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抗體的功能與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。同一抗體的V區(qū)和C區(qū)的氨基酸組成和順序的不同,決定了其功能上的差異。不同抗體的V區(qū)和C區(qū)在結(jié)構(gòu)變化上具有一定的規(guī)律,又使得其在功能上存在共性。V區(qū)和C區(qū)的組成和結(jié)構(gòu),決定了抗體的生物學(xué)功能。識別并特異性結(jié)合抗原是抗體的主要功能,執(zhí)行該功能的結(jié)構(gòu)是抗體的V區(qū),其中CDR部位在識別和結(jié)合特異性抗原中起決定性作用。抗體有單體、二聚體和五聚體,因此結(jié)合抗原表位的數(shù)目也不相同??贵w結(jié)合抗原表位的個數(shù)稱為抗原結(jié)合價。不同的抗體可以針對不同的病原體,形成免疫記憶以應(yīng)對未來的傳染。山東單克隆抗體供應(yīng)商
抗體可變區(qū):重鏈和輕鏈的V區(qū)分別稱為VH和VL。VH和VL中各含有3個氨基酸組成和排列順序高度可變的區(qū)域,稱為高變區(qū)(hypervariable region,HVR)或互補決定區(qū)(complementarity determining region,CDR), 包括HVR1(CDR1)、HVR2(CDR2)和HVR3(CDR3),其中,HVR3(CDR3)變化程度更高。VH的3個高變區(qū)分別位于29~31、49~58和95~102位氨基酸,而VL的3個高變區(qū)分別位于28~35、49~56和91~98位氨基酸。VH和VL的3個CDR共同組成Ig的抗原結(jié)合部位(antigen-binding site),決定抗體的特異性,是抗體識別及結(jié)合抗原的部位。在V區(qū)中,CDR之外區(qū)域的氨基酸組成和排列順序相對保守,稱為骨架區(qū)(framework region,F(xiàn)R)。VH或VL各有四個骨架區(qū),分別用FR1、FR2、FR3和FR4表示。安徽異種抗體價格抗體的半衰期較長,可以在體內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用,保持免疫防御的持久性。
抗體規(guī)律:凡能產(chǎn)生抗體的高等動物(包括人類),當(dāng)注入胸腺依賴性抗原(TD抗原)進行免疫時都有著相同產(chǎn)生抗體的規(guī)律,即存在初次免疫應(yīng)答(primary immune response)和再次免疫應(yīng)答(secondary immune response)。初次免疫應(yīng)答是指機體初次接觸某種抗原物質(zhì)引起特異性抗體產(chǎn)生的過程。其特點是潛伏期長(一周以上),產(chǎn)生的抗體滴度(效價)低、維持的時間短,產(chǎn)生的抗體以IgM為主;再次免疫應(yīng)答是指機體以后再次接觸同樣的抗原后所產(chǎn)生的抗體應(yīng)答過程。其特點是產(chǎn)生抗體的潛伏期短、抗體滴度高,維持的時問長,產(chǎn)生的抗體以IgG為主。非胸腺依賴性抗原(TI抗原)引起的體液免疫由于不產(chǎn)生記憶細胞,因此只有初次免疫應(yīng)答,沒有再次免疫應(yīng)答。
單克隆抗體是由單一B細胞克隆產(chǎn)生的高度均一、只針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術(shù)是在細胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養(yǎng)成細胞群,可制備針對一種抗原表位的特異性抗體,即單克隆抗體。單克隆抗體是人工制備的雜交瘤細胞生產(chǎn)的,雜交瘤細胞是由一個經(jīng)抗原啟動后的B細胞與一個骨髓瘤細胞融合形成。單克隆抗體優(yōu)點:純度高,靈敏度高,特異性強,交叉反應(yīng)少,制備的成本低。缺點:對技術(shù)有一定的要求,而且通過抗原的化學(xué)處理很容易丟失表位。單克隆抗體可用于針對惡性癥細胞的免疫調(diào)理。
單克隆抗體的大量制備主要采用動物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法。(1)體內(nèi)誘生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進行預(yù)處理。1-2周后,腹腔內(nèi)接種雜交瘤細胞。雜交瘤細胞在小鼠腹腔內(nèi)增殖,并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。(2)體外培養(yǎng)法將雜交瘤細胞置于培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,雜交瘤細胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體,收集培養(yǎng)上清液,離心去除細胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產(chǎn)生的抗體量有限。各種新型培養(yǎng)技術(shù)和裝置不斷出現(xiàn),極大提高了抗體的生產(chǎn)量。單克隆抗體的研究有助于解決藥物抗性的問題。安徽異種抗體價格
抗體能識別特定外來物的一個獨特特征,該外來目標被稱為抗原。山東單克隆抗體供應(yīng)商
免疫動物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細胞的 過程。 一般選用6-8周齡雌性BALB/c小鼠,按照預(yù)先制定的免疫方案進行免疫注射。 抗原通過血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進入外周免疫部位,刺激相應(yīng)B淋巴細胞克隆,使其活化、增殖,并分化成為致敏B淋巴細胞。細胞融合采用二氧化碳氣體處死小鼠,無菌操作取出脾臟,在平皿內(nèi)擠壓研磨,制備脾細胞懸液。 將準備好的同系骨髓瘤細胞與小鼠脾細胞按一定比例混合,并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各種淋巴細胞可與骨髓瘤細胞發(fā)生融合,形成雜交瘤細胞。山東單克隆抗體供應(yīng)商