高通量測(cè)序方法

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-02-20

高通量基因組測(cè)序中,測(cè)序深度和覆蓋度指的是:測(cè)序深度是指測(cè)序得到的總堿基數(shù)與待測(cè)基因組大小的比值。假設(shè)一個(gè)基因大小為2M,測(cè)序深度為10X,那么獲得的總數(shù)據(jù)量為20M。覆蓋度是指測(cè)序獲得的序列占整個(gè)基因組的比例。由于基因組中的高GC、重復(fù)序列等復(fù)雜結(jié)構(gòu)的存在,測(cè)序終拼接組裝獲得的序列往往無(wú)法覆蓋有所的區(qū)域,這部分沒有獲得的區(qū)域就稱為。例如一個(gè)細(xì)菌基因組測(cè)序,覆蓋度是98%,那么還有2%的序列區(qū)域是沒有通過測(cè)序獲得的。深度測(cè)序技術(shù)促進(jìn)了基因檢測(cè)的普及。高通量測(cè)序方法

發(fā)現(xiàn)病例的要盡快對(duì)病毒進(jìn)行全基因組測(cè)序的原因是:通過對(duì)病毒全基因組高通量測(cè)序可以在較短時(shí)間內(nèi)獲取病毒的全部基因信息,解釋病毒的來(lái)源、傳播、變異演化等科學(xué)問題,為后續(xù)流行病學(xué)調(diào)查指明方向,為相關(guān)病例的追蹤溯源提供重要依據(jù),目前對(duì)病毒溯源分型主要檢測(cè)手段就是高通量測(cè)序技術(shù)。高通量測(cè)序技術(shù)如何進(jìn)行病毒溯源?先對(duì)獲得的早期病例標(biāo)本開展病毒全基因組高通量序列測(cè)定,通過與本地流行病毒及全球其他地區(qū)測(cè)定過序列的病毒比較,如果該病例傳染的病毒在基因組上和北美流行株更接近,比如在全長(zhǎng)接近3萬(wàn)個(gè)堿基的序列上,兩者只相差幾個(gè)堿基,相似度為99%以上,這就是為我們推斷該病例攜帶病毒為北美流行株提供依據(jù)。高通量測(cè)序方法病毒全基因組測(cè)序產(chǎn)品特點(diǎn):病原診斷更準(zhǔn)確。

全基因組測(cè)序相關(guān)知識(shí):全基因組測(cè)序是對(duì)未知基因組序列的物種進(jìn)行個(gè)體的基因組測(cè)序。全基因組預(yù)測(cè)的意義揭示了人類生、老、病和死的奧秘,使人類從根本上認(rèn)知疾病發(fā)生的原因,做到正確的調(diào)整疾病和盡早的預(yù)防疾病。每個(gè)人從開始就繼承了父母的DNA遺傳信息,并且攜帶一生,不易改變。全基因組測(cè)序通過運(yùn)用新一代高通量DNA測(cè)序儀,進(jìn)行10到20倍覆蓋率的個(gè)人全基因組測(cè)序,然后與人類基因組精確圖譜比較,得到完整的個(gè)人全基因組序列,破譯個(gè)人全部的遺傳信息的過程。全基因組測(cè)序覆蓋面廣,能檢測(cè)個(gè)體基因組中的全部遺傳信息,準(zhǔn)確性高。

深度測(cè)序數(shù)據(jù):目前深度測(cè)序數(shù)據(jù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域數(shù)量增加快、應(yīng)用廣的數(shù)據(jù),對(duì)這些數(shù)據(jù)的管理、分析和應(yīng)用給生物信息學(xué)帶來(lái)了巨大的挑戰(zhàn)。早期的測(cè)序技術(shù)是“測(cè)定沒有計(jì)算快”,下一代測(cè)序技術(shù)發(fā)展以來(lái),變?yōu)槿缃竦摹坝?jì)算沒有測(cè)定快”。深度測(cè)序數(shù)據(jù)的迅猛增長(zhǎng)使得數(shù)據(jù)科學(xué)分析方面的人才十分缺乏,深度測(cè)序和大數(shù)據(jù)處理都是新生事物,將深度測(cè)序數(shù)據(jù)應(yīng)用到臨床更需要數(shù)學(xué)統(tǒng)計(jì)、計(jì)算機(jī)和生物、臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的多學(xué)科交叉的高級(jí)人才。測(cè)序深度是測(cè)序量除以基因組長(zhǎng)度,例如測(cè)序深度10*就相當(dāng)于測(cè)了10次的全基因組。二代測(cè)序可以用于對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序有哪些挑戰(zhàn)?

對(duì)病毒進(jìn)行全基因組測(cè)序:在探普生物長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)行過程中,我們接觸到的對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序項(xiàng)目有比較豐富的應(yīng)用場(chǎng)景。先,從事基因進(jìn)化/疫苗/藥品/抗體研制方向的研究的研究者一定會(huì)用到測(cè)序。這種場(chǎng)景一般是用密集的sanger測(cè)序監(jiān)測(cè)某幾個(gè)關(guān)鍵基因,搭載一定頻率的全基因組測(cè)序。這樣的組合省時(shí)省力省經(jīng)費(fèi),同時(shí)能達(dá)到研究目的。此外,有的單位需要對(duì)傳染病的病原進(jìn)行流行病學(xué)監(jiān)測(cè)和研究,如疾控/疫控中心、醫(yī)院的傳染病科室以及一些高校和研究所的相應(yīng)課題組,可能需要對(duì)病毒的全基因組進(jìn)行測(cè)序以后,結(jié)合其他上下游的研究數(shù)據(jù),達(dá)到研究或者監(jiān)測(cè)疫病的目的。想要通過高通量測(cè)序獲得病毒全序列,需要經(jīng)歷:核酸純化-文庫(kù)構(gòu)建-生物信息學(xué)分析這三大基本流程。河北病毒測(cè)序進(jìn)化分析服務(wù)

高通量測(cè)序技術(shù)是對(duì)傳統(tǒng)測(cè)序一次**性的改變。高通量測(cè)序方法

新一代測(cè)序中基因從頭測(cè)序和重測(cè)序有什么區(qū)別?我要做乙肝病毒DNA全長(zhǎng)測(cè)序,應(yīng)該選用哪種方法?1、條件不同;從頭測(cè)序的條件是不依賴于任何物種基因組;重測(cè)序的條件是在已知物種基因組的情況下進(jìn)行的。2、病毒變異率不同;從頭測(cè)序是通過拼接和組裝的方式獲得基因組序列圖譜,病毒變異率很低;重測(cè)序可以尋找出大量的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn),插入缺失位點(diǎn),結(jié)構(gòu)變異位點(diǎn),拷貝數(shù)變異等變異信息,從而獲得生物群體的遺傳特征。病毒變異率很高。乙肝病毒在醫(yī)學(xué)上已經(jīng)測(cè)過,只需要做重測(cè)序就可以。高通量測(cè)序方法

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