熒光定量 PCR 儀是一種通過熒光染料或熒光標記的特異性探針,對 PCR 產(chǎn)物進行標記跟蹤,實時監(jiān)測反應(yīng)過程的儀器。工作原理:在 PCR 反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個 PCR 進程。隨著 PCR 擴增的進行,每經(jīng)過一個循環(huán),熒光信號就會相應(yīng)增加。通過檢測熒光信號的變化,就可以判斷 DNA 的擴增情況,進而實現(xiàn)對初始模板的定量分析。常用的熒光化學(xué)物質(zhì)有 TaqMan 熒光探針和 SYBR 熒光染料等。TaqMan 探針法中,探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR 擴增時,Taq 酶的 5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號。SYBR Green Ⅰ 法中,SYBR 熒光染料特異性地摻入 DNA 雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的 SYBR 染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與 PCR 產(chǎn)物的增加完全同步。不同品牌和型號的 TET 熒光定量 PCR 儀在具體的檢測靈敏度上可能會有所差異;Cy5熒光定量PCR儀電話
熒光定量PCR儀具有高靈敏度、高特異性和精確定量等特點,被廣泛應(yīng)用于多個行業(yè),以下是一些主要的應(yīng)用行業(yè):醫(yī)療診斷行業(yè)傳染病檢測:可對多種傳染病病原體進行檢測和定量分析,如、乙肝病毒、丙肝病毒、病毒等,幫助醫(yī)生及時準確地診斷疾病,監(jiān)測病情發(fā)展,以及評估效果。遺傳病診斷:通過檢測特定基因的突變或拷貝數(shù)變化,診斷遺傳性疾病,如囊性纖維化、血友病、地中海貧血等,為遺傳咨詢和產(chǎn)前診斷提供依據(jù)。診斷與監(jiān)測:一方面,可檢測相關(guān)基因的突變、甲基化狀態(tài)或基因表達水平的變化,輔助的早期診斷和預(yù)后評估;另一方面,在過程中,通過監(jiān)測腫瘤細胞中特定基因的變化,評估效果,及時發(fā)現(xiàn)的復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。南京Texas Red熒光定量PCR儀電話根據(jù)具體的實驗需求和樣本特點,選擇合適的 TET 熒光定量 PCR 儀,并通過優(yōu)化實驗條件來充分發(fā)揮其檢測靈敏度。
熒光定量 PCR 儀是一種精密的儀器,正確的維護和保養(yǎng)可以延長其使用壽命,保證儀器的性能和檢測結(jié)果的準確性。日常維護儀器清潔:定期清理儀器表面的灰塵和污漬,使用干凈的軟布擦拭。對于儀器內(nèi)部,可使用無絨布或棉簽輕輕擦拭光路系統(tǒng)、反應(yīng)模塊等部件,避免刮傷。注意不要讓液體流入儀器內(nèi)部。檢查儀器狀態(tài):每次使用前檢查儀器的各項參數(shù)是否正常,如熒光檢測系統(tǒng)、加熱制冷模塊等。查看儀器的指示燈、顯示屏是否正常工作,如有異常及時記錄并聯(lián)系維修人員。及時清理樣品殘留:實驗結(jié)束后,及時清理反應(yīng)板和樣品槽中的殘留樣品,防止樣品干涸后形成頑固污漬,影響后續(xù)實驗??墒褂脺睾偷那鍧崉┎潦?,然后用蒸餾水沖洗干凈,再用干凈的軟布擦干。
熒光信號強度異常信號值不穩(wěn)定:在相同的實驗條件下,對同一標準樣品進行多次檢測,若熒光信號強度波動較大,如原本穩(wěn)定的信號值出現(xiàn)明顯的忽高忽低,且排除了樣品制備、反應(yīng)體系等其他因素的影響,可能是光路系統(tǒng)出現(xiàn)問題,需要校準。信號值偏低或偏高:與以往正常實驗結(jié)果相比,熒光信號強度明顯偏低或偏高。例如,正常情況下某種樣品在特定循環(huán)數(shù)下的熒光值應(yīng)該在一定范圍內(nèi),但現(xiàn)在檢測到的數(shù)值遠低于或遠高于該范圍,且排除了試劑、儀器參數(shù)設(shè)置等因素,可能是光路系統(tǒng)的熒光激發(fā)或檢測效率發(fā)生變化,需要對光路系統(tǒng)進行檢查和校準。TET 染料與核酸的結(jié)合具有較高的特異性和穩(wěn)定性,能夠在 PCR 反應(yīng)過程中準確地指示目標核酸的擴增情況;
光學(xué)系統(tǒng):包括光源、激發(fā)和發(fā)射濾光片、檢測器等。光源提供激發(fā)熒光染料所需的能量,濾光片用于選擇特定波長的光,檢測器負責檢測熒光信號的強度。如 ABI StepOne Plus 實時熒光定量 PCR 儀的光學(xué)系統(tǒng)能精確檢測不同熒光染料發(fā)出的信號。熱循環(huán)系統(tǒng):用于控制 PCR 反應(yīng)的溫度變化,包括變性、退火和延伸等步驟。它需要具備快速升降溫的能力,以保證 PCR 反應(yīng)的高效進行。例如,Roche LightCycler 480 實時熒光定量 PCR 儀的熱循環(huán)系統(tǒng)升溫速度快,能有效縮短實驗時間??刂葡到y(tǒng):負責儀器的操作和數(shù)據(jù)處理,可設(shè)置 PCR 反應(yīng)的參數(shù),如循環(huán)次數(shù)、溫度、時間等,還能對檢測到的熒光信號進行分析和處理,生成定量結(jié)果。染料的純度、熒光量子產(chǎn)率及與核酸的結(jié)合特性等很重要。揚州Texas Red熒光定量PCR儀微量檢測
光學(xué)系統(tǒng):如激發(fā)光源的強度和穩(wěn)定性、熒光探測器的靈敏度和噪聲水平等。Cy5熒光定量PCR儀電話
杭州柏恒(Bioer)Q9600Pro熒光定量PCR儀是一款備受科研人員青睞的高性能實驗設(shè)備。其出色的熒光信號強度、低背景噪聲和高靈敏度,使其在分子生物學(xué)領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用于基因表達分析、基因型鑒定、病毒載量測定等研究領(lǐng)域,為科研工作者提供了一個強有力的實驗工具。首先,Q9600Pro熒光定量PCR儀具有出色的熒光信號強度。通過精心設(shè)計的熒光探針和熒光檢測系統(tǒng),該儀器能夠準確捕獲PCR擴增過程中產(chǎn)生的熒光信號,并將其轉(zhuǎn)化為可靠的定量數(shù)據(jù)。強大的熒光信號帶來了更高的檢測靈敏度和準確性,使用戶能夠?qū)ξ⒘磕繕宋镔|(zhì)進行快速、穩(wěn)定的定量分析。其次,Q9600Pro熒光定量PCR儀背景噪聲極低。低背景噪聲是保證實驗結(jié)果準確性的重要因素,可以有效降低假陽性信號的產(chǎn)生,提高實驗的可靠性。Q9600Pro熒光定量PCR儀在信號檢測和數(shù)據(jù)處理方面表現(xiàn)優(yōu)異,有效抑制了背景噪聲的干擾,確保了實驗結(jié)果的精細性和可重復(fù)性。另外,Q9600Pro熒光定量PCR儀具有高靈敏度。在微量樣本的體系中,靈敏度是評估PCR儀性能的重要指標之一。Q9600Pro熒光定量PCR儀通過優(yōu)化反應(yīng)體系和熒光探針設(shè)計,能夠檢測到極低濃度的目標DNA或RNA,滿足科研人員對于高靈敏度實驗的需求。 Cy5熒光定量PCR儀電話