上海真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑分裝

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-02-20

LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn):高轉(zhuǎn)染效率,適用于多種細(xì)胞系對(duì)細(xì)胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無(wú)需去除細(xì)胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無(wú)需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基1轉(zhuǎn)染效率高,適用于多種細(xì)胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見(jiàn)細(xì)胞系,通過(guò)檢測(cè)GFP信號(hào)比較轉(zhuǎn)染效率。2細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,通過(guò)計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性。原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖.上海真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑分裝

在選擇轉(zhuǎn)染方法時(shí),需考慮您希望輸送的運(yùn)載物(DNA、RNA或蛋白質(zhì))以及您希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型。您可通過(guò)下表選擇各類陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇,讓您可以對(duì)自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類型的細(xì)胞無(wú)毒性作用—您之所以能看到結(jié)果,是因?yàn)楹怂岽嬖冢皇且驗(yàn)樵噭┬枰膬?yōu)化工作更少—針對(duì)大多數(shù)細(xì)胞類型提供了快速、簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)方案連續(xù)細(xì)胞系具有無(wú)限增殖的潛能,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類細(xì)胞經(jīng)歷過(guò)基因改變而變得具有無(wú)限增殖能力,它們?cè)谂囵B(yǎng)過(guò)程中的表現(xiàn)可能無(wú)法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。上海轉(zhuǎn)染試劑質(zhì)粒細(xì)胞轉(zhuǎn)染步驟是什么?

對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA(phRL-CMV)和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟分別轉(zhuǎn)染到CHO細(xì)胞。在轉(zhuǎn)染24小時(shí)后,熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學(xué)發(fā)光監(jiān)測(cè)器測(cè)定;GFP陽(yáng)性細(xì)胞率使用BD公司的FACS檢測(cè)。左圖:LipoD293試劑(升級(jí)版)和Lipofecatmine2000(L2K),TransIT以及Fugene6的價(jià)格比較(美元/1000微升)。所有的價(jià)格是從生產(chǎn)制造商的網(wǎng)站上收集對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒

產(chǎn)生慢***的比較通過(guò)LipoD293?試劑(升級(jí)版)和LipofectamineLTX(LTX)試劑將三個(gè)cDNAs共轉(zhuǎn)染進(jìn)293T細(xì)胞。一個(gè)GFP載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來(lái)測(cè)定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細(xì)胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1微升(上圖)和10微升(下圖)。5天后,細(xì)胞通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞的百分比來(lái)測(cè)定慢***的滴度。由LipoD293?andLTX產(chǎn)生的慢***的滴度被量化,分為是8x10^6和3x10^6tu/ml。轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型可簡(jiǎn)單分為兩大類,連續(xù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源基因如DNA,RNA等導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制細(xì)胞基因功能、實(shí)現(xiàn)基因調(diào)控的常規(guī)工具。市場(chǎng)上各種轉(zhuǎn)染試劑琳瑯滿目,各有千秋,然而沒(méi)有任何一種轉(zhuǎn)染試劑可以能夠適用于所有細(xì)胞種類、滿足所有實(shí)驗(yàn)需求和目的,成分控認(rèn)為轉(zhuǎn)染試劑的成分及作用機(jī)理對(duì)轉(zhuǎn)染效果及細(xì)胞生理作用影響***,是轉(zhuǎn)染試劑選擇的重要依據(jù),選試劑時(shí)要留意成分哦。嚴(yán)格來(lái)講,轉(zhuǎn)染的方法可以基于化學(xué)法、物理法(電穿孔、顯微注射等)以及***介導(dǎo)法,沒(méi)有一種方法是放之四海而皆準(zhǔn)。作為成分控的小編,本次主要為大家介紹基于各類轉(zhuǎn)染試劑的化學(xué)法轉(zhuǎn)染。采用Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí),實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。上海非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑

將EntransterTM-R4000稀釋液和agomir稀釋液充分混合.上海真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑分裝

十全十美難,十全九美卻可以通過(guò)選擇一款好的轉(zhuǎn)染試劑來(lái)實(shí)現(xiàn)。理想的轉(zhuǎn)染試劑包括要具有較高的轉(zhuǎn)染效率,細(xì)胞毒性低,操作簡(jiǎn)單可重復(fù),價(jià)格還要可愛(ài)?,F(xiàn)在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體系列轉(zhuǎn)染試劑,但脂質(zhì)體對(duì)細(xì)胞毒性大,某些細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率還很低,看單孔的價(jià)格也很不美好。尤其是在轉(zhuǎn)染RNA方面,脂質(zhì)體的劣勢(shì)較明顯。QIAGEN在轉(zhuǎn)染試劑領(lǐng)域的研發(fā)思路與其核酸純化領(lǐng)域的精而專,全而深不同。在轉(zhuǎn)染試劑的研發(fā)過(guò)程中,另辟蹊徑,研精致思進(jìn)而做到小而美的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品。從市面上眾多轉(zhuǎn)染試劑的一片紅海中,神奇的開(kāi)辟出一塊藍(lán)海,為客戶烹制出了幾款高效、快速、低毒又親民的轉(zhuǎn)染試劑私房菜。上海真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑分裝

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