上海昆蟲細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑梯度

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-07-01

圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應(yīng)的敲低現(xiàn)象。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進(jìn)行注射。隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen顯色檢測)。持續(xù)敲低能力在單次注射后可觀察到更長的敲低時(shí)間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應(yīng)。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復(fù)合物后分別以1、0.5、及0.25mg/kg的劑量進(jìn)行注射。在第2、5、9、16、23及30日收集血清,并使用顯色法對(duì)血清進(jìn)行分析以確定FVII蛋白的敲低效果。低毒性我們希望把mRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)入原代細(xì)胞,那**適合的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品就是Lipofectamine MessengerMAX?或是Neon電轉(zhuǎn)儀。上海昆蟲細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑梯度

在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較

圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供

制備大鼠的動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光,以此來評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。

對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞 LNCap 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較


在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較

圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institute)






羅氏轉(zhuǎn)染試劑原理研發(fā)合成的針對(duì)siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉(zhuǎn)染試劑。

確定希望輸送的運(yùn)載物

(如DNA、RNA或蛋白質(zhì))

根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)類型,我們可能需要將不同的運(yùn)載物輸送到細(xì)胞內(nèi)部,包括**常見的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達(dá)蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。正確的了解您希望輸送的運(yùn)載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。

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希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型

轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型可簡單分為兩大類,連續(xù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞。

連續(xù)細(xì)胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類細(xì)胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們?cè)谂囵B(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。


在選擇轉(zhuǎn)染方法時(shí),需考慮您希望輸送的運(yùn)載物(DNA、RNA或蛋白質(zhì))以及您希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型。您可通過下表選擇各類陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。


我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇,讓您可以對(duì)自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類型的細(xì)胞無毒性作用—您之所以能看到結(jié)果,是因?yàn)楹怂岽嬖?,而不是因?yàn)樵噭┬枰膬?yōu)化工作更少—針對(duì)大多數(shù)細(xì)胞類型提供了快速、簡便的實(shí)驗(yàn)方案


連續(xù)細(xì)胞系 具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類細(xì)胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們?cè)谂囵B(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。




用于基因編輯的RNP轉(zhuǎn)染試劑.

胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要!!當(dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好,沒有細(xì)微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦!

載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng),當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時(shí)導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個(gè)部件缺失,或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時(shí)做陰性對(duì)照的習(xí)慣:建議目的基因載體和陰性對(duì)照GFP 載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好,質(zhì)粒間比例得當(dāng),并且對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證. 驚艷登場!臨床級(jí)載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑。真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑配制

MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.上海昆蟲細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑梯度

十全十美難,十全九美卻可以通過選擇一款好的轉(zhuǎn)染試劑來實(shí)現(xiàn)。理想的轉(zhuǎn)染試劑包括要具有較高的轉(zhuǎn)染效率,細(xì)胞毒性低,操作簡單可重復(fù),價(jià)格還要可愛?,F(xiàn)在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體系列轉(zhuǎn)染試劑,但脂質(zhì)體對(duì)細(xì)胞毒性大,某些細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率還很低,看單孔的價(jià)格也很不美好。尤其是在轉(zhuǎn)染RNA方面,脂質(zhì)體的劣勢(shì)較明顯。QIAGEN在轉(zhuǎn)染試劑領(lǐng)域的研發(fā)思路與其核酸純化領(lǐng)域的精而專,全而深不同。在轉(zhuǎn)染試劑的研發(fā)過程中,另辟蹊徑,研精致思進(jìn)而做到小而美的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品。從市面上眾多轉(zhuǎn)染試劑的一片紅海中,神奇的開辟出一塊藍(lán)海,為客戶烹制出了幾款高效、快速、低毒又親民的轉(zhuǎn)染試劑私房菜。上海昆蟲細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑梯度

上海儒安生物科技有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè),技術(shù)力量雄厚。公司致力于為客戶提供安全、質(zhì)量有保證的良好產(chǎn)品及服務(wù),是一家有限責(zé)任公司企業(yè)。公司始終堅(jiān)持客戶需求優(yōu)先的原則,致力于提供高質(zhì)量的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體。上海儒安生物科技將以真誠的服務(wù)、創(chuàng)新的理念、***的產(chǎn)品,為彼此贏得全新的未來!