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利用電子探針分析方法可以探知材料樣品的化學(xué)組成以及各元素的重量百分?jǐn)?shù)。分析前要根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康闹苽錁悠?,樣品表面要清潔。用波譜儀分析樣品時(shí)要求樣品平整,否則會(huì)降低測(cè)得的X射線強(qiáng)度。定性分析1 點(diǎn)分析用于測(cè)定樣品上某個(gè)指定點(diǎn)的化學(xué)成分。下圖是用能譜儀得到的某鋼定點(diǎn)分析結(jié)果。能譜儀中的多道分析器可使樣品中所有元素的特征X射線信號(hào)同時(shí)檢測(cè)和顯示。不像波譜儀那樣要做全部譜掃描,甚至還要更換分光晶體。2 線分析用于測(cè)定某種元素沿給定直線分布的情況。方法是將X射線譜儀(波譜儀或能譜儀)固定在所要測(cè)量的某元素特征X射線信號(hào)(波長(zhǎng)或能量)的位置上,把電子束沿著指定的方向做直線軌跡掃描,便可得到該元素沿直線特征X射線強(qiáng)度的變化,從而反映了該元素沿直線的濃度分布情況。改變譜儀的位置,便可得到另一元素的X射線強(qiáng)度分布。下圖為50CrNiMo鋼中夾雜Al2O3的線分析像??梢姡贏l2O3夾雜存在的地方,Al的X射線峰較強(qiáng)。主要用來(lái)分析固體物質(zhì)表面的細(xì)小顆?;蛭⑿^(qū)域,小范圍直徑為1μm左右。虹口區(qū)挑選探針銷售廠家
值得一提的是,通過改變外源基因的插入方向或選用不同的RNA聚合酶,可以控制RNA的轉(zhuǎn)錄方向,即以哪條DNA鏈以模板轉(zhuǎn)錄RNA。這種可以得到同義RNA探針(與mRNA同序列)和反義RNA探針(與mRNA互補(bǔ)),反義RNA又稱cRNA,除可用于反義核酸研究外,還可用于檢測(cè)mRNA的表達(dá)水平。在這種情況下,因?yàn)樘结樅桶行蛄芯鶠閱捂?,所以雜交的效率要比DNA-DNA雜交高幾個(gè)數(shù)量級(jí)。RNA探針除可用于檢測(cè)DNA和mRNA外,還有一個(gè)重要用途,在研究基因表達(dá)時(shí),常常需要觀察該基因的轉(zhuǎn)錄狀況。虹口區(qū)挑選探針銷售廠家由分光晶體所分散的單一波長(zhǎng)X射線被X射線檢測(cè)器接受,常用的檢測(cè)器一般是正比計(jì)數(shù)器。
電子探針(Electron Probe Microanalysis)是一種利用電子束作用樣品后產(chǎn)生的特征X射線進(jìn)行微區(qū)成分分析的儀器, [1]可以用來(lái)分析薄片中礦物微區(qū)的化學(xué)組成。除H、He、Li、Be等幾個(gè)較輕元素外,還有U元素以后的元素以外都可進(jìn)行定性和定量分析。電子探針的大批量是利用經(jīng)過加速和聚焦的極窄的電子束為探針,激發(fā)試樣中某一微小區(qū)域,使其發(fā)出特征X射線,測(cè)定該X射線的波長(zhǎng)和強(qiáng)度,即可對(duì)該微區(qū)的元素作定性或定量分析。電子探針顯微分析原理及其發(fā)展的初期是建立在X射線光譜分析和電子顯微鏡這兩種技術(shù)基礎(chǔ)上的,該儀器實(shí)質(zhì)上就是這兩種儀器的科學(xué)組合。
為了確定探針是否與相應(yīng)的基因組DNA雜交,有必要對(duì)探針加以標(biāo)記,以便在結(jié)合部位獲得可識(shí)別的信號(hào),通常采用放射性同位素32P標(biāo)記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來(lái)已發(fā)展了一些用非同位素如生物素-親合素系統(tǒng)、地高辛配體等作為標(biāo)記物的方法。非同位素標(biāo)記的優(yōu)點(diǎn)是保存時(shí)間較長(zhǎng),而且避免了同位素的污染。**常用的探針標(biāo)記法是缺口平移法(nick translation)。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶Ⅰ(DNAseⅠ)在探針DNA雙鏈上造成缺口,然后再借助于DNA聚合酶Ⅰ(DNa poly merasⅠ)的5’→3’的外切酶活性,切去帶有5’磷酸的核苷酸;同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚酶活性,使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核苷酸補(bǔ)入缺口,DNA聚合酶Ⅰ的這兩種活性的交替作用,使缺口不斷向3’的方向移動(dòng),同時(shí)DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標(biāo)記的核苷酸所取代。分析對(duì)象是固體物質(zhì)表面細(xì)小顆?;蛭⑿^(qū)域,小范圍直徑為1μm。
探針的標(biāo)記方式有放射性標(biāo)記和非放射性標(biāo)記。標(biāo)記物質(zhì)有放射性元素(如32P等)和非放射性物質(zhì)(如生物素、地高辛等)。32P是**常用的核苷酸標(biāo)記同位素,被標(biāo)記的dNTP本身就帶有磷酸基團(tuán),便于標(biāo)記。特點(diǎn)是比活性高,可達(dá)9000Ci/mmol;發(fā)射的β射線能量高。用它標(biāo)記的探針自顯影時(shí)間短,靈敏度高。32P的半壽期短,雖使用不方便,但為廢棄物的處理減輕了壓力。非放射性標(biāo)記法有酶標(biāo)法和化學(xué)物標(biāo)記法。酶標(biāo)方法與免疫測(cè)定ELISA方法相似,只是被標(biāo)記的核酸代替了被標(biāo)記的抗體,事實(shí)上被標(biāo)記的抗體也稱為探針,現(xiàn)有許多商品是生物素、地高辛標(biāo)記的。當(dāng)某一X射線光子進(jìn)入計(jì)數(shù)管后,管內(nèi)氣體電離,并在電場(chǎng)作用下產(chǎn)生電脈沖信號(hào)。嘉定區(qū)質(zhì)量探針維修價(jià)格
可以進(jìn)行點(diǎn)、線掃描(得到層成分分布信息)、面掃描分析(得到成分面分布圖像)。虹口區(qū)挑選探針銷售廠家
DNA探針(DNA probe)是**常用的核酸探針,為長(zhǎng)度在幾十到幾百甚至上千堿基對(duì)的單鏈或雙鏈DNA,用特殊示蹤劑(如同位素、酶或有色基團(tuán))進(jìn)行標(biāo)記;在適當(dāng)?shù)膒H值、溫度和離子強(qiáng)度下,DNA探針利用分子的變性、復(fù)性以及堿基互補(bǔ)配對(duì)的高度精確性,能與待測(cè)樣本中互補(bǔ)的非標(biāo)記單鏈DNA或RNA以氫鍵結(jié)合(雜交),形成雙鏈復(fù)合物(雜交體)。雜交體的穩(wěn)定性取決于兩條單鏈核苷酸之間的互補(bǔ)程度。在嚴(yán)格的條件下(高pH值、高溫、低離子強(qiáng)度),不完全匹配的雜交體的兩鏈將會(huì)解離,而完全匹配的雜交體將保持雙鏈。將未配對(duì)結(jié)合的探針洗去后,可用放射自顯影或酶聯(lián)反應(yīng)等檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)雜交反應(yīng)結(jié)果。虹口區(qū)挑選探針銷售廠家
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