細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力并更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細胞,用PBS洗滌3次以上,以備RNA抽提。上海懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑分裝
羅氏X-TremeGENE 便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,升級版的多組分混合試劑,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細胞毒性,在超過350株真核細胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗證,尤其針對難轉(zhuǎn)染細胞株亦有出色表現(xiàn)。
兩種試劑對CHO-K1 細胞轉(zhuǎn)染帶GFP標記的質(zhì)粒,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,B和D是明場顯微圖. 與競爭產(chǎn)品比較,X-tremeGENE HP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細胞毒性
不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細胞株進行轉(zhuǎn)染,X-tremeGENE HP 試劑遠優(yōu)于其他試劑
超過350種細胞株的高效轉(zhuǎn)染驗證
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默克自2015年成為羅氏生化試劑的全球***代理,可以提供從細胞培養(yǎng)和功能分析、基因機理研究到蛋白機理研究的完整方案: 上海慢病毒轉(zhuǎn)染試劑哪種好細胞培養(yǎng)系列 | 專為 293T 優(yōu)化的轉(zhuǎn)染試劑 Nano293T.
產(chǎn)生慢***的比較
通過 LipoD293? 試劑(升級版)和 Lipofectamine LTX(LTX)試劑將三個 cDNAs 共轉(zhuǎn)染進 293T 細胞。一個 GFP 載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1 微升(上圖)和 10 微升(下圖)。
5 天后,細胞通過流式細胞儀檢測。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導(dǎo)的細胞的百分比來測定慢***的滴度。由 LipoD293? and LTX 產(chǎn)生的慢***的滴度被量化,分為是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。
在難轉(zhuǎn)染細胞(原代大鼠動脈平滑肌細胞)轉(zhuǎn)染效率的比較
圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供
制備大鼠的動脈平滑肌原代細胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細胞。轉(zhuǎn)染 24 小時后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光,以此來評價轉(zhuǎn)染效率。
對難轉(zhuǎn)染細胞 LNCap 細胞轉(zhuǎn)染效率的比較
在難轉(zhuǎn)染細胞(原代大鼠動脈平滑肌細胞)轉(zhuǎn)染效率的比較
圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institute)
用于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑,還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?.
.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。
2.高靈活應(yīng)用, 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。
3.細胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,確保所觀察到的細胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。
4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。
圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑制作原理是什么?上海pei轉(zhuǎn)染試劑配方
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美國銷售產(chǎn)業(yè)與中國有所不同,和美國相比,中國的產(chǎn)業(yè)仍處于初創(chuàng)期。在經(jīng)濟新常態(tài)下,中國大銷售產(chǎn)業(yè)憑借獨特資源和市場優(yōu)勢,一舉成為資本角逐的重點領(lǐng)域之一。有關(guān)機構(gòu)預(yù)測,中國銷售產(chǎn)業(yè)規(guī)模未來5年年均復(fù)合增長率約為27.26%。如行家預(yù)判,生產(chǎn)型發(fā)展即將步入黃金時代,眾多企業(yè)圍繞醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)、商業(yè)領(lǐng)域及新興的互聯(lián)網(wǎng)醫(yī)藥等領(lǐng)域正在進行廝殺。在我國政策的支持下,在社會資本的推動下以及技術(shù)升級的帶動下,互聯(lián)網(wǎng)巨頭、科技巨頭、地產(chǎn)巨頭等企業(yè)紛紛跨界進入生產(chǎn)型。醫(yī)藥健康方面人才培養(yǎng)體制貧乏,經(jīng)調(diào)查,中國的大學(xué)中把物流管理與醫(yī)藥知識結(jié)合的專業(yè)少之又少,單方面精通的人才對于醫(yī)藥冷鏈物流無法完全勝任,通過調(diào)研冷鏈物流企業(yè),了解到培養(yǎng)物流人員有關(guān)冷鏈物流的相關(guān)知識來勝任冷鏈物流工作的計劃進展緩慢,使得人才成為完善醫(yī)藥健康的重要制約因素。我國經(jīng)濟進入“新常態(tài)”,總體上推動細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體從粗放式增長向注重質(zhì)量、效率方向轉(zhuǎn)變。民間資本的進入也一定程度刺激我國細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體市場活力。社會對健康類產(chǎn)業(yè)的關(guān)注度越來越高,迫切需要對細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體的規(guī)模和結(jié)構(gòu)進行核算。上海懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑分裝