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多克隆抗體是由異源抗原(大分子抗原、半抗原偶聯(lián)物)刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng),有機(jī)體漿細(xì)胞分泌的一組免疫球蛋白。多克隆抗體由于其可識別多個抗原表位、可引起沉淀反應(yīng),制備時間短,成本低的原因廣泛應(yīng)用于研究和診斷方面??梢宰鳛榭乖奈镔|(zhì)有很多種,一般的科研實驗中,經(jīng)常使用的抗原有:偶聯(lián)多肽、偶聯(lián)的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。對可溶性抗原而言,為了增強(qiáng)其免疫原性或改變免疫反應(yīng)的類型、節(jié)約抗原等目的,常采用加佐劑的方法以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫應(yīng)答??贵w療法是一種利用人工合成的抗體來調(diào)理疾病的新興療法。湖北IgA抗體研發(fā)制造
多克隆抗體免疫動物:供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類,常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來決定,也與抗原的性質(zhì)有關(guān)。如要獲得大量的抗體,多采用大動物;如要是獲得直接標(biāo)記診斷的抗體,則直接采用本動物;如要獲得間接的標(biāo)記診斷用抗體,則必須用異源動物制備抗體;如果難以獲得的抗原,且抗體的需要量少,則可以采用純系小鼠制備;一般實驗室采用的抗體,多用兔和羊制備。免疫用的動物建議選擇適齡的健康雄性動物,雌性動物特別是妊娠動物用于制備免疫抗體則非常不合適,有時甚至不產(chǎn)生抗體。廣東異嗜性抗體研發(fā)團(tuán)隊抗體工程可以通過改變抗體的結(jié)構(gòu)和特性來提高其療效和穩(wěn)定性。
隨后,經(jīng)1968年和1972年的世界衛(wèi)生組織和國際免疫學(xué)會聯(lián)合會討論決定,將具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白統(tǒng)一命名為免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig可分為分泌型Ig(secreted Ig,SIg)和膜型Ig(membrane Ig,mIg)。SIg主要存在于血液和組織液中,行使抗體的各種功能;mIg主要構(gòu)成B細(xì)胞膜表面的抗原受體。基本結(jié)構(gòu):經(jīng)x線晶體衍射結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數(shù)量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型結(jié)構(gòu),稱為Ig單體,是構(gòu)成抗體的基本單位。
多克隆抗體主要從動物免疫血清、恢復(fù)期患者血清或免疫接種人群的血清中獲得。多克隆抗體的優(yōu)勢是:作用全方面,具有中和抗原、免疫調(diào)理、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且來源普遍、制備簡單。其缺點是:特異性不高、易發(fā)生交叉反應(yīng),不易大量制備,因而限制了其應(yīng)用的范圍。單克隆抗體解決多克隆抗體特異性不高的理想方法是制備識別單一表位特異性的抗體。如果能獲得只針對單一表位的漿細(xì)胞克隆,并使其在體外擴(kuò)增分泌抗體,就有可能獲得單一表位特異性的抗體。然而,漿細(xì)胞在體外的壽命較短,難以培養(yǎng)。為克服這一缺點,Kohler和Milstein將可產(chǎn)生特異性抗體但短壽的B細(xì)胞與不產(chǎn)生抗體但長壽的骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得了可以產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,從而建立了單克隆抗體制備技術(shù)。不同的抗體可以針對不同的病原體,形成免疫記憶以應(yīng)對未來的傳染。
凡能產(chǎn)生抗體的高等動物(包括人類),當(dāng)注入胸腺依賴性抗原(TD抗原)進(jìn)行免疫時都有著相同產(chǎn)生抗體的規(guī)律,即存在初次免疫應(yīng)答(primary immune response)和再次免疫應(yīng)答(secondary immune response)。初次免疫應(yīng)答是指機(jī)體初次接觸某種抗原物質(zhì)引起特異性抗體產(chǎn)生的過程。其特點是潛伏期長(一周以上),產(chǎn)生的抗體滴度(效價)低、維持的時間短,產(chǎn)生的抗體以IgM為主;再次免疫應(yīng)答是指機(jī)體以后再次接觸同樣的抗原后所產(chǎn)生的抗體應(yīng)答過程。其特點是產(chǎn)生抗體的潛伏期短、抗體滴度高,維持的時問長,產(chǎn)生的抗體以IgG為主。人體可以通過傳染疾病或接種疫苗來產(chǎn)生特定的抗體。廣東異嗜性抗體研發(fā)團(tuán)隊
抗體通過結(jié)合病原體的特定部位來阻止其進(jìn)一步傳染人體細(xì)胞。湖北IgA抗體研發(fā)制造
抗體的多樣性:人血清中的抗體多種多樣,B淋巴細(xì)胞可產(chǎn)生的抗體種類在108以上,可與眾多不同抗原發(fā)生特異性結(jié)合。每種基因片段是以多拷貝的形式存在,其中編碼重鏈V區(qū)的VH、DH和JH的基因片段數(shù)分別為50、23和6個;編碼K輕鏈V區(qū)的Vx和JK基因片段數(shù)分別為60和5個,編碼入輕鏈V區(qū)的VX和J入基因片段數(shù)分別為30和7個。這些基因在胚系階段以分隔的形式存在。在B細(xì)胞的分化發(fā)育過程中,這些基因片段發(fā)生重排和組合,從而產(chǎn)生數(shù)量巨大、能識別特異性抗原的BCR。每種具有特異性BCR的B細(xì)胞克隆可識別相應(yīng)的抗原,產(chǎn)生一種特異性抗體。Ig基因重組是B細(xì)胞合成無數(shù)特異性抗體的主要原因。湖北IgA抗體研發(fā)制造