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操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。3.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。進(jìn)口ELISA試劑盒的代理,上海伊麗薩生物科技等你來(lái)。河南綜合ELISA試劑盒器材
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開(kāi)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。河南綜合ELISA試劑盒器材上海伊麗薩生物科技代理進(jìn)口ELISA試劑盒,助力科研探索。
組成結(jié)構(gòu):1、血清:操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)***的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或***血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細(xì)胞上清中白介素-6的定量檢測(cè)
ELISA試劑盒中的酶標(biāo)記物是實(shí)現(xiàn)檢測(cè)信號(hào)放大的關(guān)鍵因素。酶標(biāo)記在抗體或抗原上,常見(jiàn)的酶有辣根過(guò)氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酶(ALP)等。酶標(biāo)記物的制備需要精確的技術(shù),要確保酶與抗體或抗原的結(jié)合既穩(wěn)定又不影響它們各自的活性。以HRP標(biāo)記的抗體為例,HRP具有高效的催化活性,在與目標(biāo)抗原或抗體特異性結(jié)合后,當(dāng)加入底物時(shí),HRP能夠催化底物發(fā)生大量的化學(xué)反應(yīng),從而將微弱的抗原-抗體結(jié)合信號(hào)放大為明顯的顯色信號(hào)。這種信號(hào)放大作用使得ELISA試劑盒能夠檢測(cè)到極低濃度的目標(biāo)物質(zhì),提高了檢測(cè)的靈敏度。上海伊麗薩生物科技,進(jìn)口ELISA試劑盒代理領(lǐng)域的佼佼者。
ELISA試劑盒是一種用于檢測(cè)特定蛋白質(zhì)、抗體或其他分子的試劑盒。ELISA是一種酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),利用特異性抗體與抗原或特定分子結(jié)合,然后使用酶標(biāo)記的二抗或底物來(lái)檢測(cè)結(jié)合事件。ELISA試劑盒通常包括抗體、底物、緩沖液、酶標(biāo)記物等試劑,可用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、生物技術(shù)等領(lǐng)域的研究和診斷。ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。上海伊麗薩生物科技,進(jìn)口ELISA試劑盒代理的信譽(yù)之選。河南綜合ELISA試劑盒器材
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ELISA試劑盒的準(zhǔn)確檢測(cè)依賴(lài)于正確的樣本處理。不同類(lèi)型的樣本,如血清、血漿、組織勻漿等,有不同的處理要求。對(duì)于血清樣本,通常需要在采集后盡快離心分離,避免溶血現(xiàn)象,因?yàn)槿苎赡軙?huì)干擾檢測(cè)結(jié)果。血漿樣本在采集時(shí)需要使用合適的抗凝劑,如EDTA、肝素等,并且在處理過(guò)程中要注意保持低溫,防止凝血因子的***。組織勻漿樣本則需要在勻漿過(guò)程中選擇合適的緩沖液,以保持目標(biāo)蛋白質(zhì)的活性,同時(shí)要注意勻漿的充分性,確保樣本的均一性。只有按照正確的樣本處理要求操作,才能保證ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。河南綜合ELISA試劑盒器材