目前缺血性腦卒中患者為有效的藥物是組織纖溶酶原劑（tPA）。但tPA溶栓會(huì)引起血腦屏障（BBB）破壞，導(dǎo)致出血轉(zhuǎn)化，不僅減弱了藥物發(fā)揮的效果，并且與不良預(yù)后和死亡密切相關(guān)。因此找到有效的臨床干預(yù)措施對(duì)于改善tPA效益仍然十分迫切。研究表明，間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源胞外囊泡（MSC-EVs）能夠自由通過(guò)BBB，具有良好的BBB保護(hù)作用以及促進(jìn)組織損傷修復(fù)功能。采用MSC-EVs聯(lián)合tPA溶栓缺血性腦卒中具有理論依據(jù)。近日，研究人員報(bào)道MSC-EVs通過(guò)抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞活化和炎癥，從而發(fā)揮BBB保護(hù)作用，進(jìn)而改善tPA缺血性腦卒中的效益。研究人員構(gòu)建大腦中動(dòng)脈閉塞后再通（MCAO/R）的缺血性腦卒中小鼠模型，并在使用tPA前加用MSC-EVs處理。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與tPA單獨(dú)處理相比，經(jīng)MSC-EVs處理后BBB破壞程度減輕，出血轉(zhuǎn)化減少，小鼠神經(jīng)功能改善。熒光成像發(fā)現(xiàn)MSC-EVs可透過(guò)BBB并集聚在顱內(nèi)缺血區(qū)，增加了星形膠質(zhì)細(xì)胞的攝取。進(jìn)一步機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，MSC-EVs通過(guò)miR-125b-5p靶向TLR4/NF-κB通路，進(jìn)而抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞活化和炎癥，從而發(fā)揮BBB保護(hù)作用。 大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞分離自大隱靜脈。小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞詢問(wèn)報(bào)價(jià)
三、實(shí)驗(yàn)用品1、試劑：三尖杉酯堿（HT），300μg/ml，100mmol/LTris-HCl（），5mol/LEDTA緩沖液、堿性裂解液：，1%SDS、醋酸鈉：3mol/LKAc（）;異丙醇;70%乙醇;溴酚藍(lán)，蔗糖指示劑。TBE電泳緩沖液，1%瓊脂糖，溴乙錠。PI母液：500μg/ml;Ho33342母液：2mmol/L。2、儀器設(shè)備：熒光顯微鏡，電泳儀，電泳槽，微量加樣器（1ml，100μl）、，載玻片，蓋玻片。四、實(shí)驗(yàn)材料人早幼粒白血病HL-60細(xì)胞，用含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基在37°C，5%CO2條件下培養(yǎng)。五、方法步驟1、三尖杉酯堿誘發(fā)HL-60細(xì)胞凋亡（1）實(shí)驗(yàn)前約24小時(shí)，接種兩瓶HL-60細(xì)胞，標(biāo)記（6）、（37），每瓶含約5ml培養(yǎng)液，置2°C，<>%CO<>培養(yǎng)箱培養(yǎng)。（2）實(shí)驗(yàn)前約，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到70%，（200）號(hào)瓶加入三尖杉酯堿1μl，使終濃度為7μg/ml，（4）號(hào)瓶中加入同等量PBS（）作對(duì)照。共同放入培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)<>.<>小時(shí)。2、Ho33342和PI雙重染色鑒別三種細(xì)胞（1）染色：將瓶中的細(xì)胞搖勻取200μl于，加入Ho33342母液2μl，PI20μl，染色15分鐘。（2）滴片：取一載玻片用雙面膠圍成一小室，從離心管中各取以上染色后的細(xì)胞懸液10μl，加入小室內(nèi)蓋上蓋玻片，熒光鏡下用紫外激發(fā)光。 骨髓基質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞原代成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)。
胚胎干細(xì)胞是一類具有強(qiáng)大分化潛能的細(xì)胞類群，能夠分化機(jī)體內(nèi)幾乎各種類型的細(xì)胞，包括血管細(xì)胞。血管平滑肌細(xì)胞是血管的主要細(xì)胞組成，對(duì)維持血管壁的完整和血管功能至關(guān)重要。人多能干細(xì)胞衍生血管平滑肌細(xì)胞在血管疾病模型構(gòu)建、藥物研發(fā)和血管組織工程方面具有的應(yīng)用價(jià)值。研究發(fā)現(xiàn)存在于哺乳動(dòng)物的轉(zhuǎn)錄因子BTBandCNChomology1（BACH1）在多種心血管疾病中發(fā)揮重要的調(diào)控作用，包括干細(xì)胞維持自我更新和決定分化命運(yùn)等，但BACH1在干細(xì)胞向血管平滑肌細(xì)胞分化過(guò)程中的作用還不清楚。近日，研究人員揭示了BACH1在調(diào)控人胚胎干細(xì)胞向血管平滑細(xì)胞分化中的重要作用及機(jī)制。研究人員發(fā)現(xiàn)，在誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞向血管平滑細(xì)胞分化過(guò)程中，BACH1水平逐漸升高。缺失BACH1的干細(xì)胞在分化過(guò)程中平滑肌標(biāo)志基因表達(dá)降低，分化效率降低。而在中胚層分化階段后誘導(dǎo)BACH1過(guò)表達(dá)，分化細(xì)胞中平滑肌標(biāo)志基因表達(dá)上調(diào)。進(jìn)一步機(jī)制研究發(fā)現(xiàn)，BACH1具有調(diào)控組蛋白甲基化修飾的作用。BACH1將精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1（CARM1）招募到平滑肌標(biāo)志基因啟動(dòng)子區(qū)，增加組蛋白3第17位精氨酸二甲基化（H3R17me2）修飾，進(jìn)而促進(jìn)平滑肌標(biāo)志基因表達(dá)。抑制CARM1或H3R17me2。
大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞分離自關(guān)節(jié)軟骨組織；關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨，表面光滑，呈淡藍(lán)色，有光澤，它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架，這種框架呈半環(huán)形，類似拱形球門，底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上，上端朝向關(guān)節(jié)面，這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來(lái)而不會(huì)掉下來(lái)，同時(shí)受到壓力的時(shí)候，還可以有少許的變形，起到緩沖壓力的作用。細(xì)胞為圓形、或偏梭形，單層貼壁生長(zhǎng)，呈規(guī)律性分布，可能出現(xiàn)同源細(xì)胞群，每2-8個(gè)細(xì)胞為一個(gè)群生長(zhǎng)，細(xì)胞質(zhì)豐富，細(xì)胞核為圓形或卵圓形，細(xì)胞增殖能力差。體外培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自肺；
大鼠肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞分離自肺動(dòng)脈組織；肺動(dòng)脈是由右心室肺動(dòng)脈圓錐發(fā)出后至主動(dòng)脈弓下方，約在第5胸椎高度分為左右肺動(dòng)脈。它是輸送靜脈血至肺的一條粗而短的干。自右心室的肺動(dòng)脈口起始，在主動(dòng)脈起始部的前方向左上后方斜升，達(dá)主動(dòng)脈弓的下方，約平第4胸椎體下緣高度，分為左、右肺動(dòng)脈。在分叉處稍左側(cè)，肺動(dòng)脈與主動(dòng)脈弓下緣之間，有一條結(jié)締組織纖維索相連，稱為動(dòng)脈韌帶，或稱動(dòng)脈導(dǎo)管索；剛分離的細(xì)胞在培養(yǎng)6-8小時(shí)開(kāi)始貼壁，8-24小時(shí)開(kāi)始大量貼壁并開(kāi)始生長(zhǎng)，24小時(shí)后細(xì)胞逐步匯合，細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞在合成和分泌細(xì)胞因子、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。大鼠成骨細(xì)胞分離自成骨細(xì)胞主要由內(nèi)外骨膜和骨髓中基質(zhì)內(nèi)的間充質(zhì)始祖細(xì)胞分化而來(lái)。外周血樹(shù)突狀(DC)細(xì)胞細(xì)胞詢問(wèn)報(bào)價(jià)
本公司生產(chǎn)的人主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶和膠原酶混合消化制備而來(lái)。小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞詢問(wèn)報(bào)價(jià)
細(xì)胞外囊泡是細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì)，其中包含生物活性分子如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸，可以轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞并引起功能性反應(yīng)。肝臟來(lái)源EVs被證實(shí)可以促進(jìn)早期肥胖小鼠胰島素敏感性，為理解肝臟細(xì)胞EVs長(zhǎng)期如何促進(jìn)組織適應(yīng)從而影響血糖控制奠定基礎(chǔ)。研究人員在此基礎(chǔ)上，使用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，識(shí)別小鼠肝臟從健康逐步發(fā)展至非酒精性脂肪肝炎（NASH）產(chǎn)生的EVs的蛋白質(zhì)組成變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不論肝臟病理如何，來(lái)自小鼠和人類肝臟的EVs通過(guò)促進(jìn)胰島素分泌和改善葡萄糖效應(yīng)（GE）從而急性改善血糖控制，與胰島素敏感性變化無(wú)關(guān)。上述反應(yīng)特異于肝臟EVs，且依賴于EV跨膜蛋白。小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞詢問(wèn)報(bào)價(jià)