T細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案

基于慢病毒載體的體外基因zhi liao已在臨床試驗(yàn)中取得良好的效果，有望zhi yu一些造血系統(tǒng)的單基因遺傳病。通過提高靶細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和減少轉(zhuǎn)導(dǎo)中病毒載體量,基因zhi liao有效性、安全性和成本都可以得到改善。不同包膜糖蛋白偽型慢病毒載體通過與細(xì)胞膜表面的不同受體結(jié)合,促進(jìn)病毒黏附和入胞,增強(qiáng)不同靶細(xì)胞的病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。此外病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑可以在病毒進(jìn)入細(xì)胞過程或進(jìn)入后發(fā)揮作用,在提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的同時(shí)使靶轉(zhuǎn)導(dǎo)基因在體內(nèi)長期穩(wěn)定表達(dá)。為了達(dá)到研究目的,在轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中加入轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑也能有效提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。T細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案

人間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可誘導(dǎo)長期轉(zhuǎn)基因表達(dá)，并為多種基因zhi liao應(yīng)用帶來巨大希望。Polybrene是實(shí)驗(yàn)室研究中Zui常用的提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的試劑，但它未被批準(zhǔn)用于人體，并且還被證明會(huì)損害MSCs細(xì)胞的增殖和分化。因此，優(yōu)化轉(zhuǎn)導(dǎo)方案以應(yīng)用于臨床試驗(yàn)是非常有必要的。LentiBOOST和硫酸魚精蛋白是可替代的轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑，可以按照現(xiàn)行的GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)，且很容易應(yīng)用于現(xiàn)有的轉(zhuǎn)導(dǎo)方案，并且曾被用于人類CD34+HSCs細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)研究。這里，我們研究了這些試劑用于脂肪來源MSC細(xì)胞的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增qiang xiao果。我們發(fā)現(xiàn)LentiBOOST和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生與polybrene相當(dāng)甚至更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，且對(duì)細(xì)胞活力或干細(xì)胞特性沒有劑量依賴性的不良影響。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑的組合dai biao了一種有價(jià)值的臨床兼容性polybrene替代方案，具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中MSCs慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！為提供更好的服務(wù)，上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。T細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的特點(diǎn)是什么呢?

目前的基因&細(xì)胞zhi liao主要采用病毒和非病毒兩種載體形式。根據(jù)統(tǒng)計(jì)，病毒載體約占進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)的項(xiàng)目 65%；而慢病毒因無嚴(yán)重的臨床事故出現(xiàn)成為目前相對(duì)安全的病毒載體選擇之一。慢病毒載體具有能gan ran非分裂期細(xì)胞、容納外源性目的基因片段大、穩(wěn)定性強(qiáng)、免疫原性小等特點(diǎn)。大量研究表明，相對(duì)其他病毒載體，慢病毒gan ran效率高，更容易gan ran一些較難gan ran的組織和細(xì)胞，其效率一般可以達(dá)到 30%-95% 以上。病毒顆的限制性攝取粒往往會(huì)降低基因或 shRNA 表達(dá)的成功率，并要求應(yīng)用更高的病毒滴度。然而，增加病毒數(shù)量以促進(jìn)表達(dá)可能會(huì)導(dǎo)致許多細(xì)胞類型的毒性副作用，并帶來不必要的昂貴成本。德國 Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑，專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物細(xì)胞的效率。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑，歡迎咨詢曼博生物！

慢病毒ganran效率受到多種因素的影響，首先，考慮病毒包裝制備是否存在問題，比如外源基因是否正確，病毒滴度是否合格等。其次，考慮病毒運(yùn)輸和保存方式是否得當(dāng)，解凍病毒一定要在冰上進(jìn)行，避免反復(fù)凍融，否則會(huì)影響病毒滴度；-80℃保存半年以上需要重新測定滴度。細(xì)胞狀態(tài)對(duì)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響，良好的生長狀態(tài)是達(dá)到高ganran效率的保證，一般選擇細(xì)胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行g(shù)anran可提高ganran效率。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！什么是慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑呢?

慢病毒是一種有包膜的RNA病毒，直徑為80-120nm，呈二十面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)、球形。病毒顆粒Zui外層是包膜(包膜蛋白決定了gan ran細(xì)胞的類型)，再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼，Zui里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒gan ran的xian zhu特點(diǎn)是gan ran個(gè)體在出現(xiàn)典型的臨床癥狀之前，大多經(jīng)歷長達(dá)數(shù)年的潛伏期，之后緩慢發(fā)病，因此這些病原體被稱為慢病毒。慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達(dá)載體和慢病毒包裝載體組成。而慢病毒包裝質(zhì)粒可提供所有的轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的慢病毒載體所需要的所有輔助蛋白。SIRION Biotech 為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式，并為臨床試驗(yàn)提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。為提供更好的服務(wù)，上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司代理的SIRION Biotech GmbH品牌現(xiàn)已正式變更為Revvity Gene Delivery GmbH。我司仍將作為Revvity Gene Delivery在中國區(qū)域LentiBOOST產(chǎn)品業(yè)務(wù)的Exclusive Distributor，LentiBOOST在中國市場的營銷和技術(shù)支持工作仍將由上海曼博生物負(fù)責(zé)。慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑是什么呢？研究級(jí)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率

什么是慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑?T細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案

LentiBOOST是德國Sirion Biotech開發(fā)的一種高效、無細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑，用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑，通過降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合，提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。SIRION Biotech 為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式，并為臨床試驗(yàn)提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個(gè)臨床試驗(yàn)中使用。LentiBOOST（Pharma grade）jin用于藥物級(jí)的臨床前研究和工藝開發(fā)，以及評(píng)估研究。LentiBOOST（GMP grade）用于臨床階段方案，目前美國和歐洲多個(gè) Phase III 和 Phase I/II 臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行。更多產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物！T細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)優(yōu)化方案