種好

基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑,其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應形成磷酸鈣-DNA復合物,粘附到細胞膜表面,借助內(nèi)吞作用進入細胞質(zhì)。pH值,鈣離子濃度,DNA濃度,沉淀時間,細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結果產(chǎn)生影響,因此實驗條件摸索和優(yōu)化時間較長,且重復性不佳?;谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,借助脂質(zhì)膜將DNA導入細胞膜內(nèi)。目前應用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,DNA并沒有預先包埋在脂質(zhì)體中,而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質(zhì)體上,形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,經(jīng)過內(nèi)吞被導入細胞。此方法操作簡單,重復性好,在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率,但具有一定的細胞毒性,可能會干擾細胞的代謝。且活性受血清影響,需要去除血清。上海常用轉(zhuǎn)染試劑梯度MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.

原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此,它們的形態(tài)學和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細胞,左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA,右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。研發(fā)合成的針對siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉(zhuǎn)染試劑。

原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖。因此,它們的形態(tài)學和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。質(zhì)粒細胞轉(zhuǎn)染步驟是什么?上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑多少錢

正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑哪種好

將膠質(zhì)瘤干細胞(3105)接種至6孔板中,然后使用riboFECTCP轉(zhuǎn)染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉(zhuǎn)染進膠質(zhì)瘤干細胞(DP3321、DP7857)中,48h后,qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率。結果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為46.32%、49.71%和43.64%,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為53.21%、47.46%和46.31%。將1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以產(chǎn)生轉(zhuǎn)染混合物。然后將混合物加入DMEM(siRNA濃度:50nM)中,與原代小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)48h。RT-PCR和westernblot分析檢測轉(zhuǎn)染效率。結果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染TREM-1siRNA后******了OGD誘導的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上調(diào)。上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑哪種好

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