熒光素也就是FDAFDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低,因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀。熒光素的激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和530nm。熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,其中更有代表性的是一種學名為Photinuspyralis的螢火蟲體內的熒光素酶。在相應化學反應中,熒光的產生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有熒光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應的速率非常慢,而鈣離子的存在常??梢赃M一步加速反應(與肌肉收縮的情況相似)。[1]熒光生成反應通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有越10%的能量被轉化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產生熒光的底物和其對應的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應。D-熒光素鉀鹽找南京翌科生物科技有限公司怎么樣?無錫熒光素D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存
或分裝于-20℃避光保存,避免反復凍融。2)用預熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3)去除細胞培養(yǎng)基。4)待圖像分析前,向細胞內添加熒光素工作液,37℃孵育5-10min,然后進行圖像分析。2.***成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液,混勻。2)用μm濾膜過濾除菌。立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復凍融。3)腹腔注射(.),按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射。4)注射入體內10-15min(待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期)后進行成像分析。注:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin)只只是不同公司在命名上的差異,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylicacid。2)注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3)如果要進行ATP的檢測,盡量避免外源ATP的污染,如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,在進行熒光素的溶解時應使用ATP-free無菌水。鎮(zhèn)江熒光素酶編碼基因D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存熒光素酶作用下的D-熒光素鉀鹽。
可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進行半衰期為一小時的“輝光型”信號在大量檢測板之間提供一致的信號與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑(Renillareniformis)分離的36kDa蛋白。與螢火蟲熒光素酶相比,海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,產生480nm的藍光。與螢火蟲螢光素酶類似,海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒(#AAT-12535)提供了一種快速,靈敏的方法,可以使用專有的發(fā)光配方在基于細胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,與海腎螢光素酶相互作用后,該試劑產生具有強光的產物。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點:該測定法與標準細胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達或基因表達每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分各類螢光素酶底物,輔因子和物理特性:近幾十年來,腺苷三磷酸(ATP)生物發(fā)光技術得到了很大的發(fā)展,已經在細胞增殖、細胞毒性和生物量計數等方面廣泛應用。
2)按10μL/g體重的濃度向每支小鼠注射相應量的15mg/mL熒光素溶液;3)腹腔注射10-15min后進行成像分析。(對每只動物模型做熒光素動力學研究以確定峰值信號獲取時間)Firefly,freeacid/D-螢火蟲熒光素分子式:C11H8N2O3S2分子量:g/mol外觀:白色至淺黃色粉末溶解:,形成近乎無色至淺黃色的清夜保存:-15°C避光應用:1)活細胞、組織或生物體內luc標記基因和熒光素酶-融合基因體內/體外表達的成像分析;2)***用于報告基因分析,免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測。目前有三種產品形式:D-熒光素(游離酸),D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽)。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液,可溶于甲醇和DMSO;后者易溶于水或緩沖液中,使用方便,溶劑d0926aa8-0148-40da-80fa-f65性,特別適合體內實驗。配成溶液后的這三種產品,在絕大多數的應用上都沒有實質性的差別。相關列表魯米諾/3-氨基苯二甲酰肼/發(fā)光氨異魯米諾/4-氨基鄰苯二甲酰肼吖啶酯DMAE-NHS吖啶酰肼NSP-SA-ADH吖啶酯ME-DMAE-NHS哌嗪-N,N'-二。D-熒光素鉀鹽找南京翌科生物科技有限公司。
附錄ⅧB),與標準硫酸鉀溶液制成的對照液比較,不得更濃()。干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,減失重量不得過%(附錄ⅧL)。鋅鹽取本品,加氯化鈉的飽和水溶液10ml溶解后,加稀鹽酸2ml,搖勻,濾過,濾液中加亞鐵**鉀試液1ml,不得發(fā)生渾濁。5鑒別方法編輯(1)取本品的水溶液(1→2000)1滴,點于濾紙上,即生成黃色斑點,趁濕置溴蒸氣中,1分鐘后再使與氨蒸氣接觸,斑點即變?yōu)樯罘奂t色。(2)本品的水溶液顯強烈的熒光,用大量的水稀釋后仍極明顯;但加酸使成酸性后,熒光即消失;再加堿使成堿性,熒光又顯出。(3)本品熾灼灰化后顯鈉鹽的鑒別反應(附錄Ⅲ)。6含量測定編輯取本品約,精密稱定,加水20ml溶解后,加稀鹽酸5ml使熒光素析出,用丁醇-氯仿(1:1)提取4次,每次20ml,合并提取液,用水10ml洗滌,洗液再用異丁醇-氯仿(1:1)5ml振搖提取,合并提取液,置105℃恒重的容器中,在水浴上通風蒸發(fā)至干,殘渣用乙醇10ml溶解后,再置水浴上蒸干,并在105℃干燥至恒重,精密稱定,殘渣重量與相乘,即得供試量中含有C20H10Na2O5的重量。熒光素鈉是一種有機化合物,分子式為C20H10Na2O5,橙紅色粉末,無氣味,有吸濕性;易溶于水,溶液呈黃紅色,并帶極強的黃綠色熒光。南京翌科生物科技有限公司D-熒光素鉀鹽測試價格。x熒光硫含量標準物質
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