杭州病毒基因測序分析檢測

來源: 發(fā)布時間:2023-11-12

全基因組測序要注意的事項:全基因組測序是對未知基因組序列的物種進(jìn)行個體的基因組測序。技術(shù)路線:提取基因組DNA,然后隨機(jī)打斷,電泳回收所需長度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接頭,進(jìn)行DNA簇(Cluster)制備,后利用Paired-End(Solexa)或者M(jìn)ate-Pair(SOLiD)的方法對插入片段進(jìn)行測序。然后對測得的序列組裝成Contig,通過Paired-End的距離可進(jìn)一步組裝成Scaffold,進(jìn)而可組裝成染色體等。組裝效果與測序深度與覆蓋度、測序質(zhì)量等有關(guān)。常用的組裝有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。測序深度(Sequencingdepth)是指測序得到的堿基總量(bp)與基因組大小的比值,它是評價測序量的指標(biāo)之一。測序深度與基因組覆蓋度之間是一個正相關(guān)的關(guān)系,測序帶來的錯誤率或假陽性結(jié)果會隨著測序深度的提升而下降。測序的個體,如果采用的是雙末端或Mate-Pair方案,當(dāng)測序深度在50X~100X以上時,基因組覆蓋度和測序錯誤率控制均得以保證,后續(xù)序列組裝成染色體才能變得更容易與準(zhǔn)確。


病毒全基因組進(jìn)行測序,"基因測序"是什么?讓我們來揭開它神秘的面紗。杭州病毒基因測序分析檢測

全基因組測序要注意的事項:全基因組測序是對未知基因組序列的物種進(jìn)行個體的基因組測序。技術(shù)路線:提取基因組DNA,然后隨機(jī)打斷,電泳回收所需長度的DNA的片段(0.2~5Kb),加上接頭,進(jìn)行DNA簇(Cluster)制備,后利用Paired-End(Solexa)或者M(jìn)ate-Pair(SOLiD)的方法對插入片段進(jìn)行測序。然后對測得的序列組裝成Contig,通過Paired-End的距離可進(jìn)一步組裝成Scaffold,進(jìn)而可組裝成染色體等。組裝效果與測序深度與覆蓋度、測序質(zhì)量等有關(guān)。常用的組裝有:SOAPdenovo、Trimity、Abyss等。測序深度(Sequencingdepth)是指測序得到的堿基總量(bp)與基因組大小的比值,它是評價測序量的指標(biāo)之一。測序深度與基因組覆蓋度之間是一個正相關(guān)的關(guān)系,測序帶來的錯誤率或假陽性結(jié)果會隨著測序深度的提升而下降。測序的個體,如果采用的是雙末端或Mate-Pair方案,當(dāng)測序深度在50X~100X以上時,基因組覆蓋度和測序錯誤率控制均得以保證,后續(xù)序列組裝成染色體才能變得更容易與準(zhǔn)確。



病毒高通量測序進(jìn)化分析服務(wù)想要通過高通量測序獲得病毒全序列,需要經(jīng)歷:核酸純化-文庫構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這三大基本流程。

病毒的蛋白組成的特點是什么? (1)結(jié)構(gòu)蛋白由病毒的基因組編碼,結(jié)構(gòu)蛋白組成病毒體的蛋白成分如病毒體的衣殼蛋白、基質(zhì)蛋白和包膜蛋白。?? (2)非結(jié)構(gòu)蛋白由病毒的基因組編碼,但非結(jié)構(gòu)蛋白不參與病毒體構(gòu)成的蛋白成分。非結(jié)構(gòu)蛋白可存在于病毒體內(nèi),如病毒的酶就屬于非結(jié)構(gòu)蛋白,也可存在于侵染細(xì)胞。?? 病毒結(jié)構(gòu)蛋白有以下幾種功能:①病毒結(jié)構(gòu)蛋白可保護(hù)病毒核酸,避免環(huán)境中的核酸酶和其他理化因素對病毒核酸造成破壞;②病毒結(jié)構(gòu)蛋白可參與病毒的侵染過程,衣殼蛋白和包膜上的蛋白突起能吸附至易感細(xì)胞受體,引起侵染;③具有抗原***毒基因編碼的衣殼蛋白和包膜蛋白具有良好的抗原性,能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。

有哪些病毒學(xué)研究常用方法? 細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathic effect,CPE):由病毒增殖引起的細(xì)胞改變稱細(xì)胞病變效應(yīng)。 不同種類病毒可引起不同細(xì)胞病變效應(yīng)。如: ①細(xì)胞圓縮、分散、溶解,如腸道病毒、鼻病毒、披膜病毒、痘病毒等; ②細(xì)胞融合成多核巨細(xì)胞,如皰疹病毒、副粘病毒、呼吸道合胞病毒; ③細(xì)胞腫脹、顆粒增多、病變細(xì)胞聚集成葡萄狀,如腺病毒; ④胞質(zhì)出現(xiàn)空泡,如SV40細(xì)胞; ⑤細(xì)胞漿或核內(nèi)出現(xiàn)嗜酸性或嗜堿性包涵體,一至數(shù)個不等; ⑥輕微病變,如正粘病毒、狂犬病毒、冠狀病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒等; ⑦培養(yǎng)液pH的變化。探普生物病毒測序具備反饋處理迅速的優(yōu)點。

高通量測序技術(shù)又稱“下一代“測序技術(shù)或深度測序技術(shù),可以一次性對幾十萬至幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定?,F(xiàn)已普遍應(yīng)用在基因組測序、基因表達(dá)分析、非編碼小分子RNA鑒定、轉(zhuǎn)錄因子靶基因篩選及DNA甲基化等相關(guān)的研究領(lǐng)域。高通量測序技術(shù)是對傳統(tǒng)測序一次性的改變,一次對幾十萬到幾百萬條DNA分子進(jìn)行序列測定,因此在有些文獻(xiàn)中稱其為下一代測序技術(shù)(nextgenerationsequencing)足見其劃時代的改變,同時高通量測序使得對一個物種的轉(zhuǎn)錄組和基因組進(jìn)行細(xì)致全貌的分析成為可能,所以又被稱為深度測序(deepsequencing)。


病毒全基因組測序具有的特點:獨有的一定定量技術(shù),實現(xiàn)病原定量分析!全基因組測序診斷

高通量測序技術(shù)正式啟用之后,研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測序和分析。杭州病毒基因測序分析檢測

對病毒的全基因組進(jìn)行測序:對病毒的全基因組進(jìn)行測序主要是通過非特異性擴(kuò)增+克隆結(jié)合sanger測序來完成的。當(dāng)物種有了參考的序列之后,可以通過特異性擴(kuò)增+sanger測序獲得全基因組序列。Sanger測序準(zhǔn)確度高,讀長很長,但與此同時,擴(kuò)增和克隆工作費時費力,由于流程繁瑣,加上快速變異導(dǎo)致引物無法通用,該方法對于大量基因組的測序工作而言,可操作性不強(qiáng),這對于研究者一直是一個困擾。高通量測序技術(shù)正式啟用之后,研究者可以將樣品處理至標(biāo)準(zhǔn)濃度和體積后進(jìn)行測序和分析,減少了工作量,增加了成功率。探普生物進(jìn)行了大量有針對性的研發(fā)和測試,開發(fā)了全套的實驗和分析流程用于對病毒的全基因組進(jìn)行測序,該流程自運(yùn)行以來廣受研究者們好評。


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