泰州SYBR-Green熒光定量PCR儀

來源: 發(fā)布時間:2025-08-24

VIC與 FAM 類似,是一種熒光報告基團,可標記在引物或探針上用于熒光定量 PCR。它在 PCR 過程中,隨著引物或探針與目標 DNA 的結(jié)合以及 PCR 產(chǎn)物的擴增,會發(fā)出特定波長的熒光,其熒光信號強度與 PCR 產(chǎn)物的量成正比,通過檢測熒光信號的變化來實現(xiàn)對目標 DNA 的定量分析。特點:激發(fā)波長和發(fā)射波長與 FAM 有所不同,激發(fā)波長約為 538nm,發(fā)射波長約為 554nm,熒光顏色為黃綠色。VIC 常用于多重熒光定量 PCR 中,可與 FAM 等其他熒光染料同時使用,實現(xiàn)對多個不同目標基因的同時檢測,因為其光譜特性與其他染料有較好的區(qū)分度,能避免熒光信號之間的相互干擾。光學系統(tǒng):如激發(fā)光源的強度和穩(wěn)定性、熒光探測器的靈敏度和噪聲水平等。泰州SYBR-Green熒光定量PCR儀

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FAM并不是一種特定的熒光定量PCR儀品牌或型號,而是一種在熒光定量PCR中常用的熒光染料。FAM(Fluoresceinamidite)即羧基熒光素,具有高量子產(chǎn)率,在被特定波長的光激發(fā)后會發(fā)出強烈的綠色熒光,其激發(fā)波長通常在495nm左右,發(fā)射波長在520nm左右。由于其熒光特性穩(wěn)定且靈敏,被廣泛應用于熒光定量PCR實驗中,作為報告分子來對目標DNA或RNA進行定量檢測。很多熒光定量PCR儀都可以使用FAM染料進行檢測,例如賽默飛世爾的QuantStudio系列、ABIStepOnePlus等。這些儀器通常配備有能激發(fā)FAM染料發(fā)光的光源以及能檢測其發(fā)射熒光的光學系統(tǒng)。以QuantStudio?1Plus實時熒光定量PCR儀為例,它配備4種常用的激發(fā)和發(fā)射濾光片,包括FAM、VIC、ROX和Cy5,其激發(fā)光源為白光LED,激發(fā)范圍為455至530nm,可滿足FAM染料的激發(fā)需求。徐州HEX熒光定量PCR儀價格實惠并且,TET 染料具有較高的熒光量子產(chǎn)率,即在受到激發(fā)后能夠高效地發(fā)出熒光。

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熒光標記探針法原理:使用一種特異性的熒光標記探針,它能與目標 DNA 序列雜交。探針的 5' 端標記有熒光報告基團,3' 端標記有熒光淬滅基團。在游離狀態(tài)下,報告基團發(fā)出的熒光會被淬滅基團吸收,無法檢測到熒光信號。當 PCR 反應進行時,DNA 聚合酶在延伸引物的過程中,會將探針水解,使報告基團與淬滅基團分離,報告基團發(fā)出的熒光信號就可以被儀器檢測到。每擴增一條 DNA 鏈,就會有一個探針被水解,釋放出一個熒光信號,熒光信號的強度與 PCR 產(chǎn)物的數(shù)量成正比。過程:在 PCR 反應的退火階段,熒光標記探針會與目標 DNA 序列特異性結(jié)合。在延伸階段,DNA 聚合酶的 5' - 3' 外切酶活性會將探針從 5' 端開始逐個水解,使報告基團游離出來,產(chǎn)生熒光信號。儀器會在每個循環(huán)的延伸階段檢測熒光信號的強度,隨著 PCR 反應的進行,熒光信號逐漸增強,同樣可以得到 Ct 值。定量依據(jù):與熒光染料法類似,通過標準品建立標準曲線,根據(jù)待測樣本的 Ct 值在標準曲線上計算出起始模板量。由于熒光標記探針具有特異性,能與特定的目標序列雜交,因此可以更準確地對目標基因進行定量分析,減少非特異性擴增的干擾。

熒光定量 PCR 儀是一種精密的儀器,正確的維護和保養(yǎng)可以延長其使用壽命,保證儀器的性能和檢測結(jié)果的準確性。日常維護儀器清潔:定期清理儀器表面的灰塵和污漬,使用干凈的軟布擦拭。對于儀器內(nèi)部,可使用無絨布或棉簽輕輕擦拭光路系統(tǒng)、反應模塊等部件,避免刮傷。注意不要讓液體流入儀器內(nèi)部。檢查儀器狀態(tài):每次使用前檢查儀器的各項參數(shù)是否正常,如熒光檢測系統(tǒng)、加熱制冷模塊等。查看儀器的指示燈、顯示屏是否正常工作,如有異常及時記錄并聯(lián)系維修人員。及時清理樣品殘留:實驗結(jié)束后,及時清理反應板和樣品槽中的殘留樣品,防止樣品干涸后形成頑固污漬,影響后續(xù)實驗??墒褂脺睾偷那鍧崉┎潦茫缓笥谜麴s水沖洗干凈,再用干凈的軟布擦干。先進的數(shù)據(jù)處理與分析算法能夠?qū)z測到的熒光信號進行精確的分析和處理。

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技術創(chuàng)新推動:納米熒光探針商業(yè)化落地,如量子點熒光標記技術使檢測靈敏度大幅提升,推動相關設備在疾控中心的采購量增長。多模態(tài)檢測平臺興起,熒光 — 質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)在早篩領域的應用,成為三甲醫(yī)院設備更新的優(yōu)先選項。智能化設備占比將不斷提升,2025 年智能化設備占比預計將突破 40%,AI 驅(qū)動的全流程自動化可將檢測時間大幅壓縮,誤差率也更低。市場競爭加?。?023 年 PCR 儀市場占有率排名的品牌合計占有 70.73% 的市場份額,而 2019 年合計占有率為 94.5%,市場集中度變低,大量新玩家涌入,市場競爭變得更加激烈。各廠家不斷創(chuàng)造新的產(chǎn)品形態(tài),開辟新的應用領域,以爭取更大的市場份額。減少非特異性信號的干擾,從而提高檢測的靈敏度。鎮(zhèn)江熒光定量PCR儀價格多少

一些先進的 TET 熒光定量 PCR 儀采用了冷 CCD(電荷耦合器件)或 PMT(光電倍增管)作為熒光探測器;泰州SYBR-Green熒光定量PCR儀

熒光定量PCR儀具有高靈敏度、高特異性和精確定量等特點,被廣泛應用于多個行業(yè),以下是一些主要的應用行業(yè):生命科學研究行業(yè)基因表達分析:是研究基因表達調(diào)控的重要工具,可精確測定不同組織、不同發(fā)育階段以及不同生理病理條件下基因的表達水平,有助于深入了解基因的功能和生物過程的分子機制?;蚬δ苎芯浚和ㄟ^對基因敲除、過表達或 RNA 干擾等模型中相關基因表達量的定量分析,驗證基因的功能,揭示基因之間的相互作用關系。分子進化研究:分析不同物種或同一物種不同個體之間基因泰州SYBR-Green熒光定量PCR儀