在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較
圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供
制備大鼠的動脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染 24 小時后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光,以此來評價轉(zhuǎn)染效率。
對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞 LNCap 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較
在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較
圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institute)
帶你了解性價比比較高的轉(zhuǎn)染試劑-PEI轉(zhuǎn)染.上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑原理
基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑,帶正電的聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,前者細(xì)胞毒性相對較大,后者細(xì)胞毒性較小,但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細(xì)胞毒性,可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑,不局限于單一成分,混合了不同 配方的脂類(非脂質(zhì)體)、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的 成分,兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細(xì)胞毒性小的優(yōu)勢,且操作更加簡單,易于高通量。上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑原理riboFECT CP轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)用案例,可轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞,靠譜!
基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑,帶正電的聚合物與核酸帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,前者細(xì)胞毒性相對較大,后者細(xì)胞毒性較小,但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染,適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細(xì)胞毒性,可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑,不局限于單一成分,混合了不同配方的脂類(非脂質(zhì)體)、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的成分,兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細(xì)胞毒性小的優(yōu)勢,且操作更加簡單,易于高通量。
用 LipoD293? 體外 DNA 轉(zhuǎn)染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品 Invitrogen 公司的 293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染 pEGFP-C1 質(zhì)粒到 HEK293 細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染 24 小時后,細(xì)胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè))。
對懸浮 HEK293F 產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/
30 毫升的 293F 細(xì)胞分別使用 LipoD293?試劑、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將 pEGFP-6xHis 質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá),用量為 LipoD293? 試劑,20 微克,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用 30 微克質(zhì)粒 DNA。 CycloFect轉(zhuǎn)染試劑,你了解多少?
.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。
2.高靈活應(yīng)用, 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。
3.細(xì)胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。
4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。
圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 pei轉(zhuǎn)染試劑說明書主要內(nèi)容是什么?上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑購買
每孔培養(yǎng)體積均為100μL,細(xì)胞數(shù)目在105左右。上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑原理
在政策促進(jìn)下,未來3—5年內(nèi),我國將在醫(yī)藥健康短缺地區(qū)建設(shè)一批高水平臨床醫(yī)治中心、高層次的人才 培養(yǎng)基地和高水平的科研創(chuàng)新與轉(zhuǎn)化平臺,培育一批品牌優(yōu)勢明顯、跨區(qū)域提供高水平服務(wù)的集團(tuán)。根據(jù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體相關(guān)領(lǐng)域極新技術(shù)發(fā)展趨勢,《2019年本》在鼓勵類條目中新增了新型技術(shù)開發(fā)和應(yīng)用的有關(guān)內(nèi)容。例如,在化學(xué)原料藥領(lǐng)域增加了“連續(xù)反應(yīng)”等技術(shù),在技術(shù)領(lǐng)域增加了“基因醫(yī)治”和“抗體偶聯(lián)”等技術(shù),在藥用包裝材料領(lǐng)域增加了“中性硼硅藥用玻璃”等新型材料與技術(shù)的開發(fā)應(yīng)用,在醫(yī)藥領(lǐng)域增加了“人工智能輔助醫(yī)藥設(shè)備”等新技術(shù)內(nèi)容。自2015年以來,健康科技成為醫(yī)藥健康有限責(zé)任公司增長**快的領(lǐng)域。事實(shí)上,根據(jù)硅谷銀行的分析,有風(fēng)投支持的健康科技行業(yè)募資次數(shù)在這段時間增長了25%,硅谷銀行與其中大約40%的歐美公司進(jìn)行了合作。加之從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),軟件開發(fā),電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),化工產(chǎn)品及原料(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、民用物品、易制毒化學(xué)品)、實(shí)驗(yàn)窒設(shè)備的銷售?!皟善敝啤眽嚎s流通渠道層級,減少中間環(huán)節(jié)層層加價;反商業(yè)賄賂、稅務(wù)改進(jìn)等一系列政策的落地,迫使產(chǎn)業(yè)從不規(guī)范、低水平的商業(yè)化向規(guī)范的、高水平成熟的商業(yè)化進(jìn)化。上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑原理