上海Opti-MEM轉(zhuǎn)染試劑作用

來源: 發(fā)布時間:2023-02-22

.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。高靈活應(yīng)用,同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。細(xì)胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標(biāo)準(zhǔn)實驗方法,將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。并更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細(xì)胞,用PBS洗滌3次以上,以備RNA抽提。上海Opti-MEM轉(zhuǎn)染試劑作用

LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉(zhuǎn)染效率,適用于多種細(xì)胞系對細(xì)胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細(xì)胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染效率高,適用于多種細(xì)胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細(xì)胞系,通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率。細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性。DNA轉(zhuǎn)染試劑報價一般會同時設(shè)置對照,對RNAi結(jié)果進(jìn)行比較。RNAi的成功取決于正確導(dǎo)入合適量的siRNA,達(dá)到比較大預(yù)期反應(yīng)。

胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要??!當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好,沒有細(xì)微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦!載體系統(tǒng)在實驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習(xí)慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,質(zhì)粒間比例得當(dāng),并且對質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗證。

siRNA,加入HiperFect轉(zhuǎn)染試劑混勻并溫育5-10min,將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻,培養(yǎng)細(xì)胞直到適當(dāng)?shù)臅r候檢測基因沉默效果。這個快速操作流程簡便到還可以用于“反向轉(zhuǎn)染”,方便至極。當(dāng)然,習(xí)慣用傳統(tǒng)方法也是可以的,只要培養(yǎng)到細(xì)胞匯合度50%—80%進(jìn)行轉(zhuǎn)染就可以了。沒有禁用血清、***的困擾,HiperFect真的是將實驗簡化到了***。適合多種細(xì)胞類型:HiPerfect可高效轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞類型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對于原代細(xì)胞,產(chǎn)品手冊中列出了轉(zhuǎn)染原代HUVEC、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、上皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的操作步驟,貼心該試劑可將RNA導(dǎo)入多種細(xì)胞系,包括原代細(xì)胞和懸浮細(xì)胞.

圖3.用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine3.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進(jìn)行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。高效、靶向敲低在實驗靶標(biāo)中可觀察到高達(dá)85%的敲低效果圖4.使用Invivofectamine3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine3.0試劑與靶向FactorVII(FVII)或PPIBmRNA的siRNA組成的復(fù)合物,以每千克小鼠體重1mg(mg/kg)的注射量進(jìn)行注射,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達(dá)85%的敲低(使用TaqMan分析對敲低進(jìn)行評估)。將20μL轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入孔中的細(xì)胞懸液中,前后移動培養(yǎng)皿,混合均勻;陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑選購

臨床級******毒載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑..上海Opti-MEM轉(zhuǎn)染試劑作用

簡介:X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細(xì)胞(包括昆蟲細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。優(yōu)勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率,對于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細(xì)胞毒性低的試劑,結(jié)果相關(guān)性好.圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高于X-tremeGENEHP,導(dǎo)致存活細(xì)胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò)).上海Opti-MEM轉(zhuǎn)染試劑作用

上海儒安生物科技有限公司是國內(nèi)一家多年來專注從事細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體的老牌企業(yè)。公司位于真南路4268號2幢J1718室,成立于2016-09-20。公司的產(chǎn)品營銷網(wǎng)絡(luò)遍布國內(nèi)各大市場。公司現(xiàn)在主要提供細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體等業(yè)務(wù),從業(yè)人員均有細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體行內(nèi)多年經(jīng)驗。公司員工技術(shù)嫻熟、責(zé)任心強(qiáng)。公司秉承客戶是上帝的原則,急客戶所急,想客戶所想,熱情服務(wù)。公司秉承以人為本,科技創(chuàng)新,市場先導(dǎo),和諧共贏的理念,建立一支由細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體**組成的顧問團(tuán)隊,由經(jīng)驗豐富的技術(shù)人員組成的研發(fā)和應(yīng)用團(tuán)隊。上海儒安生物科技有限公司依托多年來完善的服務(wù)經(jīng)驗、良好的服務(wù)隊伍、完善的服務(wù)網(wǎng)絡(luò)和強(qiáng)大的合作伙伴,目前已經(jīng)得到醫(yī)藥健康行業(yè)內(nèi)客戶認(rèn)可和支持,并贏得長期合作伙伴的信賴。