CCK法的操作步驟（更多內容請見說明書）：實驗一：細胞活性檢測1、在96孔板中接種細胞懸液（100μL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預培養(yǎng)（37℃,5%CO2）。2、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數(shù)）。3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內孵育1-4小時。4、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。5、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時內測定，吸光度不會發(fā)生變化。代謝率低了以后，細胞呼吸減弱，NAD+產生減少，測出的Formazan也會減少。天津cck8細胞增殖數(shù)據(jù)計算
沒有做過MTT實驗，但其實原理及目的都是一樣的（反應機理不一樣）。都說CCK8簡單點而且數(shù)據(jù)更穩(wěn)定，所以就用了這個試劑盒。CCK8的說明書大家一定要認真閱讀，里面很多細節(jié)的問題都有提到。而且說明書里提供的一些關于各種細胞的種板數(shù)都很有參考價值，因為那是反復驗證過的比較好數(shù)值。但無論如何，做這個試驗一定要摸條件。你就算再懶，這個懶不得，否則你都只是在做無用功。以下言論全部以細胞毒性試驗為前提，如果你做的是促進細胞生長的***的藥效實驗那就另當別論了。浙江dmso在cck8的溶劑對照化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基).
CCK法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優(yōu)勢比較檢測方法MTT法XTT法WST-1法CCK法甲臜產物的水溶性差（需加有機溶劑溶解再檢測）好好好產品性狀粉末2瓶溶液溶液1瓶溶液使用方法配成溶液后使用現(xiàn)配現(xiàn)用即開即用即開即用檢測靈敏度高很高很高高檢測時間較長較短較短**短檢測波長560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm細胞毒性高，細胞形態(tài)完全消失很低，細胞形態(tài)不變很低，細胞形態(tài)不變很低，細胞形態(tài)不變試劑穩(wěn)定性一般較差一般很好批量樣品檢測可以非常適合非常適合非常適合便捷程度一般便捷便捷非常便捷
CCK8，即Cell Counting Kit-8，與MTT法的主要區(qū)別如下：一、原理不同1、Cell Counting Kit-8：CCK-8 試劑盒利用了日本同仁化學研究所（Dojindo）開發(fā)的四唑鹽WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)。2、MTT法：其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲臜（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲臜，用酶聯(lián)免疫檢測儀在570nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數(shù)量。在一定細胞數(shù)范圍內，MTT結晶形成的量與細胞數(shù)成正比。科研狗**值錢的就是時間,不能再被CCK8“拖累”了.
CCK8檢測細胞增殖/毒性的方法：
1.將處于對數(shù)生長期的各實驗組細胞胰酶消化后，完全培養(yǎng)基重懸成細胞懸液，并計數(shù)。
2.根據(jù)細胞生長快慢決定鋪板細胞密度（多數(shù)為1000-2000 cell/well），每組3-5重復，每孔100-200μl培養(yǎng)基。根據(jù)實驗設計決定鋪板數(shù)量（如需要檢測5天，則鋪5張96孔板），我們以1000 cell/well，5復孔，200μl培養(yǎng)基，檢測5天為例，各實驗組需要細胞數(shù)量為1000×5×5個細胞，從計數(shù)好的細胞懸液中取出所需的細胞量和完全培養(yǎng)基混勻，**終體積為200×5×5μl。 CCK8的實驗步驟、實驗分組及檢測方法.上海cck8數(shù)據(jù)
對細胞毒性小；6、為1瓶溶液，毋需預制，即開即用。 缺點.天津cck8細胞增殖數(shù)據(jù)計算
細胞增殖-毒性檢測1.在96孔板中配制100ml的細胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預培養(yǎng)24小時(在37℃，5%CO2的條件下)。2.向培養(yǎng)板加入10ml不同濃度的待測物質。3.將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當?shù)臅r間(例如:6,12,24或48小時)。4.向每孔加入10mlCCK-8溶液(注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響O.D值的讀數(shù))。5.將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內孵育1-4小時。6.用酶標儀測定在450nm處的吸光度。7.如果暫時不測定O.D值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入10ml0.1MHCl溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。在24小時內吸光度不會發(fā)生變化。注意：如果待測物質有氧化性或還原性的話，可在加CCK-8之前更換新鮮培養(yǎng)基，去掉***的影響。當然***影響比較小的情況可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入***后的空白吸收即可。天津cck8細胞增殖數(shù)據(jù)計算