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所以在翻譯時(shí),帶著不同氨基酸的各個(gè)tRNA就能準(zhǔn)確地在mRNA分子上“對(duì)號(hào)入座”,依次與典密碼相合,這就保證了氨基酸能排列成一定的順序。[6]tRNA上的反密碼當(dāng)然應(yīng)能識(shí)別mRNA上相應(yīng)的、互補(bǔ)的密碼,并與之配對(duì)。然而用提純的tRNA來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),發(fā)現(xiàn)一種tRNA能夠識(shí)別幾種密碼。例如,丙氨酸t(yī)RNA,其反密碼為IGC(5′>3′),可以識(shí)別三種密碼。[6]rRNArRNA與多種蛋白質(zhì)分子共同構(gòu)成**白體。**白體相當(dāng)于“裝配機(jī)”,能促使tRNA所攜帶的氨基?;s合成肽。**白體附著在mRNA上,并沿著mRNA長(zhǎng)鏈的起始信號(hào)向終止信號(hào)移動(dòng)。至于rRNA在蛋白質(zhì)生物合成中的具體作用還不清楚RNA測(cè)試需要簽合同嗎?上海哪家做RNA定量PCR試劑盒
[6]必需指出:①在mRNA整個(gè)分子中,從起始信號(hào)直至終止信號(hào),其密碼的三聯(lián)體是連續(xù)的,密碼與密碼之間沒有間隔的核苷酸;②起始信號(hào)AUG并非是mRNA的起始(5′端),而可以和5′端間隔若干個(gè)核苷酸;而且終止信號(hào)也不在mRNA的3′端。[6]tRNA作為“搬運(yùn)工具”的tRNA有很多種,體內(nèi)20種氨基酸都有其自已特有的tRNA,所以,tRNA的種類不少于20種。tRNA在ATP供應(yīng)能量和酶的作用下,可分別與特定的氨基酸結(jié)合。每個(gè)tRNA都有一個(gè)由三個(gè)核苷酸編成的“反密碼”。這個(gè)反密碼可以根據(jù)堿基配對(duì)的原則與mRNA上對(duì)應(yīng)的密碼配對(duì),而且只有當(dāng)反密碼與mRNA上的密碼相對(duì)應(yīng)時(shí)才能配合,否則就“格格不入”。 無錫做RNA服務(wù)RNA檢測(cè)的安全性如何保障?
翌科生物siRNA產(chǎn)品使用說明常規(guī)化學(xué)合成siRNA為21~23nt的雙鏈的小分子RNA,產(chǎn)品為凍干粉形式的即用型試劑。運(yùn)輸保存:產(chǎn)品以凍干粉的形式常溫運(yùn)輸,收到產(chǎn)品后,請(qǐng)于-20℃~-80℃保存,凍干粉可以穩(wěn)定保存2年。使用前瞬時(shí)離心,用RNase-freeH2O或滅菌ddH2O配制成20ul儲(chǔ)存液,分裝保存,避免反復(fù)凍融(不超過5次)。使用須知:1)siRNA呈輕干膜狀附在管壁上,打開管子請(qǐng)先離心,溶解時(shí)請(qǐng)加足量RNase-freeH2O或滅菌ddH2O后蓋上管蓋,震蕩溶解。2)避免外界因素(包括酶,極端PH或者溫度條件等)導(dǎo)致產(chǎn)品降解,所有操作請(qǐng)嚴(yán)格遵循RNA操作規(guī)則。實(shí)驗(yàn)過程中,產(chǎn)品更好干冰上放置,使用完畢后請(qǐng)于-20℃~-80℃保存。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方法為了降低細(xì)胞密度,試劑使用量,轉(zhuǎn)染效率等因素導(dǎo)致的空間差異,保證實(shí)驗(yàn)的可靠性和可重復(fù)性建議:1)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)中每個(gè)轉(zhuǎn)染樣品至少設(shè)置3個(gè)復(fù)孔;2)接種細(xì)胞量盡量保持一致,細(xì)胞在空中呈平均分布。1.轉(zhuǎn)染濃度1)為獲得更佳基因阻斷效果,每種細(xì)胞系轉(zhuǎn)染siRNA的量需要經(jīng)過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。如果您是***次轉(zhuǎn)染細(xì)胞,推薦使用幾個(gè)lipofectamineTM2000的濃度。并在20-100nM范圍內(nèi)改變siRNA的濃度,以確定更佳的阻斷效果。高濃度的siRNA可能具有細(xì)胞系依賴性。
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