就可以用高敏感度的CCD相機對動物體內進行***觀察而不會傷害到動物本身。在螢光素酶中加入正確的螢光素底物就可以放出熒光，而發(fā)出的光子可以被光敏感元件，如螢光探測器或改進后的光學顯微鏡探測到。這就使得對包括***在內的多種生命活動進程進行觀察成為可能。例如，螢光素酶已經被用于商業(yè)化的次世代焦磷酸定序技術，借由dNTP接上DNA鏈時水解放出的焦磷酸，透過另外一個硫酸鹽腺甘酸轉移酶反應，螢光素酶能將產物ATP與螢光素轉化為冷光，機器借此探測光線并定序。螢光素酶也可以被用于檢測血庫中所存血液中的紅血球是否開始破裂。法醫(yī)可以用含有螢光素酶的溶液來檢測犯罪現場中殘留的血跡。醫(yī)院用螢光素酶的發(fā)光來發(fā)現特定的疾病。螢光素酶還可以作為“報告蛋白”被用于分子生物學研究中，例如，用于在轉染過螢光素酶的細胞中檢測特定啟動子的轉錄情況或用于探測細胞內的ATP的水平；這一技術被稱為報告基因檢測法或螢光素酶檢測法（LuciferaseAssay）。螢光素酶是一個熱敏感蛋白，因此經常被用于研究蛋白熱變性過程中熱休克蛋白的保護能力。此外，螢光素酶水母素的發(fā)光強度與環(huán)境中鈣離子濃度相關，因此可用于檢測生物體內的鈣。D-熒光素鉀鹽找南京翌科生物科技有限公司怎么樣？fitc,異硫氰酸熒光素
8．取剩余裂解液測定LacZ的活性，其讀數作為內標用以矯正熒光素酶的讀數。9.用矯正后的讀數作圖，分析數據。注：熒光素見光易氧化，已稀釋未用的熒光素應丟棄。注意事項：1．熒光素酶檢測試劑需在15-25℃條件下預平衡后再進行反應，而后依據具體條件進行自動或手動檢測。當用液閃計數儀時，加入熒光素酶檢測試劑后立即輕輕混勻。2．如果細胞裂解后不能立即對提取物進行檢測，樣品可以在冰上保存大約5h，在-70℃可保存數月。不要反復凍融以避免酶活性的降低。3．利用上述方法檢測冷的樣品時，其信號強度將下降5-15%。4．在熒光素酶活性較高的情況下，導致信號超出線性范圍（信號溢出）可用裂解液將樣品進行稀釋。5．不要儲存稀釋過的樣品。如果必須保存，要在稀釋的樣品中加入BSA至終濃度為，這樣可以保持樣品的穩(wěn)定性。6．一些熒光儀在進行檢測前需要1-2s的穩(wěn)定，因此建議在開機后過一段時間再進行檢測操作。熒光素酶報告基因檢測主要有哪些用途？a.啟動子結構分析，將啟動子區(qū)域序列（通常2k左右）進行分段截短，或對特定位點進行突變，再分別構建入luciferase報告載體，檢測其啟動子活性。b.啟動子SNP分析，一些基因的啟動子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性。宿遷D-熒光素鉀鹽溶液怎么保存南京D-熒光素鉀鹽測試公司有哪幾家。
每孔加入100μl養(yǎng)24h后，Luciferin使其終濃度為150μg/ml，PBS，再加入D-立即用活題成像系統(tǒng)檢測，分析發(fā)光強度與細胞數之間的相關性。4)細胞生長曲線繪制MCF7-luc細胞和作為對照取表達熒光素酶的MCF-7細胞，接種于24孔板，接種密度為2×104/孔。細胞接種后1～7d，每天胰蛋白酶消化其中3孔細胞，用細胞計數儀測定細胞數。以細胞生長天數為橫坐標，細胞數目為縱坐標，分別繪制兩種細胞生長曲線。二．動物模型BLAB/c裸鼠皮下移植瘤模型的建立BLAB/cnu/nu裸鼠，4～5周齡，體重（15±2）g，雌雄各3只。取對數生長期的MCF-7用PBS重懸為2．5×10/ml懸液，每只裸鼠左右背側近腋部皮下接種100μl，共接種6只。接種后第5d采用德國BERTHOLD公司的活題成像系統(tǒng)檢測信號強度。以后每5d觀測一連續(xù)觀測30d。觀測前每只裸鼠戊巴比妥鈉麻醉（計量為：35mg/kg體重），按150mg/kg體重的量腹腔注射luciferin（invivograde），10min后，進行活題成像觀察皮下腫大的瘤的生長情況，定量分析各時間點的熒光值。繪制腫大的瘤皮下生長曲線.MCF-7-luc細胞裸鼠皮下移植瘤的病理形態(tài)學觀察MCF-7-luc細胞裸鼠皮下接種后25d，脫頸處死小鼠，取腫大的瘤組織，制成石蠟切片，切片厚度為3μm。
D-熒光素鉀鹽是一種化學品。中文別名:(S)-4,5-二氫-2-(6-羥基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸鉀鹽英文別名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxybenzothiazol-2-yl)thiazole-4-carboxylicacidpotassiumsalt產品描述D-熒光素（D-Luciferin）是熒光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍應用于整個生物技術領域，特別是體內活題成像技術。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下，熒光素底物能夠被氧化發(fā)光。當熒光素過量時，產生的光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關性（見下圖）。將攜帶熒光素酶編碼基因（Luc）的慢病毒轉染入細胞后構建穩(wěn)定表達細胞株，構建原位腫大的瘤模型，之后注入熒光素底物，通過IVIS系統(tǒng)來檢測光強度變化，從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或進行藥物藥效評價等。也可以利用ATP對此反應體系的影響，根據生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。注：在抗腫大的瘤藥物藥效評價試驗中，由于生物自發(fā)光檢測需要根據熒光素表達標定腫大的瘤大小，受腫大的瘤生長所發(fā)生的腫大的瘤內部壞死影響，生物自發(fā)光并不能很覆蓋面廣的評價腫大的瘤生長，在抗腫大的瘤藥效評價有較高要求的實驗中，建議使用小動物核磁成像系統(tǒng)檢測腫大的瘤生長。D-熒光素也常用于體外研究。熒光素酶作用下的D-熒光素鉀鹽。
luciferyladenylate）+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應非常節(jié)省能量，幾乎所有輸入反應的能量都被轉化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈，只有越10%的能量被轉化為光，剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。分析熒光素或熒光素酶不是特定的分子，而是對于所有能夠產生熒光的底物和其對應的酶的統(tǒng)稱，雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲，而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇（發(fā)光類臍菇，Omphalotusoleariu'）或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中，發(fā)光反應所需的氧氣是從被稱為腹部氣管（abdominaltrachea）的管道中輸入。一些生物，如叩頭蟲，含有多種不同的熒光素酶，能夠催化同一熒光素底物，而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種，而叩甲總科（包括螢火蟲、叩頭蟲和相關昆蟲）則有更多，因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲（Photinuspyrali'）。應用熒光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成，并被用于多種不同的實驗。D-熒光素鉀鹽測試需要哪些必備條件？宿遷游離酸D-熒光素鉀鹽供應商
光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關性。fitc,異硫氰酸熒光素
4）待圖像分析前，向細胞內添加熒光素工作液，37℃孵育5-10min，然后進行圖像分析。2.活ti成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液，混勻。2）用μm濾膜過濾除菌。立即使用，或分裝于-20℃避光保存，避免反復凍融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進行注射，以小鼠為例，每只小鼠體重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入體內10-15min（待光信號達到更強穩(wěn)定平臺期）后進行成像分析。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）、螢光素鉀鹽只是不同別名，以CAS號115144-35-9為準。2）注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3）如果要進行ATP的檢測，盡量避免外源ATP的污染，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材，在進行熒光素的溶解時應使用ATP-free無菌水。4）為避免反復凍融，本產品配制成溶液后建議適當分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化，如有條件，可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存。fitc,異硫氰酸熒光素
南京翌科生物科技有限公司是一家翌科生物基于團隊十余年的研發(fā)基礎，建立了行業(yè)前端的外泌體與非編碼 RNA 研究和轉化平臺。公司目前擁有豐富的產品線，包括外泌體提取與檢測試劑、非編碼 RNA 提取與檢測試劑、轉染試劑、microRNA 表達文庫、臨床大數據庫及涵蓋分子、細胞、動物的綜合科技服務等 100 多種試劑和科研外包服務。公司堅持國產試劑自主研發(fā)，服務全國各級高校、研究所、醫(yī)院、第三方檢測機構、生物醫(yī)藥公司等數千家客戶。的公司，致力于發(fā)展為創(chuàng)新務實、誠實可信的企業(yè)。公司自創(chuàng)立以來，投身于外泌體提取，非編碼RNA試劑，檢測試劑，轉染試劑，是商務服務的主力軍。翌科生物不斷開拓創(chuàng)新，追求出色，以技術為先導，以產品為平臺，以應用為重點，以服務為保證，不斷為客戶創(chuàng)造更高價值，提供更優(yōu)服務。翌科生物始終關注商務服務行業(yè)。滿足市場需求，提高產品價值，是我們前行的力量。