YuanStem 8多能干細(xì)胞培養(yǎng)基
YuanStem 8多能干細(xì)胞培養(yǎng)基是一種無動物源成份、化學(xué)成分明確的多能干細(xì)胞(PSC)培養(yǎng)基,專為人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)及胚胎干細(xì)胞(ESC)設(shè)計,無需飼養(yǎng)層。其突破性熱穩(wěn)定配方支持 Weekend-Free 培養(yǎng)方案(隔日補液),在維持細(xì)胞干性與遺傳穩(wěn)定性的同時,***簡化操作流程。
該產(chǎn)品采用 50:1 基礎(chǔ)培養(yǎng)基-添加物雙組分體系(490ml+10ml),可無縫兼容 Matrigel®、VTN-N 等基質(zhì)材料,與常用培養(yǎng)體系如E8體系、mTeSR體系等無縫切換。
優(yōu)勢
1. ***的干性維持能力:較好維持細(xì)胞狀態(tài)、干性,及遺傳信息穩(wěn)定性;
2. 靈活培養(yǎng)方案支持:優(yōu)化配方及熱穩(wěn)定組分,支持隔天換液及weekend-free換液;
3. ***包被兼容性:兼容常用包被體系,如基質(zhì)膠(Matrigel)、玻連蛋白(VTN-N)等;
4. 培養(yǎng)體系無縫切換:與常用培養(yǎng)體系無縫切換,如E8/E8 Flex、mTeSR/mTeSR Plus等。
數(shù)據(jù)展示
1. 干性檢測
圖1顯示,PBMC來源的iPSC在YuanStem 8培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)15代后,SOX2、OCT4、SSEA4、Nanog及TRA-1-60等多能性標(biāo)志物均維持高表達(dá)。
2. 核型檢測
圖2顯示,PBMC來源的iPSC在YuanStem 8培養(yǎng)基中經(jīng)連續(xù)15代單細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,核型維持正常,未發(fā)生異常。
3. 細(xì)胞生長狀態(tài)
3.1 Matrigel包被條件下的培養(yǎng)性能
圖3顯示,PBMC來源iPSC在Matrigel(Corning #354230)包被的基底上培養(yǎng)時,YuanStem 8培養(yǎng)體系中的細(xì)胞增殖速率與mTeSR Plus體系相近(倍增時間差異<10%),且兩種體系均有效維持細(xì)胞未分化狀態(tài)。
3.2 VTN-N包被條件下的培養(yǎng)性能
圖4顯示,PBMC來源iPSC在VTN-N(Thermo #A31804)包被基底中,YuanStem 8培養(yǎng)體系的細(xì)胞增殖速率較mTeSR Plus體系降低約20%(P<0.05),但兩種體系下的細(xì)胞仍保持典型的克隆形態(tài)與未分化狀態(tài)。
3.3 iPSC生長曲線
圖5所示,PBMC重編程來源的iPSC細(xì)胞,分別在VTN-N*(Thermo#A31804)和Matrigel*(Corning#354230)兩種細(xì)胞基質(zhì)包被的TC處理的6孔板,用YuanStem 8多能干細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng),初始細(xì)胞接種總量分別是15萬/孔及25萬/孔,分別在第1/3/5天換液??梢钥闯?,Matrigel包被組iPSC細(xì)胞生長更快,但**終收獲細(xì)胞量比VTN包被組少(約300萬 vs 約400萬)**。
* Matrigel是當(dāng)前科研中培養(yǎng)多能干細(xì)胞*常用的水凝膠,其與E8體系共用是當(dāng)前許多分化方法與類***構(gòu)建的起始條件;VTN是無動物源成分的重組蛋白,適合需要嚴(yán)格控制原料組分的實驗,但由于其成分單一,細(xì)胞貼附相對沒有Matrigel等基質(zhì)膠類型的包被材料緊密,對使用者的操作和經(jīng)驗有一定的要求。
**實驗結(jié)果表明,在Matrigel包被的6孔板中,mTeSR Plus和E8 Flex培養(yǎng)iPSC的總細(xì)胞量分別約400萬和約300萬。
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