避免產(chǎn)生沉淀物1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃,實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。4、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。5、若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。常期存放請將血清保存在-5℃至-2O℃冰箱中凍存,有效期5年。蘇州hyclone血清培養(yǎng)細(xì)胞
血清是指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì),提供和各種生長因子,提供結(jié)合蛋白,提供促接觸和生長因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。
血清類別
胎牛血清、透析型胎牛血清 、天然低IGG胎牛血清 、干細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清特殊用途胎牛血清 、活性炭/葡萄糖處理胎牛血清 、胎牛血清替代物 、小牛血清 、新生牛血清 、加強(qiáng)型小牛血清 、補(bǔ)鐵小牛血清 、成牛血清 、供體馬血清 、兔血清 、雞血清 、豬血清 、馬血清 、其他動物血清 、合成血清替代品。 南通胎牛血清購買牛血清知識大分享內(nèi)容.
血清的保存應(yīng)該注意以下幾點:(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物較好增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補(bǔ)體參與反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用,平滑肌細(xì)胞收縮,肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺,增強(qiáng)吞噬作用,促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化.(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀.
血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學(xué)成分組成,這些化學(xué)成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、***、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或***生長活性是達(dá)到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,但仍存在一些問題。南美特級胎牛血適合細(xì)胞株的保藏及組織***培養(yǎng)、單抗研制、絕大多數(shù)**細(xì)胞.
T細(xì)胞增殖試驗類型 (1) 形態(tài)法:其原則是將外周血液或分離的單個細(xì)胞與適量的植物血凝素(PHA)混合,置37℃培養(yǎng)72h,取培養(yǎng)細(xì)胞作涂片染色鏡檢。據(jù)細(xì)胞的大小、核與胞漿的比例、胞漿的染色性和核結(jié)構(gòu)以及有無核仁等特征,分別計數(shù)淋巴母細(xì)胞、過渡性母細(xì)胞和核有絲分裂相以及成熟的小淋巴細(xì)胞,以**者為轉(zhuǎn)化細(xì)胞,每份標(biāo)本計數(shù)200個細(xì)胞,計算轉(zhuǎn)化率。 (2) 核素法:絕大多數(shù)外周血T細(xì)胞通產(chǎn)處于細(xì)胞周期的G0期,受特異性抗原或促有絲分裂原后,從G0期進(jìn)入G1期,開始合成蛋白質(zhì)、RNA和DNA前體物質(zhì)等,為DNA復(fù)制準(zhǔn)備物質(zhì)基礎(chǔ),然后進(jìn)入S期,細(xì)胞合成DNA量倍增,此時若在培養(yǎng)液中加入3H標(biāo)記的TdR,后者摻入新合成的DNA中,據(jù)摻入的多少推測細(xì)胞增殖程度。內(nèi)***含量低;(內(nèi)***:≤3EU/ml).吉林capricorn血清試劑
上海儒安生物科技的血清好嗎?蘇州hyclone血清培養(yǎng)細(xì)胞
無血清細(xì)胞凍存液的操作規(guī)范:  1、培養(yǎng)細(xì)胞至對數(shù)生長晚期,顯微鏡觀察其外觀、形態(tài)、有無污染等。選擇狀態(tài)良好的細(xì)胞進(jìn)行凍存操作(注:貼壁生長細(xì)胞,用胰蛋白酶消化并用完全培養(yǎng)基終止消化,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù);懸浮生長細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù))。  2、500~1000g離心5min,棄上清。  3、加入適量的細(xì)胞凍存液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1~10×106/ml,置于凍存管中密閉。  4、采取逐級降溫保存:4℃放置20min,-20℃放置30min,-70℃過夜,***置于液氮罐中長期存儲。  注意:  務(wù)必超凈工作臺內(nèi)無菌操作,避免污染。  雜交瘤細(xì)胞凍存時應(yīng)定期復(fù)蘇,以檢查細(xì)胞的活性和分泌抗體的穩(wěn)定性。蘇州hyclone血清培養(yǎng)細(xì)胞