常州EVA-Green熒光定量PCR儀廠家

來源: 發(fā)布時間:2025-08-31

FAM并不是一種特定的熒光定量PCR儀品牌或型號,而是一種在熒光定量PCR中常用的熒光染料。FAM(Fluoresceinamidite)即羧基熒光素,具有高量子產(chǎn)率,在被特定波長的光激發(fā)后會發(fā)出強烈的綠色熒光,其激發(fā)波長通常在495nm左右,發(fā)射波長在520nm左右。由于其熒光特性穩(wěn)定且靈敏,被廣泛應(yīng)用于熒光定量PCR實驗中,作為報告分子來對目標(biāo)DNA或RNA進行定量檢測。很多熒光定量PCR儀都可以使用FAM染料進行檢測,例如賽默飛世爾的QuantStudio系列、ABIStepOnePlus等。這些儀器通常配備有能激發(fā)FAM染料發(fā)光的光源以及能檢測其發(fā)射熒光的光學(xué)系統(tǒng)。以QuantStudio?1Plus實時熒光定量PCR儀為例,它配備4種常用的激發(fā)和發(fā)射濾光片,包括FAM、VIC、ROX和Cy5,其激發(fā)光源為白光LED,激發(fā)范圍為455至530nm,可滿足FAM染料的激發(fā)需求。若核酸發(fā)生降解,會導(dǎo)致擴增片段不完整,影響定量準(zhǔn)確性,降低檢測靈敏度。常州EVA-Green熒光定量PCR儀廠家

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熒光定量 PCR 儀是一種精密的儀器,正確的維護和保養(yǎng)可以延長其使用壽命,保證儀器的性能和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。日常維護儀器清潔:定期清理儀器表面的灰塵和污漬,使用干凈的軟布擦拭。對于儀器內(nèi)部,可使用無絨布或棉簽輕輕擦拭光路系統(tǒng)、反應(yīng)模塊等部件,避免刮傷。注意不要讓液體流入儀器內(nèi)部。檢查儀器狀態(tài):每次使用前檢查儀器的各項參數(shù)是否正常,如熒光檢測系統(tǒng)、加熱制冷模塊等。查看儀器的指示燈、顯示屏是否正常工作,如有異常及時記錄并聯(lián)系維修人員。及時清理樣品殘留:實驗結(jié)束后,及時清理反應(yīng)板和樣品槽中的殘留樣品,防止樣品干涸后形成頑固污漬,影響后續(xù)實驗??墒褂脺睾偷那鍧崉┎潦?,然后用蒸餾水沖洗干凈,再用干凈的軟布擦干。VIC熒光定量PCR儀市場報價激發(fā)光源能夠穩(wěn)定且有效地激發(fā) TET 熒光染料,使其發(fā)出足夠強的熒光信號。

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基因表達分析:可以精確測定不同組織、不同發(fā)育階段以及不同生理狀態(tài)下基因的表達水平,幫助研究人員了解基因在生物體內(nèi)的功能和調(diào)控機制。例如,研究胚胎發(fā)育過程中某些關(guān)鍵基因的表達變化,揭示胚胎發(fā)育的分子機制?;蚍中停簩魏塑账岫鄳B(tài)性(SNP)等基因變異進行分型,用于遺傳疾病的診斷、藥物遺傳學(xué)研究以及生物進化分析等。例如,通過檢測個體在特定基因位點上的 SNP 類型,預(yù)測其對某些藥物的反應(yīng),實現(xiàn)個體化用藥。微生物研究:用于對環(huán)境中的微生物進行定量分析,了解微生物群落結(jié)構(gòu)和動態(tài)變化。例如,研究土壤、水體等環(huán)境中微生物的種類和數(shù)量,以及在不同環(huán)境條件下微生物群落的演替規(guī)律,為環(huán)境保護和生態(tài)研究提供依據(jù)。

熒光定量 PCR 儀應(yīng)用領(lǐng)域:醫(yī)學(xué)檢測病原體檢測:可快速準(zhǔn)確地檢測血液、體液或組織樣本中的病原體 DNA 或 RNA,如乙肝病毒、丙肝病毒、病毒、等,為性疾病的早期診斷和防控提供有力支持。遺傳病診斷:檢測與遺傳性疾病相關(guān)基因的突變,輔助臨床診斷和遺傳咨詢,如囊性纖維化、血友病、地中海貧血等疾病的基因檢測。食品安全:致病菌檢測:檢測食品中的沙門氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等致病菌,確保食品安全。轉(zhuǎn)基因成分檢測:對食品中的轉(zhuǎn)基因成分進行定性和定量分析,保障消費者的知情權(quán)和選擇權(quán)。在生物學(xué)研究中,常用于分析不同組織、不同發(fā)育階段或不同生理狀態(tài)下基因的表達量變化。

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熒光定量 PCR 儀是一種通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針,對 PCR 產(chǎn)物進行標(biāo)記跟蹤,實時監(jiān)測反應(yīng)過程的儀器。工作原理:在 PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個 PCR 進程。隨著 PCR 擴增的進行,每經(jīng)過一個循環(huán),熒光信號就會相應(yīng)增加。通過檢測熒光信號的變化,就可以判斷 DNA 的擴增情況,進而實現(xiàn)對初始模板的定量分析。常用的熒光化學(xué)物質(zhì)有 TaqMan 熒光探針和 SYBR 熒光染料等。TaqMan 探針法中,探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR 擴增時,Taq 酶的 5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號。SYBR Green Ⅰ 法中,SYBR 熒光染料特異性地?fù)饺?DNA 雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的 SYBR 染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與 PCR 產(chǎn)物的增加完全同步。光學(xué)系統(tǒng):如激發(fā)光源的強度和穩(wěn)定性、熒光探測器的靈敏度和噪聲水平等。南京QPCR熒光定量PCR儀哪個好

并且,TET 染料具有較高的熒光量子產(chǎn)率,即在受到激發(fā)后能夠高效地發(fā)出熒光。常州EVA-Green熒光定量PCR儀廠家

選擇適合自己的熒光定量 PCR 儀,需要綜合考慮多個因素,實驗類型:如果是進行常規(guī)的基因表達分析、病原體定量檢測,普通的單通道或多通道熒光定量 PCR 儀即可滿足需求。例如,賽默飛世爾的 QuantStudio 3,適用于基礎(chǔ)的基因表達和病原體檢測實驗。若是涉及到復(fù)雜的多重 PCR 實驗、SNP 基因分型,則需要選擇具有更多熒光通道、更高分辨率的儀器,如羅氏的 LightCycler 480,可同時檢測多個熒光信號,適用于多重分析。通量要求:根據(jù)實驗樣本數(shù)量來選擇。對于樣本量較少的實驗,如小型實驗室的科研項目或臨床診斷的少量樣本檢測,96 孔板的熒光定量 PCR 儀就足夠,如伯樂的 CFX96。而對于高通量的檢測需求,如大規(guī)模的基因篩查、藥物研發(fā)中的大量樣本篩選,可能需要選擇 384 孔板的儀器,如 ABI 7900HT,能提高實驗效率,減少實驗成本。常州EVA-Green熒光定量PCR儀廠家