宏病毒組學是宏基因組學的一個分支,但與傳統(tǒng)的宏基因組學概念不同,它是在宏基因組學概念的基礎上,結(jié)合病毒自身的特點,將宏基因組學方法應用到病毒學領域而形成的。2002年,Breitbart等(BreitbartM,etal,2002)將宏基因組學方法應用于海洋病毒群落的研究,發(fā)現(xiàn)噬菌體為海水中主要病毒組,這一研究標志著宏病毒組學正式應用于科學研究。簡而言之,宏病毒組學就是應用特殊方法把特定環(huán)境中所有病毒與其他微生物分開,然后提取的病毒核酸,用高通量技術進行病毒核酸測序,依托現(xiàn)有數(shù)據(jù)庫進行相應的比對工作,并運用軟件分析處理后得到研究樣品中病毒群落的組成信息。DNA宏基因組測序的病原檢出率均高于培養(yǎng)等傳統(tǒng)方法。四川水體微生物多樣性測序分析公司
病毒宏基因組測序注意事項:探普生物對樣本進行宏病毒組測序?qū)嶒灮诙鷾y序技術。經(jīng)過核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學分析這3大基本流程后,樣本轉(zhuǎn)換成了序列數(shù)據(jù)。先,在核酸純化環(huán)節(jié),探普提供專門針對病毒的核酸純化樣本指南,以提高純度和得率,與此同時探普生物也提供核酸純化服務。第二,文庫構(gòu)建環(huán)節(jié)。樣本的核酸具備濃度低,總量少的特點。探普生物專門針對這一點開發(fā)了超微量核酸文庫構(gòu)建,可以將0.01ng/μl甚至更低濃度的核酸構(gòu)建成測序文庫。第三,生物信息學分析環(huán)節(jié)。寄生性質(zhì)的生物下機數(shù)據(jù)一般都伴隨大量的宿主和其他微生物的數(shù)據(jù)。探普生物基于該特點,優(yōu)化了自有數(shù)據(jù)庫,搭載了專門用的的生物信息學分析流程,可處理復雜背景下的目標物種序列。長沙口腔微生物多樣性分析排行技術的成熟,未來二代測序病原體檢測應進一步在成本下降、診斷標準完善、質(zhì)量控制提升等方面進行完善。
宏基因組的應用:特定生物種基因組研究使人們的認識單元實現(xiàn)了從單一基因到聚合基因的轉(zhuǎn)變,宏基因組研究將使人們擺脫物種界限,揭示更高更復雜層次上的生命運動規(guī)律。在目前的基因結(jié)構(gòu)功能認識和基因操作技術背景下,細菌宏基因組成為研究和開發(fā)的主要對象。細菌宏基因組細菌人工染色體文庫篩選和基因系統(tǒng)學分析使研究者能更有效地開發(fā)細菌基因資源,更深入地洞察細菌多樣性。如宏基因組成為生物催化劑的新來源。病毒宏基因組測序是指通過高通量測序?qū)φ麄€環(huán)境中的病毒進行研究,以獲得單個樣品的飽和數(shù)據(jù)量,可進行病毒群體的物種分類、復雜度分析、群體結(jié)構(gòu)分析、功能注釋、樣品間的病毒種類或基因差異分析。宏基因組測序研究擺脫了對病毒分離培養(yǎng)的限制,為環(huán)境中各種病毒的研究提供了有效工具,并可以通過宏基因組深度測序挖掘具有應用價值的基因資源。
上海探普生物科技有限公司對樣本進行宏病毒組測序具有的優(yōu)勢:全國開設病毒宏基因組測序的公司不超過3家,只有探普生物是專門為病毒研究者服務的,探普生物的研發(fā)團隊和實驗團隊都來自全國各地病毒學、微生物學專業(yè)的高校,碩士及以上學歷成員超過60%,團隊具備普通測序?qū)嶒灪头治龌A之外,同時具備病毒學及微生物學的學術背景,相當了解病毒相關樣本情況、研究方向等。研究者在項目咨詢的時候就可以明顯感覺到探普生物的專業(yè)性,溝通順暢,省時省力。病毒宏基因組學的研究過程主要包括以下步驟:樣品的處理、病毒宏基因組學文庫構(gòu)建和數(shù)據(jù)分析與處理。
對于病毒的全基因組進行測序價格合理,樣品具備什么條件才可以獲得比較質(zhì)量的組裝效果?其他公司對用于測序的樣本的要求較高。探普生物對病毒的全基因組進行測序是基于探普的專有流程,樣本要求非常低,不要求粒子純化,不要求總量到達微克,按探普的專門的收樣標準和送樣流程進行即可。簡言之,經(jīng)過細胞或其他方式培養(yǎng)的樣本,若載量較高,不需要復雜處理,直接破碎細胞取上清提取核酸都可以獲得非常好的組裝效果;而臨床標本,需要看情況,對于被侵害嚴重的個體,釋放較高的部位也可以獲得很好的效果;其他類型的樣本,就需要測ct值來確定是否可以進行實驗,以及評估測序效果。DNA宏基因組測序已被用于診斷各種臨床傳染性疾病。廣東宏基因?qū)W測序找哪家
宏基因組測序克服了傳統(tǒng)的純培養(yǎng)方法的技術限制。四川水體微生物多樣性測序分析公司
病毒宏基因組學中包含兆級的短序列片段(Reads)。通過不同的序列拼接軟件將Reads拼接較長的DNA序列片斷(Contigs)。數(shù)據(jù)組裝可通過K-mer分析評估各個樣品的測序深度,通過對SOAPdenovo設置不同K值,篩選較好組裝結(jié)果,對較好組裝結(jié)果進行校正,并統(tǒng)計Reads利用率。接著利用已測序生物體的DNA序列構(gòu)建數(shù)據(jù)庫,將拼接后的Contigs通過不同的鑒定方案,與數(shù)據(jù)庫里的DNA序列信息進行比對,確定該序列來自的生物群落,篩選有用的基因信息。此外,還可以用一些工具對序列進行基因預測(如Metagene、GeneMark、FragGeneScan等)。四川水體微生物多樣性測序分析公司
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