通過開發(fā)新的方法來改變螢火蟲螢光素酶檢測的信號動力學,例如Bright-Glo?、Steady-Glo?和Dual-Glo?允許使用微孔板進行檢測。而“加樣-讀數”的形式簡化了樣品處理,并實現了在非常高通量的應用中使用報告基因檢測。[1]隨著UltraGlo?螢光素酶的發(fā)展,現在已經實現了“加樣-讀數”的ATP檢測方法。ATP是細胞健康的重要指標,這使得CellTiter-Glo?能有效測定細胞活力,尤其是在高通量應用中。該檢測原理還促進了其它ATP檢測平臺的誕生,尤其是用于研究ATP酶(如激酶)的Kinase-Glo?(2004年)和ADP-Glo?(2009年)酶檢測系統。[1]2003Caspase-Glo?3/7檢測除了可以利用螢火蟲螢光素酶反應測定樣品中螢光素酶或ATP的含量外,還可以檢測底物(luciferin)濃度的變化。通過將luciferin與可被不同酶類識別并產生反應的保護基團偶聯,能對這些酶進行靈敏的“加樣-讀數”檢測,如半胱天冬酶(caspase)和其它蛋白酶。[1]2007One-Glo?螢光素酶檢測系統隨著對螢火蟲螢光素酶化學反應的進一步了解以及Promega生物學家和化學家團隊的建立,一種改進的luciferin面世,能更好地用于典型的報告基因檢測應用。這種新的底物——fluoroluciferin。D-熒光素鉀鹽測試適用范圍包括哪些?鹽城游離酸D-熒光素鉀鹽活題成像
熒光素酶(Luciferase)是自然界中能夠催化熒光素產生生物發(fā)光的酶的統稱,其中**有7a70d2e3-5dda-4f49-84be-c6的是來自螢火蟲體內(Fire?y)和海腎(Renilla)體內的兩類螢光素酶,分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase,同時近年來研究得較多的來源于高斯氏菌的高斯熒光素酶(Gaussluciferase)。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應用于啟動子轉錄活性調控及miRNA靶基因驗證等方向研究。螢火蟲螢光素酶**通用和**常見的報告基因是北美螢火蟲photinuspyralis的熒光素酶,該蛋白質不需要翻譯后修飾即可獲得酶活性。高濃度(體內)甚至沒有毒性,可用于原核和真核細胞。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒(12518)使用無DTT**配方來定量活細胞和細胞提取物中的螢光素酶活性。該測定基于螢火蟲熒光素酶,螢火蟲熒光素酶是一種單體的61kD酶,可催化熒光素的兩步氧化,在560nm處產生光。Amplite?螢光素酶報告基因檢測試劑盒特點:具有優(yōu)化的“混合讀取”測定規(guī)程,可與HTS液體處理儀器兼容具有高靈敏度。南通專業(yè)做D-熒光素鉀鹽試劑南京D-熒光素鉀鹽測試公司有哪幾家。
luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有越10%的能量被轉化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。分析熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產生熒光的底物和其對應的酶的統稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusoleariu')或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物,而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關昆蟲)則有更多,因此它們的熒光素酶對于分子系統學研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyrali')。應用熒光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實驗。
在食品衛(wèi)生領域由于ATP生物發(fā)光技術無需培養(yǎng)過程,操作簡便、靈敏度高,數分鐘內可得到結果,具有其它微生物檢測方法無法比擬的優(yōu)勢,是目前檢測微生物更快的方法。熒光素是更受歡迎的多功能生物熒光底物之一。在螢火蟲和幾種其它甲蟲中發(fā)現了螢火蟲熒光酶/熒光素。通過中間體dioxetanone介導作用,熒光素酶氧化ATPji活的熒光素。螢火蟲熒光素酶在ATP的輔助下氧化熒光素產生熒光。這個反應發(fā)生的幾秒內在560nm處的化學熒光達到更高峰,當熒光素和ATP都超量存在的條件下,發(fā)射光與熒光素酶的活性成比例關系。螢火蟲熒光素酶很早以前就用于與抗體結合形成偶聯物,作為免疫分析中用熒光素作為底物進行檢測的標簽。與HRP和堿性磷酸酶相比,熒光素酶不耐化學修飾。這個酶的一個特殊的優(yōu)點是,除了高靈敏度外,在哺乳動物組織中內源性熒光素酶的活性很低。熒光素酶另一個重要的作用是用于衛(wèi)生監(jiān)測。熒光素酶/熒光素系統可用于檢測污染,因為產生熒光所需的ATP存在于所以活ti生物中。這種類型的ATP生物熒光特性足以保證對食品表面的檢測,無論是在加工制作工程中設備的污染還是產品的污染都能檢出。D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物。D-熒光素鉀鹽測試方法是體外生物發(fā)光檢測。
從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或藥物的***功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響,根據生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。,PotassiumSalt/D-熒光素鉀鹽分子式:NaC11H7N2O3S2·H2O分子量:g/mol純度:高級純()應用:1)活細胞、組織或生物體內luc標記基因和熒光素酶-融合基因體內/體外表達的成像分析;2)***用于報告基因分析,免疫分析和ATP熒光衛(wèi)生監(jiān)測分析;Protocol1:InVitroBioluminescentAssays/體外生物發(fā)光檢測1)配制成100mM的儲存液(200×,濃度30mg/ml)?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b后-20℃凍存。2)用預熱好的組織培養(yǎng)基1∶200稀釋儲存液,配制工作液(終濃度150μg/mL)。3)去除培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基直至無殘留。4)圖像分析前立即向細胞內添加1×熒光素工作液,然后進行圖像分析(或者細胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強信號)。D-熒光素鉀鹽注:螢光素、螢光素酶、螢火蟲螢光素酶、螢光素鉀鹽、螢光素鉀鹽鹽也經常被稱作熒光素、熒光素酶、螢火蟲熒光素酶、熒光素鉀鹽、熒光素鈉鹽。Protocol2:Invivoanalysisinmice/小鼠***成像分析1)用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/mL),。一旦使用,保持冰冷且避光。D-熒光素也常用于身體的外部研究。螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽活題成像原理
D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽。鹽城游離酸D-熒光素鉀鹽活題成像
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南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團隊十余年的研發(fā)基礎,建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉化平臺。公司目前擁有豐富的產品線,包括外泌體提取與檢測試劑、非編碼 RNA 提取與檢測試劑、轉染試劑、microRNA 表達文庫、臨床大數據庫及涵蓋分子、細胞、動物的綜合科技服務等 100 多種試劑和科研外包服務。公司堅持國產試劑自主研發(fā),服務全國各級高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測機構、生物醫(yī)藥公司等數千家客戶。的公司,致力于發(fā)展為創(chuàng)新務實、誠實可信的企業(yè)。翌科生物深耕行業(yè)多年,始終以客戶的需求為向導,為客戶提供***的外泌體提取,非編碼RNA試劑,檢測試劑,轉染試劑。翌科生物始終以本分踏實的精神和必勝的信念,影響并帶動團隊取得成功。翌科生物始終關注商務服務市場,以敏銳的市場洞察力,實現與客戶的成長共贏。