上海核酸轉(zhuǎn)染試劑梯度

來源: 發(fā)布時間:2022-03-01

轉(zhuǎn)染是將外源核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程,是細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的重要工具,也是大部分的生物和分子生物領(lǐng)域的科研黨們繞不開的話題。然而常常聽到的抱怨是"轉(zhuǎn)染效率太低""轉(zhuǎn)染完細(xì)胞全漂了""轉(zhuǎn)染后忘記給細(xì)胞換液了",真所謂辛辛苦苦實驗N多回,一夜回到解放前……眾所周知,影響轉(zhuǎn)染成功的因素非常多,包括細(xì)胞質(zhì)量、核酸質(zhì)量、微生物污染、轉(zhuǎn)染試劑等。各種細(xì)胞使用的轉(zhuǎn)染條件都可能不同,現(xiàn)實中也并沒有一種放之四海而皆準(zhǔn)的方案。轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率,超過其他RNAi試劑。上海核酸轉(zhuǎn)染試劑梯度

細(xì)胞轉(zhuǎn)染如果以上都沒有問題,那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞了,轉(zhuǎn)染效果直接影響著出毒效率,那么一款好的轉(zhuǎn)染試劑在此時就是至關(guān)重要了!在這里給大家推薦一款性價比超高的轉(zhuǎn)染試劑,美國Polysciences家的PEIMAX40K!PEIMAX40K(也稱為游離堿PEI22K)是一種功能強(qiáng)大,值得信賴且經(jīng)濟(jì)高效的瞬時轉(zhuǎn)染試劑。在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中,能在96孔板至100L生物反應(yīng)器范圍內(nèi)提供始終如一高效的基因表達(dá)。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉(zhuǎn)染試劑,以獲得他們所需要的優(yōu)勢。相較于其他類型轉(zhuǎn)染試劑,使用自行制備的PEI轉(zhuǎn)染試劑可以使總轉(zhuǎn)染成本降低高達(dá)40%左右。ThomasM,etal(2005)研究數(shù)據(jù)表明,去乙?;腜EI40000(PolyethylenimineMAX40000)體外質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率提高21倍,小鼠體內(nèi)靶向效率達(dá)到10000倍,隨之肺部特異療效顯示增強(qiáng)1500倍。蛋白轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少——siRNA轉(zhuǎn)染試劑.

在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較

圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護(hù)理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供

制備大鼠的動脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染 24 小時后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光,以此來評價轉(zhuǎn)染效率。

對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞 LNCap 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較


在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動脈平滑肌細(xì)胞)轉(zhuǎn)染效率的比較

圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institute)






超級好用的siRNA和miRNA轉(zhuǎn)染試劑——HiPerFect高效沉默低脫靶:HiPerFect是小RNA轉(zhuǎn)染試劑,這種非脂質(zhì)體的脂質(zhì)分子可以在siRNA低至100pM濃度的條件下轉(zhuǎn)染(推薦濃度是1nM-5nM)。保持高效基因沉默的同時降低脫靶效應(yīng),正是這一產(chǎn)品的精髓所在。除了siRNA,HiPerFect還能夠用于miRNA模擬物和***劑的轉(zhuǎn)染,滿足miRNA功能分析的需要。操作簡單,方便快速:HiperFect轉(zhuǎn)染試劑的方便程度也是***的,甚至***之內(nèi)可以完成再次接種、轉(zhuǎn)染到檢測結(jié)果!這對于高通量反應(yīng)簡直是求之不得的福音:轉(zhuǎn)染前將細(xì)胞按比例接種到24孔培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)基可以是含有***和血清的,在37度培養(yǎng)箱中保溫。pei轉(zhuǎn)染試劑說明書是什么?

圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時,實現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。試驗采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間,在維持優(yōu)良的細(xì)胞活力的同時,實現(xiàn)了p53基因表達(dá)水平的有效敲低.功能多樣簡便的實驗方案,易于針對***的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑,可大幅改善實驗性能,使用微克級的siRNA即可達(dá)到高達(dá)85%的敲低效果。誰來拯救我的細(xì)胞之QIAGEN轉(zhuǎn)染試劑.電轉(zhuǎn)染試劑公司

.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進(jìn)行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。上海核酸轉(zhuǎn)染試劑梯度

Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn)、高效的siRNA輸送解決方案。目前尚無其他siRNA轉(zhuǎn)染試劑能夠在***的細(xì)胞系中(包括常見細(xì)胞類型、干細(xì)胞、原代細(xì)胞以及歷來難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型)提供如此簡便、高效的siRNA輸送效果。

高效

可在低siRNA濃度下獲得優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效果

相對于其他的siRNA轉(zhuǎn)染試劑,Lipofectamine RNAiMAX 轉(zhuǎn)染試劑可以獲得更佳的基因***效果。同在10 nM和1 nM p53 siRNA下,Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率,超過其他RNAi試劑。 上海核酸轉(zhuǎn)染試劑梯度