慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)、球形。病毒顆粒Zui外層是包膜(包膜蛋白決定了gan ran細(xì)胞的類型),再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,Zui里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒gan ran的xian zhu特點(diǎn)是gan ran個(gè)體在出現(xiàn)典型的臨床癥狀之前,大多經(jīng)歷長(zhǎng)達(dá)數(shù)年的潛伏期,之后緩慢發(fā)病,因此這些病原體被稱為慢病毒。慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達(dá)載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質(zhì)粒可提供所有的轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的慢病毒載體所需要的所有輔助蛋白。SIRION Biotech 為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開(kāi)發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗(yàn)提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。為提供更好的服務(wù),上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國(guó)區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務(wù)的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國(guó)市場(chǎng)的營(yíng)銷和技術(shù)支持工作仍將由上海曼博生物負(fù)責(zé)。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒.免疫細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)
為了達(dá)到研究目的,在轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中加入轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑也能有效提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。近幾年LentiBOOST作為一種無(wú)毒性的化學(xué)轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑guang fan引起關(guān)注。LentiBOOST通過(guò)與細(xì)胞膜相互作用降低膜黏稠度,提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。LentiBOOST是德國(guó)Sirion Biotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過(guò)降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。免疫細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)用什么試劑可以做慢病毒轉(zhuǎn)染么?
LentiBOOST是德國(guó)Sirion Biotech開(kāi)發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過(guò)降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。在異種移植后免疫缺陷小鼠體內(nèi),LentiBOOST使再植HSCs的VCN增加2倍,且對(duì)細(xì)胞分化和植入無(wú)影響。LentiBOOST在對(duì)人T細(xì)胞無(wú)細(xì)胞毒作用的情況下可增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)產(chǎn)生更多的Zhong Liu抗原特異性TCR-T細(xì)胞,且轉(zhuǎn)導(dǎo)后的 T細(xì)胞仍能分泌TNF及IFN-γ,并對(duì)抗原陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞具有明顯的細(xì)胞毒作用,這一發(fā)現(xiàn)為ai zheng的基因zhi liao提供新的優(yōu)化策略。為提供更好的服務(wù),上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國(guó)區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務(wù)的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國(guó)市場(chǎng)的營(yíng)銷和技術(shù)支持工作仍將由上海曼博生物負(fù)責(zé)。
人間充質(zhì)干細(xì)胞 (MSCs) 的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長(zhǎng)期轉(zhuǎn)基因表達(dá),并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來(lái)巨大希望。Polybrene是實(shí)驗(yàn)室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑,但它未被批準(zhǔn)用于人體,并且還被證明會(huì)損害MSCs細(xì)胞的增殖和分化。因此,優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗(yàn)是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚(yú)精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,可以按照現(xiàn)行的GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn),且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚(yú)精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且對(duì)細(xì)胞活力或干細(xì)胞特性沒(méi)有劑量依賴性的不良影響。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑的組合dai biao了一種有價(jià)值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱之為原病毒。
First代慢病毒載體以Naldini以及Kafri[2]構(gòu)建的三質(zhì)粒系統(tǒng)為dai biao。該載體系統(tǒng)由包裝質(zhì)粒、包膜質(zhì)粒及載體質(zhì)粒3種質(zhì)粒組成。二代慢病毒載體系統(tǒng)是在di yi代基礎(chǔ)上改進(jìn)的,在包裝質(zhì)粒中刪去了HIV的所有附屬基因vif、vpu、vpr和nef,以減少產(chǎn)生RCR的風(fēng)險(xiǎn)。這些附屬基因的去除并不影響病毒的滴度和轉(zhuǎn)染能力,同時(shí)增加了載體的安全性。第三代慢病毒載體系統(tǒng)又增加了兩個(gè)安全特性:一是構(gòu)建了自身失活的慢病毒載體,即刪除了U3區(qū)的3’ LTR,使載體失去HIV-1增強(qiáng)子及啟動(dòng)子序列,即使存在所有的病毒蛋白也不能轉(zhuǎn)錄出RNA;二是去除了tat基因,代之以異源啟動(dòng)子序列,這樣原始的HIV基因組中的9個(gè)基因在慢病毒載體中只保留了3個(gè)(gag、pol和rev) ,因此第三代慢病毒載體系統(tǒng)更加安全。與第三代系統(tǒng)相比,第二代慢病毒系統(tǒng)使用更多的HIV蛋白(在較少的質(zhì)粒上)以產(chǎn)生功能性慢病毒顆粒。哪個(gè)品牌的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑比較好呢?智能慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)關(guān)鍵要素
加入什么試劑可以提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率?免疫細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)
德國(guó)SirionBiotech公司研發(fā)了LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物細(xì)胞的效率。LentiBOOST是一種無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床應(yīng)用。作為一種普遍作用的(受體非依賴型)佐劑,可應(yīng)用于多種臨床相關(guān)細(xì)胞類型,CD34+造血干細(xì)胞(HSCs)、原代T細(xì)胞和NK細(xì)胞等,對(duì)難轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠T細(xì)胞亦有效。LentiBOOST已成為改進(jìn)體外(exvivo)基因zhi liao和CAR-T細(xì)胞zhi liao的臨床轉(zhuǎn)導(dǎo)方案的選擇。SIRIONBiotech的首席執(zhí)行官ChristianThirion博士說(shuō),SIRION的貢獻(xiàn)是優(yōu)化病毒載體基因的轉(zhuǎn)導(dǎo),從而在zhi liao患者中獲得更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和長(zhǎng)期的基因表達(dá)。此外,通過(guò)降低生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)品所需的慢病毒載體的數(shù)量,使用諸如LentiBOOST之類的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑有助于降低生產(chǎn)成本。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!為提供更好的服務(wù),上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國(guó)區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務(wù)的Exclusive Distributor,LentiBOOST在中國(guó)市場(chǎng)的營(yíng)銷和技術(shù)支持工作仍將由上海曼博生物負(fù)責(zé)。免疫細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)服務(wù)