原代細胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命（即它們是有限細胞系），且隨著傳代的進行，具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說，這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。 隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平（Biophen 顯色檢測）。上海polviet轉(zhuǎn)染試劑配方
簡介：X-tremeGENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細胞系。優(yōu)勢：
1.簡單易用的多組分混合試劑，無動物源性成分，室溫穩(wěn)定。
2.高轉(zhuǎn)染效率，對于原代細胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細胞系有高轉(zhuǎn)染效率。
3.使用細胞毒性低的試劑，結(jié)果相關(guān)性好。
圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENE HP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENE HP，導(dǎo)致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò))。 上海國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑配制誰來拯救我的細胞之QIAGEN轉(zhuǎn)染試劑.
在選擇轉(zhuǎn)染方法時，需考慮您希望輸送的運載物（DNA、RNA或蛋白質(zhì)）以及您希望轉(zhuǎn)染的細胞類型。您可通過下表選擇各類陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。
我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇，讓您可以對自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類型的細胞無毒性作用—您之所以能看到結(jié)果，是因為核酸存在，而不是因為試劑需要的優(yōu)化工作更少—針對大多數(shù)細胞類型提供了快速、簡便的實驗方案
連續(xù)細胞系 具有無限增殖的潛能，通常要比原代或有限細胞更易處理。但由于此類細胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力，它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。
產(chǎn)生慢***的比較
通過 LipoD293? 試劑（升級版）和 Lipofectamine LTX（LTX）試劑將三個 cDNAs 共轉(zhuǎn)染進 293T 細胞。一個 GFP 載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上圖）和 10 微升（下圖）。
5 天后，細胞通過流式細胞儀檢測。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導(dǎo)的細胞的百分比來測定慢***的滴度。由 LipoD293? and LTX 產(chǎn)生的慢***的滴度被量化，分為是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。 包括**常見的DNA，用于基因編輯的siRNA，能夠更快表達蛋白的mRNA，CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。
圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細胞時，實現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細胞毒性。試驗采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間，在維持優(yōu)良的細胞活力的同時，實現(xiàn)了p53基因表達水平的有效敲低.功能多樣簡便的實驗方案，易于針對***的細胞系進行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑，可大幅改善實驗性能，使用微克級的siRNA即可達到高達85%的敲低效果。將EntransterTM-R4000稀釋液和agomir稀釋液充分混合.慢病毒轉(zhuǎn)染試劑多少錢
MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.上海polviet轉(zhuǎn)染試劑配方
對 HepG2 細胞轉(zhuǎn)染效率的比較
右圖：使用以上轉(zhuǎn)染試劑將 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟轉(zhuǎn)染到 HepG2 細胞（在膠原預(yù)處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)）。在轉(zhuǎn)染 48 小時之后，用流式細胞儀檢測 GFP 陽性細胞（%）和熒光強度。
左圖：血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑（升級版）對在 HepG2 細胞的轉(zhuǎn)染效率。通過三種不同的條件下轉(zhuǎn)染 HepG2 細胞（生長在膠原處理的培養(yǎng)皿上）---無血清和***，10% 血清和***的存在，轉(zhuǎn)染 5 小時后換液和不換液。
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