在現(xiàn)代替物技術(shù)的舞臺上,限制性核酸內(nèi)切酶AccI是一位備受矚目的“明星”。它是一種能夠特異性識別并切割DNA的酶,憑借其精細(xì)的切割能力,在基因工程領(lǐng)域扮演著不可或缺的角色。AccI的識別序列是“GT^AC”,這意味著它會(huì)在DNA雙鏈上找到這一特定的核苷酸序列,并在“^”標(biāo)記的位置將DNA鏈切斷。這種切割方式非常獨(dú)特,它會(huì)產(chǎn)生黏性末端,即切割后的DNA片段兩端會(huì)暴露出一段互補(bǔ)的單鏈區(qū)域。這種黏性末端的特性使得AccI在基因克隆和重組DNA技術(shù)中大顯身手。在基因工程中,科學(xué)家們常常需要將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中分離出來,并將其插入到合適的載體中。AccI可以像一把“精細(xì)刻刀”一樣,將目標(biāo)基因和載體DNA在特定位置切割,暴露出的黏性末端能夠通過堿基互補(bǔ)配對的方式相互結(jié)合,再利用DNA連接酶將它們連接起來,從而構(gòu)建出重組DNA分子。AccI的應(yīng)用不僅局限于基因克隆,它還在基因分析和診斷中發(fā)揮著重要作用。通過AccI對DNA的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,幫助診斷某些遺傳性疾病。此外,AccI還可以用于構(gòu)建基因文庫,為研究基因功能和進(jìn)化提供了重要的工具。AccI的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用是分子生物學(xué)發(fā)展的重要里程碑。 Phusion DNA Polymerase的反應(yīng)條件穩(wěn)健,幾乎無需優(yōu)化,即使在存在PCR抑制劑的情況下也能表現(xiàn)出色。Recombinant Human APRIL/TNFSF13 Trimer Protein,His-Flag Tag
重組人LAIR1蛋白(Recombinant Human LAIR1 Protein)是一種重要的免疫抑制性受體,屬于免疫球蛋白超家族成員,主要表達(dá)于多種免疫細(xì)胞表面,包括T細(xì)胞、B細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)以及樹突狀細(xì)胞等。LAIR1(Leukocyte-Associated Immunoglobulin-Like Receptor 1)通過其胞外結(jié)構(gòu)域與膠原蛋白等配體結(jié)合,傳遞抑制性信號,從而調(diào)控免疫細(xì)胞的活化、增殖和效應(yīng)功能,在維持免疫穩(wěn)態(tài)和防止過度免疫反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。該重組蛋白通常采用真核表達(dá)系統(tǒng)(如HEK293細(xì)胞)制備,確保了其天然構(gòu)象和生物活性。其N端或C端常融合His標(biāo)簽或hFc標(biāo)簽,便于通過親和層析進(jìn)行高效純化,獲得高純度、高穩(wěn)定性的蛋白產(chǎn)物。這種設(shè)計(jì)不僅提高了蛋白的溶解性和穩(wěn)定性,也方便了后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作,如ELISA、Western blot、免疫沉淀及受體-配體相互作用研究等。研究表明,LAIR1在自身免疫病、沾染免疫及腫瘤免疫逃逸等過程中具有重要作用。LAIR1的異常表達(dá)與多種疾病的免疫失調(diào)密切相關(guān),因此,重組人LAIR1蛋白不僅是研究免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的重要工具,也為開發(fā)免疫治策略提供了有力支持,具有重要的科研和臨床應(yīng)用價(jià)值。Recombinant Mouse bFGF/FGF-2 ProteinPhusion Master Mix對各種類型的DNA模板(如基因組DNA、質(zhì)粒DNA和cDNA)均表現(xiàn)出良好的兼容性。
重組人TNFR1蛋白是一種在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的重組蛋白,融合了hFc標(biāo)簽,便于純化和檢測。TNFR1(TumorNecrosisFactorReceptor1)是TNF-α的主要受體之一,廣參與細(xì)胞凋亡、炎癥反應(yīng)和免疫調(diào)節(jié)。它在多種生物學(xué)過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,包括細(xì)胞死亡、細(xì)胞存活、細(xì)胞增殖和細(xì)胞分化。TNFR1的功能與機(jī)制TNFR1是一種跨膜受體蛋白,通過其胞外區(qū)與TNF-α結(jié)合,啟動(dòng)下游的信號通路。TNFR1的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)依賴于其胞內(nèi)段的死亡結(jié)構(gòu)域(DD),能夠啟動(dòng)NF-κB、MAPK和JNK等信號通路,進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的存活和凋亡。在炎癥反應(yīng)中,TNFR1通過啟動(dòng)NF-κB信號通路,促進(jìn)炎癥因子的分泌。在細(xì)胞凋亡中,TNFR1通過啟動(dòng)caspase級聯(lián)反應(yīng),誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。TNFR1的功能異常與多種疾病相關(guān),如炎癥性疾病、自身免疫性疾病和病。重組人TNFR1蛋白(hFcTag)的特點(diǎn)重組人TNFR1蛋白(hFcTag)具有以下明顯特點(diǎn):高純度:純度≥95%(經(jīng)SDS-PAGE和SEC-HPLC驗(yàn)證),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。低內(nèi)素:內(nèi)素水平<0.1EU/μg,適合用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)研究。功能完整:保留了天然TNFR1的配體結(jié)合位點(diǎn)和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能。hFc標(biāo)簽:便于通過抗人IgG抗體進(jìn)行檢測和免疫沉淀實(shí)驗(yàn)。
在現(xiàn)代替物技術(shù)的微觀世界中,限制性核酸內(nèi)切酶是基因工程的關(guān)鍵工具之一,而 AscI 便是其中一位“稀有切割手”。它以其獨(dú)特的識別序列和精細(xì)的切割能力,在基因工程、分子生物學(xué)研究以及遺傳學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。AscI 的識別序列是“GG^CGCGCC”,這一序列在基因組中極為罕見,使得 AscI 的切割位點(diǎn)相對稀少。這種稀有性使得 AscI 在處理復(fù)雜基因組時(shí)具有獨(dú)特的優(yōu)勢,能夠避免過度切割導(dǎo)致的片段過小或信息丟失。AscI 會(huì)在“^”標(biāo)記的位置將 DNA 鏈切斷,產(chǎn)生黏性末端,這種黏性末端的特性使得 AscI 在基因克隆和重組 DNA 構(gòu)建中具有獨(dú)特的優(yōu)勢。在基因工程中,AscI 的應(yīng)用極為廣。科學(xué)家可以利用它將目標(biāo)基因從復(fù)雜的基因組中精細(xì)地分離出來,再通過 DNA 連接酶將切割后的基因片段與載體 DNA 連接起來,構(gòu)建出能夠高效表達(dá)目標(biāo)蛋白的重組載體。這種精細(xì)的切割能力使得 AscI 成為處理大型基因組或復(fù)雜基因片段時(shí)的理想選擇。AscI 的另一個(gè)重要應(yīng)用是基因分析。通過觀察 AscI 對不同 DNA 樣本的切割模式,科學(xué)家可以分析基因的多態(tài)性,進(jìn)而推斷出基因的結(jié)構(gòu)和功能差異。這種技術(shù)在遺傳病診斷和基因多樣性研究中具有重要意義。T4 DNA 聚合酶相對不耐熱,在 70℃加熱 10 分鐘可使 T4 DNA 聚合酶失活,因此在實(shí)驗(yàn)操作過程中需要注意溫度。
RecombinantHumanSEZ6Protein,hFcTag:神經(jīng)突觸與病靶向治的跨界探針SEZ6(Seizure-related6)是一種腦富集的跨膜糖蛋白,在神經(jīng)元樹突棘形成和神經(jīng)母細(xì)胞瘤、小細(xì)胞肺病等神經(jīng)內(nèi)分泌病表面高表達(dá),被視為可內(nèi)吞的ADC理想靶點(diǎn)。本品由CHO-K1真核表達(dá)系統(tǒng)分泌,包含完整胞外結(jié)構(gòu)域(aa20-614),C端融合人IgG1Fc形成穩(wěn)定二聚體,經(jīng)ProteinA與分子篩兩步純化,SDS-PAGE非還原條帶≈220kDa,純度≥98%;內(nèi)素<0.05EU/μg,可直接用于小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。功能驗(yàn)證:ELISA顯示其與配體C1q樣蛋白復(fù)合物親和力KD=7.8nM;在SH-SY5Y細(xì)胞中,100ng/mL重組SEZ6-hFc可明顯促進(jìn)神經(jīng)元樣突起伸長(平均長度↑1.9倍)。此外,該蛋白與抗SEZ6抗體競爭結(jié)合,IC??=12nM,為ADC內(nèi)化效率評價(jià)提供定量標(biāo)準(zhǔn)。hFc標(biāo)簽兼容流式、SPR及免疫共沉淀,支持病表面抗原密度檢測、抗體藥篩選及神經(jīng)突觸形成機(jī)制研究,是連接神經(jīng)科學(xué)與病靶向治的質(zhì)量工具。Endo H,糖苷內(nèi)切酶 H 具有高度特異性的催化活性,它能夠特異性地水解 N - 連接寡糖鏈中兩個(gè)糖苷鍵。Human Fractalkine/CX3CL1
Ultra-Long Master Mix 是一種用于長片段PCR擴(kuò)增的預(yù)混液,它含有經(jīng)過特殊修飾的熱穩(wěn)定Taq DNA聚合酶。Recombinant Human APRIL/TNFSF13 Trimer Protein,His-Flag Tag
SEMA4B屬IV類跨膜信號素,兼具軸突排斥與T細(xì)胞共抑制雙重功能,在阿爾茨海默病、肺病及結(jié)直腸病中表達(dá)失衡。本品利用HEK293真核表達(dá)系統(tǒng),完整覆蓋胞外Sema域及PSI-IPT連接區(qū)(aa 1-712),C端6×His標(biāo)簽經(jīng)Ni-NTA與SEC兩步純化,SDS-PAGE呈單一條帶,純度≥97%;內(nèi)素<0.03 EU/μg,適配小鼠體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。鈣離子依賴性ELISA顯示,其與Plexin-B2親和力KD=9.2 nM,可阻斷Plexin-B2介導(dǎo)的神經(jīng)元生長錐塌陷(IC??=60 ng/mL)。在CT26荷瘤模型中,腹腔注射20 μg重組SEMA4B,病浸潤C(jī)D8? T細(xì)胞比例提升2.6倍,同時(shí)PD-1表達(dá)下調(diào)30%,提示免疫剎車解除。His標(biāo)簽支持BLI、SPR及免疫共沉淀,可高通量篩選阻斷抗體或降解劑。該蛋白為解析SEMA4B在神經(jīng)—免疫交叉對話中的分子機(jī)制,及開發(fā)靶向腫瘤免疫微環(huán)境的新型生物制劑,提供了高活性、標(biāo)準(zhǔn)化的研究級試劑。Recombinant Human APRIL/TNFSF13 Trimer Protein,His-Flag Tag