有研究人員通過不同年齡段的牛血清在不同濃度下對SP2/0細(xì)胞株培養(yǎng)效果的比較試驗(yàn),用較大增殖濃度、倍增時間、克隆率等指標(biāo)來推斷樣品血清的**年齡段,其結(jié)果如下:SP2/0細(xì)胞株為鼠骨髓瘤細(xì)胞。首先,研究人員在無菌條件下,將7個供試血清μm過濾除菌,然后將供試血清按10%、8%、6%、4%、2%的濃度分別加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細(xì)胞懸液中使細(xì)胞濃度為1×104/ml。充分混勻后在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中每孔接種,每個試驗(yàn)樣接種8孔。每24h記數(shù)一孔,共記數(shù)7d。研究人員又將供試血清按8%的血清濃度加到MEM培養(yǎng)基稀釋好的細(xì)胞懸液中,將SP2/0細(xì)胞稀釋到5個/mL,分別接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,每孔,每個供試血清樣品接種48孔。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用;南通gibco南美血清igg
血清作用知多少?
瀏覽次數(shù):79我們都知道血清可以促進(jìn)細(xì)胞的生長,提供營養(yǎng)物質(zhì),但你知道血清具體的作用嗎,如果你不知道,那就快來看看小編的分享吧。
提供基本營養(yǎng)物質(zhì),如氨基酸、維生素、無機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長必須的物質(zhì);
提供各種生長因子,如胰島素、氫化可的松、、雌二醇、睪酮、孕酮、成纖維細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等;
提供結(jié)合蛋白,可攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵,在細(xì)胞代謝過程中起重要作用;
血清能提供促接觸和伸展因子,使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷,對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用;
能夠維持培養(yǎng)基的pH 值,起酸堿緩沖液作用;
有一些細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,現(xiàn)在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因?yàn)橐鹊鞍酌敢呀?jīng)被很廣的用于貼壁細(xì)胞的消化傳代;
血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用;
血清還含有一些微量元素和離子,它們在代謝穩(wěn)定中起重要作用。 西安透析血清供應(yīng)·細(xì)胞生長(快)曲線峰值:1.6×106.
解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃,實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙枞^濾膜。
細(xì)胞增殖是生物體的重要生命特征,細(xì)胞以分裂的方式進(jìn)行增殖。單細(xì)胞生物,以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的個體。多細(xì)胞生物,以細(xì)胞分裂的方式產(chǎn)生新的細(xì)胞,用來補(bǔ)充體內(nèi)衰老或死亡的細(xì)胞。
多細(xì)胞生物可以由一個受精卵,經(jīng)過細(xì)胞的分裂和分化,較終發(fā)育成一個新的多細(xì)胞個體。必須強(qiáng)調(diào)指出,通過細(xì)胞分裂,可以將復(fù)制的遺傳物質(zhì),平均地分配到兩個子細(xì)胞中去??梢姡?xì)胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖和遺傳的基礎(chǔ)。
細(xì)胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。其中EdU檢測方法是***的細(xì)胞增殖檢測方法。
EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時期代替T滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)檢測DNA復(fù)制活性,通過檢測EdU標(biāo)記便能準(zhǔn)確地反映細(xì)胞的增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細(xì)胞和**水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。
血清提供結(jié)合蛋白,可攜帶重要的低分子量物質(zhì).
血清保存方法應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。
如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
***:血清的成份可能有幾百種之多,對其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、***和脂類等尚未充分認(rèn)識,這給研究工作帶來許多困難;
第二:血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制;
第三:不能排除血清中含有易變物質(zhì),這被認(rèn)為是“瓶中惡化”的原因之
內(nèi)***含量低;(內(nèi)***:≤3EU/ml).武漢進(jìn)口血清進(jìn)口
新配方百白破混合制劑接種反應(yīng)較低,血清學(xué)效果也較好.南通gibco南美血清igg
無血清快速細(xì)胞凍存液 使用方法:  1.收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞,離心去除上清液;  2.加入適量的細(xì)胞凍存液于離心管中,調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度至1~5×106/ml;  3.將加有凍存液的細(xì)胞混合液分裝至凍存管中;建議沒管1ml或1.5ml  4.將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱中冷凍保存;  5.-80℃冰箱過夜冷凍后,將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮罐中長期貯存。  1.請選擇對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行凍存;   2.凍存液加入細(xì)胞后,請盡快放入-80℃冰箱凍存;  3.若需長期凍存細(xì)胞,請轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存;  免責(zé)聲明:本公司將不為任何不正常使用此產(chǎn)品時所發(fā)生的意外負(fù)責(zé)。  儲存條件  2-8℃保存。注意事項(xiàng):1、本產(chǎn)品經(jīng)過思除圍,便用時應(yīng)注意無菌操作,避免污染;2、本產(chǎn)品用于科研或進(jìn)一步研究使用。南通gibco南美血清igg