探普生物進(jìn)行病毒宏基因組測序,樣品具備什么條件才能獲得比較質(zhì)量的宏基因組分析效果?其他公司對用于測序的樣本的要求較高。而在探普生物進(jìn)行病毒宏基因組測序,基于探普的專有流程,樣本要求非常低,不要求總量到達(dá)微克,探普有專門的收樣標(biāo)準(zhǔn)和送樣流程。為了保證后續(xù)數(shù)據(jù)的有效利用率,需要客戶配合完成合格的取樣步驟和樣本前處理步驟。當(dāng)然探普也提供適當(dāng)?shù)臉颖咎幚矸?wù)。核酸性質(zhì)有RNA和DNA之分,核酸鏈還有單雙鏈之分,而核酸本質(zhì)不同和單雙鏈的不同,進(jìn)行同樣的實驗步驟其效率也不一樣。這些特點決定了宏基因組測序是相對個性化定制化的一類服務(wù),出于對結(jié)果真實性的尊重和保證,需要客戶和銷售人員充分溝通,設(shè)定合理的樣本處理方案。病原微生物二代測序,也稱宏基因組測序(mNGS)。鄭州病毒多樣性測序檢測
探普生物對樣本進(jìn)行宏病毒組測序?qū)嶒灮诙鷾y序技術(shù)。經(jīng)過核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這3大基本流程后,樣本轉(zhuǎn)換成了序列數(shù)據(jù)。首先,在核酸純化環(huán)節(jié),探普提供專門針對病毒的核酸純化樣本指南,以提高純度和得率,與此同時探普生物也提供核酸純化服務(wù)。第二,文庫構(gòu)建環(huán)節(jié)。樣本的核酸具備濃度低,總量少的特點。探普生物專門針對這一點開發(fā)了超微量核酸文庫構(gòu)建,可以將0.01ng/μl甚至更低濃度的核酸構(gòu)建成測序文庫。第三,生物信息學(xué)分析環(huán)節(jié)。寄生性質(zhì)的生物下機(jī)數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點,優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫,搭載了專門用的的生物信息學(xué)分析流程,可處理復(fù)雜背景下的目標(biāo)物種序列。鄭州病毒多樣性測序檢測宏基因組測序是通過比對數(shù)據(jù)庫,得到病原體的信息。
病毒宏基因組測序相關(guān)知識:在未知傳染病的病原體檢測方面,傳統(tǒng)的體液培養(yǎng)等檢測方式整體效率、陽性率低下,PCR檢測也局限于已知的病原微生物基因序列,能夠準(zhǔn)確分析病原體并能夠高通量測序的mNGS具有強大的優(yōu)勢。mNGS的這兩大優(yōu)勢也令其在這次的病毒檢測中發(fā)揮出色。宏基因組測序在一年多的時間里也受到了資本市場的普遍關(guān)注,病情發(fā)生之后,全球宏基因組測序市場又有多家公司在本季度獲得投資。全自動設(shè)備處理標(biāo)本,該設(shè)備可以從血漿中分離微生物無細(xì)胞核酸(mcfDNA),使用特有工藝去除不必要的人類DNA,然后對樣本進(jìn)行測序,并使用機(jī)器學(xué)習(xí)等手段對數(shù)十種實時數(shù)百萬個數(shù)據(jù)點來識別匹配項。這種核酸是病原微生物在血液中留下的「痕跡」,通過對這些痕跡進(jìn)行測序,便可以分析出傳染的病原情況。該技術(shù)可以識別和量化1250種臨床相關(guān)的病原菌,包括細(xì)菌、寄生蟲等。
上海探普生物科技有限公司對樣本進(jìn)行宏病毒組測序以后的數(shù)據(jù)分析工作的進(jìn)行:寄生性質(zhì)的生物下機(jī)數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點,優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫,搭載了專門用的的生物信息學(xué)分析流程,可處理復(fù)雜背景下的目標(biāo)物種序列。生物信息學(xué)流程主要包括,1,基于數(shù)據(jù)庫,去除宿主數(shù)據(jù)和其他微生物數(shù)據(jù),篩選出目的序列,然后進(jìn)行序列組裝,物種分類,豐度統(tǒng)計。樣本數(shù)量達(dá)到一定標(biāo)準(zhǔn)還可以進(jìn)行差異分析?,F(xiàn)有數(shù)據(jù)庫不夠完善,出于對數(shù)據(jù)真實性的尊重,探普生物一般不進(jìn)行功能相關(guān)的分析。預(yù)測性質(zhì)的分析可以根據(jù)具體項目評估數(shù)據(jù)庫質(zhì)量后進(jìn)行。病原微生物二代測序是目前臨床上針對病原較常用的基因測序方法。
狀病毒的發(fā)現(xiàn),病原宏基因組測序功不可沒。對一種新病毒進(jìn)行鑒定和檢測,其中非常關(guān)鍵的步驟就是獲得病毒的全基因組信息。在此次病情監(jiān)測和防控中,病原宏基因組測序發(fā)揮了至關(guān)重要的作用,利用其技術(shù)優(yōu)勢,研究人員在五天內(nèi)就鑒定并分析出冠狀病毒的基因組,而2003年SARS的鑒定耗時5月余、2013年H7N9的鑒定耗時1月余。冠狀病毒2019-nCoV為線性單鏈RNA(ssRNA)病毒,基因組全長包含29903個核苷酸,10個基因。病毒基因組序列為進(jìn)一步分析其傳染機(jī)理,傳播途徑,藥物靶點等提供了有利的支持。病毒宏基因組測序可直接對樣本中的核酸進(jìn)行高通量測序。河南病原微生物多樣性分析方法
宏基因組測序技術(shù)不依賴于微生物的分離培養(yǎng)。鄭州病毒多樣性測序檢測
病毒相關(guān)知識:病毒是地球上數(shù)量多的生物實體,其中細(xì)菌病毒(即噬菌體)約有1031個類群,從海洋到陸地再到人體幾乎都是它們的棲息地。研究者將病毒視為調(diào)節(jié)人類生態(tài)系統(tǒng)的重要成員,人體內(nèi)主要包括真核病毒和噬菌體,包括雙鏈DNA(double-strandedDNA,dsDNA),單鏈DNA(single-strandedDNA,ssDNA)和RNA病毒。隨著對病毒研究的普遍開展,“病毒組”與“病毒組學(xué)”的概念也應(yīng)運而生,這些術(shù)語分別涵蓋了棲息在生態(tài)系統(tǒng)中的所有病毒及其基因組和對它們的研究(LefkowitzEJ,etal,2017)。根據(jù)病毒不同的特征進(jìn)行分類,包括病毒的宿主范圍;病毒的形態(tài)學(xué);病毒的基因組大小;病毒的核酸組成成分以及病毒的致病性。雖然所有的性狀在病毒分類學(xué)的確定中都很重要,但目前利用平均核苷酸同源性(ANI)和系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系進(jìn)行序列比較被視為定義和區(qū)分病毒群類的主要標(biāo)準(zhǔn)。鄭州病毒多樣性測序檢測
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