胞因素用低代數(shù)的細胞293T細胞非常重要！！當然也要保證細胞狀態(tài)特別好，沒有細微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！載體系統(tǒng)在實驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng)，當然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失，或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習(xí)慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達載體構(gòu)建純化良好，質(zhì)粒間比例得當，并且對質(zhì)粒進行酶切驗證。轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少——siRNA轉(zhuǎn)染試劑.上海動物轉(zhuǎn)染試劑購買
十全十美難，十全九美卻可以通過選擇一款好的轉(zhuǎn)染試劑來實現(xiàn)。理想的轉(zhuǎn)染試劑包括要具有較高的轉(zhuǎn)染效率，細胞毒性低，操作簡單可重復(fù)，價格還要可愛?，F(xiàn)在大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體系列轉(zhuǎn)染試劑，但脂質(zhì)體對細胞毒性大，某些細胞的轉(zhuǎn)染效率還很低，看單孔的價格也很不美好。尤其是在轉(zhuǎn)染RNA方面，脂質(zhì)體的劣勢較明顯。QIAGEN在轉(zhuǎn)染試劑領(lǐng)域的研發(fā)思路與其核酸純化領(lǐng)域的精而專，全而深不同。在轉(zhuǎn)染試劑的研發(fā)過程中，另辟蹊徑，研精致思進而做到小而美的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品。從市面上眾多轉(zhuǎn)染試劑的一片紅海中，神奇的開辟出一塊藍海，為客戶烹制出了幾款高效、快速、低毒又親民的轉(zhuǎn)染試劑私房菜。上海動物轉(zhuǎn)染試劑購買賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品，適用于各種細胞類型的轉(zhuǎn)染。
.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。
高靈活應(yīng)用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。
細胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。
兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。
X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標準實驗方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞,通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。
X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢：1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間，只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作.RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進、高效的siRNA輸送解決方案。
轉(zhuǎn)染 48 小時后，使用尼康熒光顯微鏡 GFP 熒光進行成像（左側(cè)四幅圖），A：LipoD293； B：293fectin；C：Xfect 和 D：Fugene 6. 帶有 6xHis 標記的 GFP 熒光蛋白使用 Ni-NTA 親和柱技術(shù)實現(xiàn)分離。5 微升洗脫液載入 SDS-PAGE 凝膠電泳分離并進行 Coomassie 亮藍染色（右上圖 E），道 1 為 LipoD293293、道 2 為標準蛋白分子、道 3 為 Xfect、道 4 為 293fectin 和道 5 為 Fugene 6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進一步定量（見右下圖 F）。產(chǎn)生慢***的比較
通過 LipoD293? 試劑（升級版）和 Lipofectamine LTX（LTX）試劑將三個 cDNAs 共轉(zhuǎn)染進 293T 細胞。一個 GFP 載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上圖）和 10 微升（下圖）。 帶你了解性價比比較高的轉(zhuǎn)染試劑-PEI轉(zhuǎn)染.上海Opti-MEM轉(zhuǎn)染試劑原理
轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)了更高的有效***細胞/未轉(zhuǎn)染細胞比率，超過其他RNAi試劑。上海動物轉(zhuǎn)染試劑購買
細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑 簡介：
X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2 μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細胞分析的多種實驗。
優(yōu)勢：1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。
2.操作簡便、節(jié)省時間，只需對X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。
3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。 上海動物轉(zhuǎn)染試劑購買
上海儒安生物科技有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè)，技術(shù)力量雄厚。公司是一家有限責任公司企業(yè)，以誠信務(wù)實的創(chuàng)業(yè)精神、專業(yè)的管理團隊、踏實的職工隊伍，努力為廣大用戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品。公司業(yè)務(wù)涵蓋細胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細胞增殖，內(nèi)參抗體，價格合理，品質(zhì)有保證，深受廣大客戶的歡迎。上海儒安生物科技自成立以來，一直堅持走正規(guī)化、專業(yè)化路線，得到了廣大客戶及社會各界的普遍認可與大力支持。