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噬菌體展示抗體片段形式主要是scFv、Fab形式。scFv由VH和VL通過柔性肽連接而成,體積小而可溶性高,通常在細菌系統(tǒng)中表達良好,也因此常被選作噬菌體抗體庫。但因抗體的Fc片段完全缺失,scFv抗體的抗原結(jié)合能力要低于保留部分Fc區(qū)的Fab抗體。scFv抗體又因其單鏈結(jié)構(gòu)形式顯示低熱力學(xué)穩(wěn)定性,易形成聚集體,從而限制了其在篩選治療性抗體的應(yīng)用。Fab抗體片段更接近于完整的抗體,包含輕鏈V區(qū)基因和CH1、CL基因,這使Fab抗體不僅親和力與穩(wěn)定性更好,同時又降低了Fc區(qū)的免疫原性。上海Fab合成文庫篩選流程全人源Fab合成噬菌體文庫哪家強?上海溪長,多資源滿足多樣研究。
噬菌體展示技術(shù)是一種高效基因表達篩選技術(shù),將不同的外源基因分別插入噬菌體載體中,隨著噬菌體的傳代,外源蛋白會展現(xiàn)在噬菌體表面,形成噬菌體文庫。展示在噬菌體表面的蛋白保持了相對的空間構(gòu)象和生物活性,有利于靶分子的特異性識別及結(jié)合,從而實現(xiàn)基因型和表達型的統(tǒng)一。隨后用特定蛋白對噬菌體文庫進行篩選,便可快速的得到與該蛋白具有高度親和力的抗體。篩選出的抗體可以進一步用于生物學(xué)功能研究,而相比之下上海溪長生物技術(shù)有限公司的全人源的Fab合成噬菌體展示文庫效率更高。
溪長生物的全人源Fab合成文庫構(gòu)建是針對CDR3區(qū)做了獨特設(shè)計,作為抗體與抗原結(jié)合的關(guān)鍵區(qū)域,CDR3的長度與氨基酸組成直接決定親和力上限。上海溪長生物技術(shù)有限公司采用三核苷酸隨機化技術(shù)(TrimerPrimers),在文庫構(gòu)建時實現(xiàn)CDR3區(qū)6-25個氨基酸的全覆蓋,并通過密碼子簡并性優(yōu)化,使20種天然氨基酸的分布頻率與人體天然免疫庫高度一致(如酪氨酸占比9.2%、半胱氨酸占比1.8%)。這種“仿生學(xué)”設(shè)計確保文庫中存在大量天然免疫系統(tǒng)難以產(chǎn)生的高親和力構(gòu)象。全人源Fab合成噬菌體文庫優(yōu)勢多,適合不同類型靶點,抗體篩選的高質(zhì)量平臺!
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