貼壁細(xì)胞系轉(zhuǎn)染試劑類型

美國(guó)Polysciences公司是一家成立于1961年，致力于特殊技精細(xì)化學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品，單/多聚體等產(chǎn)品的研發(fā)供應(yīng)，所提供的產(chǎn)品服務(wù)于組織學(xué)（顯微技術(shù)）、生物技術(shù)、電子技術(shù)、護(hù)理及制藥工程等多個(gè)領(lǐng)域。起初為電子顯微鏡提供納米級(jí)樣本制備方案，幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域。隨后，開(kāi)拓了在病理（組織研究）應(yīng)用產(chǎn)品，使組織除了石蠟包埋外，還能夠包埋在塑料塊中；開(kāi)發(fā)染料和染色劑，以實(shí)現(xiàn)更好的樣品觀測(cè)方式。與****合作，開(kāi)發(fā)了用于診斷試劑盒應(yīng)的聚合物微球。與美國(guó)國(guó)家**中心合作，開(kāi)發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品，并用于紫杉醇的初步臨床試驗(yàn)。繼而開(kāi)發(fā)出超順磁珠，用于DNA、蛋白質(zhì)和肽的研究。正確的了解您希望輸送的運(yùn)載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。貼壁細(xì)胞系轉(zhuǎn)染試劑類型

LNCap細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代嚴(yán)格由ATCC建議的操作步驟進(jìn)行，與pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共轉(zhuǎn)染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293?試劑（左圖）和FugeneHD（右圖）分別按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測(cè)GFP熒光，以此來(lái)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。在血清和***的存在下，HepG2和SaoS-2細(xì)胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達(dá)到95%的細(xì)胞融合。轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，分別通過(guò)Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測(cè)效率。polviet轉(zhuǎn)染試劑購(gòu)買3.0試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染的每個(gè)個(gè)體間所檢測(cè)的生物標(biāo)志物的水平與未注射該試劑的個(gè)體相比并沒(méi)有***差異。

圖3. 用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得：只需簡(jiǎn)單地混合，并進(jìn)行孵育（30min）、稀釋、及注射即可。

高效、靶向敲低

在實(shí)驗(yàn)靶標(biāo)中可觀察到高達(dá)85%的敲低效果

圖4. 使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實(shí)現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復(fù)合物，以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進(jìn)行注射，**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達(dá)85%的敲低（使用TaqMan分析對(duì)敲低進(jìn)行評(píng)估）。

在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞（原代大鼠動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞）轉(zhuǎn)染效率的比較

圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供

制備大鼠的動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用 LipoD293?試劑（左圖）和 Lipofecatmine 2000（L2K, 右圖）分別將 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后，用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測(cè) GFP 熒光，以此來(lái)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。

對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞 LNCap 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較

圖片由羅斯威爾公園**研究所（Roswell Cancer Institute）的 Lyn Gao 博士友情提供

賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品，適用于各種細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)染。

X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡(jiǎn)介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢(shì)：1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間，只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可)。3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作.轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備完成； 混勻后室溫下孵育15-20分鐘，直接取10μL加入已鋪好細(xì)胞的孔中.國(guó)產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑推薦

MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.貼壁細(xì)胞系轉(zhuǎn)染試劑類型

轉(zhuǎn)染 48 小時(shí)后，使用尼康熒光顯微鏡 GFP 熒光進(jìn)行成像（左側(cè)四幅圖），A：LipoD293； B：293fectin；C：Xfect 和 D：Fugene 6.  帶有 6xHis 標(biāo)記的 GFP 熒光蛋白使用 Ni-NTA 親和柱技術(shù)實(shí)現(xiàn)分離。5 微升洗脫液載入 SDS-PAGE 凝膠電泳分離并進(jìn)行 Coomassie 亮藍(lán)染色（右上圖 E），道 1 為 LipoD293293、道 2 為標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子、道 3 為 Xfect、道 4 為 293fectin 和道 5 為 Fugene 6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進(jìn)一步定量（見(jiàn)右下圖 F）。產(chǎn)生慢***的比較

通過(guò) LipoD293? 試劑（升級(jí)版）和 Lipofectamine LTX（LTX）試劑將三個(gè) cDNAs 共轉(zhuǎn)染進(jìn) 293T 細(xì)胞。一個(gè) GFP 載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來(lái)測(cè)定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細(xì)胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上圖）和 10 微升（下圖）。 貼壁細(xì)胞系轉(zhuǎn)染試劑類型